Karen Tereza Altieri - Faculdade de Odontologia - Unesp

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4.4.3 Preparo dos materiais microbiológicos
Preparo de soluções e meios de cultura
O meio de cultura Tryptic Soy Broth (TSB) foi preparado para a
inoculação dos microrganismos e para a contaminação e a incubação das
próteses totais e corpos-de-prova 38,68,74,105 . O meio de cultura TSB foi
proporcionado, manipulado e esterilizado segundo as recomendações do
fabricante. Esse meio de cultura constitui-se de um caldo nutriente que propicia o
crescimento de vários tipos de microrganismos, incluindo a espécie testada
neste estudo. Para o preparo do meio, foi utilizada uma proporção de 30g de pó
para 1 L de água destilada. Após o preparo do meio de cultura, para a
inoculação dos microrganismos, uma alíquota de 10 mL foi pipetada e
dispensada em tubos de ensaio. Os tubos de ensaio foram tampados com
algodão e devidamente identificados e datados. Para a contaminação e a
incubação das próteses totais, 200 mL do meio de cultura foram dispensados em
béquer de 600 mL, os quais foram posteriormente cobertos com papel alumínio,
identificados e datados. Para a contaminação e a incubação dos corpos-deprova,
200 mL do meio de cultura foram dispensados em erlenmeyer, os quais
foram posteriormente cobertos com papel alumínio, identificados e datados.
Tubos de ensaio, béqueres e erlenmeyers foram, então, levados em autoclave
vertical para esterilização a 121 °C por 20 min. Após esse procedimento, eles
foram resfriados, lentamente, até atingirem a temperatura ambiente, e
armazenados em refrigerador a 5 °C até a sua utilização nos procedimentos
experimentais.
A solução salina utilizada nas diluições seriadas foi preparada
pela diluição completa de 8,5 g de cloreto de sódio em 1 L de água destilada.