I Congresso de Biomedicina - Unifenas
I Congresso de Biomedicina - Unifenas I Congresso de Biomedicina - Unifenas
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UNIFENAS<br />
Universida<strong>de</strong> José do Rosário Vellano<br />
Curso <strong>de</strong> <strong>Biomedicina</strong><br />
ANAIS<br />
l <strong>Congresso</strong> e V Simpósio <strong>de</strong> <strong>Biomedicina</strong><br />
ALFENAS – MG<br />
2008
UNIFENAS<br />
Universida<strong>de</strong> José do Rosário Vellano<br />
Prof a . Maria do Rosário Araújo Velano<br />
Reitora da UNIFENAS<br />
Dr a . Larissa Araújo Velano<br />
Vice-Reitora da UNIFENAS<br />
Dr a . Viviane Araújo Velano Cassis<br />
Chefe <strong>de</strong> Gabinete da Reitoria<br />
Prof. João Batista Magalhães<br />
Supervisor <strong>de</strong> Campi<br />
Prof a . Daisy Fabris <strong>de</strong> Almeida Singi<br />
Supervisora Pedagógica<br />
Prof. Vinícius Vieira Vignoli<br />
Supervisor <strong>de</strong> Texto e Publicações<br />
Prof. Oswaldo Luiz Mariano<br />
Supervisor Administrativo<br />
Prof. Mário Sérgio <strong>de</strong> Oliveira Swertz<br />
Surpervisor <strong>de</strong> Pesquisa e Pós-graduação<br />
Paulo Ta<strong>de</strong>u Barroso <strong>de</strong> Sales<br />
Gerente Financeiro<br />
Sandra Regina Remondi<br />
Supervisão <strong>de</strong> Avaliação<br />
Prof a . Marlene Leite Godoy Vieira <strong>de</strong> Souza<br />
Coor<strong>de</strong>nadora <strong>de</strong> Graduação<br />
Prof. Rogério Ramos do Prado<br />
Coor<strong>de</strong>nador <strong>de</strong> Extensão – Campus Alfenas<br />
Profa. Luísa Barbosa Messora<br />
Coor<strong>de</strong>nadora do Curso <strong>de</strong> <strong>Biomedicina</strong> – Campus Alfenas
COMISSÃO ORGANIZADORA<br />
Julieta Maria M. N. M. Santos<br />
Luisa Barbosa Messora<br />
Marcelo Reis Costa<br />
Nelma <strong>de</strong> Mello Silva Oliveira<br />
Silmara Paula Gouveia <strong>de</strong> Lima<br />
COMITÊ CIENTÍFICO<br />
Luisa Barbosa Messora<br />
Marcelo Reis Costa<br />
Nelma <strong>de</strong> Mello Silva Oliveira<br />
COMISSÃO ORGANIZADORA ACADÊMICA<br />
Cristiane da Silva dos Santos<br />
Danylo Dosa <strong>de</strong> Paiva<br />
Francini Marcelini Silva Neves<br />
Helena Yukie Inohue<br />
Juliana Cristina Pereira<br />
Susana Linares Xisto<br />
Apoio Institucional<br />
Coor<strong>de</strong>nação do Curso Bomedicina<br />
Luisa Barbosa Messora<br />
Assessoria <strong>de</strong> Divulgação<br />
Equipe <strong>de</strong> Imprensa<br />
Jornal da UNIFENAS / Jornal dos Lagos / TV Alfenas / Rádio Atenas<br />
Impressão<br />
Arte Gráfica Atenas
AGRADECIMENTO<br />
O <strong>Congresso</strong> do Curso <strong>de</strong> <strong>Biomedicina</strong> abriu um espaço no qual alunos e professores,<br />
num trabalho em conjunto, mostram suas pesquisas no intuito <strong>de</strong> contribuir com o<br />
progresso científico e com a Universida<strong>de</strong> José do Rosário Vellano consolidando um dos<br />
pilares que sustentam a nossa Universida<strong>de</strong>. Portanto, cabe o nosso agra<strong>de</strong>cimento a<br />
Reitora Prof a . Maria do Rosário Araújo Velano, a Vice–Reitora Dr a . Larissa Araújo Velano<br />
e a Chefe <strong>de</strong> Gabinete Viviane Araújo Velano Cassis que primam pelo ensino <strong>de</strong><br />
qualida<strong>de</strong>, pela extensão da universida<strong>de</strong> em trabalhos a comunida<strong>de</strong> e pela pesquisa <strong>de</strong><br />
qualida<strong>de</strong>. E aos Supervisores <strong>de</strong> Campi João Batista Magalhães, <strong>de</strong> Texto e Publicação<br />
Vinicius Vignoli, Pesquisa e Pós-graduação Mário Sérgio Swertz <strong>de</strong> Oliveira e a<br />
Coor<strong>de</strong>nadora <strong>de</strong> Graduação Prof a . Marlene Leite Godoy Vieira <strong>de</strong> Souza que juntos<br />
ajudam a manter uma administração harmoniosa e eficiente. E, ainda, aos professores,<br />
alunos e todos os funcionários que não me<strong>de</strong>m esforços para realização <strong>de</strong>sses eventos<br />
que enriquece a educação continuada. E, finalmente, a Coor<strong>de</strong>nadora do Curso <strong>de</strong><br />
<strong>Biomedicina</strong> Luisa Barbosa Messora que com sua <strong>de</strong>dicação e esforços trabalha para<br />
realização do <strong>Congresso</strong> e Simpósio <strong>de</strong> <strong>Biomedicina</strong>.<br />
COMITÊ CIENTÍFICO<br />
Luísa Barbosa Messora<br />
Nelma <strong>de</strong> Mello Silva Oliveira<br />
Marcelo Reis Costa
16h - ENTREGA DE MATERIAL<br />
16h30min - CERIMÔNIA DE ABERTURA<br />
I <strong>Congresso</strong> e V Simpósio <strong>de</strong> <strong>Biomedicina</strong><br />
19 a 21 <strong>de</strong> novembro <strong>de</strong> 2008 – Sala <strong>de</strong> Eventos I<br />
19 <strong>de</strong> novembro<br />
17h - PALESTRA 1 - "Legalida<strong>de</strong>s, Responsabilida<strong>de</strong>s e os Campos <strong>de</strong> Atuação do Profissional<br />
Biomédico”<br />
Dra. Tatiana Marylin Freire Casarino<br />
Biomédica - Delegacia do CRBM 3º região em B.H Especialista em Administração Hospitalar e<br />
Biotecnologia Professora da UNIFENAS - Campus Boaventura B.H<br />
9h - MINICURSO 1 – “<strong>Biomedicina</strong> e Perícia Criminal"<br />
Dra. Bruna Libone UNESP/Botucatu<br />
Biomédica - Perita Criminal NPC Ribeirão Preto<br />
20 <strong>de</strong> novembro<br />
14h - APRESENTAÇÃO DE TRABALHOS CIENTÍFICOS<br />
17h - PALESTRA 2 - "Nutrigenômica: implicações da interação nutriente-genoma"<br />
Dra. Fernanda Aparecida Domenici<br />
PhD Biomédica responsável pelo Laboratório <strong>de</strong> Nutrição do Departamento <strong>de</strong> Clínica Médica da<br />
Faculda<strong>de</strong> <strong>de</strong> Medicina USP - Ribeirão Preto<br />
19h - PALESTRA 3 - "Atuação do Profissional Biomédico na Imagenologia"<br />
Dra. Thais Maria Almeida Costa - Ex-aluna do curso <strong>de</strong> <strong>Biomedicina</strong> da UNIFENAS.<br />
Especialista em Imagenologia pelo Instituto <strong>de</strong> Ensino e Pesquisa Albert Einstein<br />
21 h - PALESTRA 4 - PALESTRA MOTIVACIONAL<br />
21 <strong>de</strong> novembro<br />
16h - PREMIAÇÃO DOS TRABALHOS CIENTÍFICOS<br />
17h - PALESTRA 5 - "PCR em Tempo Real: Conceitos e Aplicações"<br />
Dr. Robson Francisco Carvalho<br />
PhD UNESP/Botucatu Laboratório Applied Biosystems SP<br />
19h - PALESTRA 6 - "A Importância da Célula-Tronco no Futuro da Humanida<strong>de</strong>"<br />
Dra. Bárbara Amélia Santana Lemos<br />
PhD Responsável pelo Laboratório <strong>de</strong> Hematologia da Faculda<strong>de</strong> <strong>de</strong> Medicina USP -Ribeirão<br />
Preto<br />
21 h - PALESTRA 5 - "Pelos Caminhos do Sangue"<br />
Dra. Ana Silvia Gouvêa <strong>de</strong> Lima<br />
Doutora em Genética Responsável pelo Laboratório <strong>de</strong> Hematologia da Faculda<strong>de</strong> <strong>de</strong><br />
Medicina USP - Ribeirão Preto
Sumário<br />
Teste do micronúcleo em células da medula óssea <strong>de</strong> roedores in vivo para<br />
avaliação do potencial mutagênico do extrato hidroalcoólico <strong>de</strong> Tabebuia<br />
avellanedae Lor. ex Griseb. (ipê-roxo) ...........................................................................8<br />
Análise da ativida<strong>de</strong> antimicrobiana com diferentes extratos <strong>de</strong> própolis ..................9<br />
Prevalência da Gardnerella vaginalis e sua abordagem no diagnóstico<br />
colpocitológico .............................................................................................................. 10<br />
Avaliação microbiológica <strong>de</strong> salames industrializados e artesanais comercializados<br />
na cida<strong>de</strong> <strong>de</strong> Alfenas ..................................................................................................... 11<br />
Pesquisa <strong>de</strong> enteroparasitas helmintos e protozoários com ênfase em<br />
Cryptosporidium spp. e Giardia spp. em alfaces (Lactuca sativa) comercializadas<br />
na feira livre <strong>de</strong> Alfenas/MG. ......................................................................................... 12<br />
Frequência do polimorfismo SER228SER em pacientes brasileiros com a doença <strong>de</strong><br />
CHRCOT-MARIE-TOOTH tipo 1 ..................................................................................... 13<br />
Freqüência da mutação SER72 em pacientes com a doença <strong>de</strong> CHARCOT-MARIE-<br />
TOOTH tipo 1.................................................................................................................. 14<br />
Escalas para pacientes neurológicos .......................................................................... 15<br />
Eletroforese <strong>de</strong> enzima multiloco (MLEE) e análises <strong>de</strong> agrupamento <strong>de</strong> Candida<br />
albicans isolada da cavida<strong>de</strong> bucal <strong>de</strong> estudantes brasileiros saudáveis ................ 16<br />
Comparação da mutagenicida<strong>de</strong> entre eritrócitos policromáticos (medula óssea) e<br />
normocromáticos (sangue periférico) micronucleados obtidos no teste do<br />
micronúcleo em roedores in vivo ................................................................................. 17<br />
CHARCOT-MARIE-TOOTH ligada ao X (CMTX): i<strong>de</strong>ntificação <strong>de</strong> uma nova mutação<br />
no gene da conexina 32 ................................................................................................ 18<br />
Diversida<strong>de</strong> genética <strong>de</strong> candida albicans e candida dublieniensis produtores <strong>de</strong><br />
exoenzimas provenientes da cavida<strong>de</strong> bucal <strong>de</strong> pacientes diabéticos brasileiros .. 19<br />
Análise da mutagenicida<strong>de</strong> do extrato <strong>de</strong> Helianthus annuus Linné (girassol)<br />
através do teste <strong>de</strong> micronúcleo in vivo. ..................................................................... 20<br />
Ensaio <strong>de</strong> mutagenicida<strong>de</strong> do extrato <strong>de</strong> Ziziphus joazeiro Mart. empregando o<br />
teste do micronúcleo em roedores in vivo.......................... Erro! Indicador não <strong>de</strong>finido.<br />
Padrão <strong>de</strong> colonizacão mono e policlonal <strong>de</strong> Candida albicans altamente virulenta<br />
entre pacientes diabéticos e seus cônjuges não-diabéticos ...................................... 22
Teste do micronúcleo em células da medula óssea <strong>de</strong> roedores in vivo para<br />
avaliação do potencial mutagênico do extrato hidroalcoólico <strong>de</strong> Tabebuia<br />
avellanedae Lor. ex Griseb. (ipê-roxo)<br />
CABRAL, J.H.C.¹; ALVES, V.E.¹; RESENDE, M.R.¹; FLORÊNCIO, D.¹; DA SILVA, J.J.¹;<br />
BASSI, R.C.¹; DA SILVA, L.M.¹; NOGUEIRA, D.A. 2 ; PINTO, L.H.F.¹; LOPES, J.R.G.¹;<br />
RODRIGUES, R.S.¹; BORIOLLO, M.F.G.¹<br />
1. Laboratório <strong>de</strong> Genética e Biologia Molecular - UNIFENAS, Alfenas, MG, Brasil.<br />
2. Universida<strong>de</strong> Fe<strong>de</strong>ral <strong>de</strong> Alfenas – UNIFAL, Alfenas, MG, Brasil.<br />
A casca do ipê-roxo (Tabebuia avellanedae) é usada na medicina popular brasileira na<br />
forma <strong>de</strong> extrato hidroalcoólico, por via tópica. Os ensaios farmacológicos confirmaram<br />
sua ação benéfica em inflamações da pele e mucosas. O extrato feito com água<br />
apresentou mo<strong>de</strong>rada ativida<strong>de</strong> antineoplásica e antimicrobiana, sendo tóxica em dose<br />
elevada. O teste do micronúcleo em medula óssea <strong>de</strong> roedores in vivo tem sido utilizado<br />
para a <strong>de</strong>tecção <strong>de</strong> agentes clastogênicos e aneugênicos e aceito pelas agências<br />
internacionais e instituições governamentais, como parte dos testes para se estabelecer a<br />
avaliação e o registro <strong>de</strong> novos produtos químicos e farmacêuticos. A pesquisa contribui<br />
para o conhecimento do potencial genotóxico do extrato, no momento inexistente. Devido<br />
a sua potencialida<strong>de</strong> nutricional e terapêutica em humanos, analisou-se o seu potencial<br />
mutagênico através do teste do micronúcleo em roedores in vivo, camundongos Swiss<br />
albinus adultos jovens. Os animais foram aclimatados às condições do laboratório por 7<br />
dias, tratados com ração comercial Labina Purina ® e água ad libitum em ambiente<br />
climatizado a 22°C ± 3°C e ciclos <strong>de</strong> luminosida<strong>de</strong> <strong>de</strong> 12h. O tratamento foi administrado<br />
por gavagem (100µL.10g -1 <strong>de</strong> massa corpórea) uma única vez empregando-se cinco<br />
grupos <strong>de</strong> animais (3 machos e 3 fêmeas por grupo), e em duplicata a fim <strong>de</strong> posteriores<br />
análises nos tempos <strong>de</strong> 24h e 48h (tratamentos <strong>de</strong> 500, 1000, 1500 e 2000mg.Kg -1 ).<br />
Controles negativo (NaCl 0,9%) e positivo (50 mg.Kg -1 <strong>de</strong> N-Nitroso-N-ethylurea) foram<br />
incluídos. Após os tempos <strong>de</strong> tratamento, os animais foram sacrificados, os fêmures<br />
foram retirados e células da medula óssea foram coletadas (1mL <strong>de</strong> NaCl 0,9%),<br />
homogeneizadas e centrifugadas (1000rpm/5min). As lâminas foram preparadas por<br />
esfregaço, mantidas a temperatura ambiente e submetidas a coloração (Leishman<br />
eosina-azul). Eritrócitos policromáticos (PCEs) foram analisados quanto à presença <strong>de</strong><br />
micronúcleos (aumento <strong>de</strong> 1000X), contados (2000 PCEs/animal) e fotografados. Os<br />
dados foram submetidos à análise estatística <strong>de</strong> variância, em <strong>de</strong>lineamento inteiramente<br />
casualizado e esquema fatorial 7X2X2 (tratamentoXsexoXtempo), e ao teste Tukey<br />
(P
Análise da ativida<strong>de</strong> antimicrobiana com diferentes extratos <strong>de</strong> própolis<br />
JOSÉ, T. D. S. 1 , ASSUNPÇÃO, R. 1 , OLIVEIRA N. M. S. 1 , FIORINI, J. E. 1<br />
1.Laboratório <strong>de</strong> Biologia e Fisiologia <strong>de</strong> Microrganismos – UNIFENAS, Alfenas, MG,<br />
Brasil.<br />
A própolis tem origem a partir <strong>de</strong> uma substância resinosa e aromática, coletada <strong>de</strong><br />
caules, brotos e botões florais <strong>de</strong> plantas, a qual é transformada na colméia por enzimas<br />
salivares <strong>de</strong> abelhas da espécie Apis mellifera. Sua utilização como antimicrobiano é uma<br />
alternativa econômica e eficaz, além <strong>de</strong> não promover a seleção <strong>de</strong> microrganismos<br />
patogênicos. É consenso entre os autores que a própolis é ativa principalmente contra<br />
bactérias Gram-positivas, havendo, entretanto, ativida<strong>de</strong> limitada contra bactérias Gramnegativas.<br />
Objetivou-se avaliar a ação antimicrobiana in vitro <strong>de</strong> diferentes extratos <strong>de</strong><br />
própolis. Foram utilizadas três diferentes amostras <strong>de</strong> própolis, das quais duas foram <strong>de</strong><br />
extratos alcoólicos e uma <strong>de</strong> extrato aquoso. As espécies Bacillus cereus, B. subtilis,<br />
Enterobacter aerogenes, Escherichia coli, Klebsiela pneumoniae, Micrococcus luteus,<br />
Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium, Staphylococcus<br />
aureus, Staphylococcus epi<strong>de</strong>rmidis, Streptococcus pyogenes, Candida albicans,<br />
Cryptococcus neoformans e Saccharomyces cerevisiae, foram submetidas à sua ação<br />
antimicrobiana nas concentrações <strong>de</strong> 50 e 200mg/mL. Os testes foram realizados em<br />
ágar Mueller-Hinton pela técnica <strong>de</strong> poços <strong>de</strong>scrita por Bauer e Kirby. Os extratos<br />
alcoólicos da própolis nas concentrações <strong>de</strong> 50mg e 200mg inibiram o crescimento <strong>de</strong> B.<br />
cereus, B. subtilis, K. pneumoniae S. pyogenes, C. albicans, E. aerogenes M. luteus e S.<br />
cerevisiae. Entretanto, não foram eficazes sobre E. coli, P. mirabilis, P. aeruginosa, S.<br />
typhimurium, S. aureus, S. epi<strong>de</strong>rmidis e C. neoformans. O extrato aquoso não<br />
apresentou efeito antimicrobiano nas concentrações testadas. Os extratos alcoólicos<br />
apresentaram efeitos antimicrobianos satisfatórios, sobretudo no tocante às bactérias<br />
Gram-Positivas, diferentemente do extrato aquoso. Os resultados corroboram os achados<br />
da literatura, reafirmando o relevante potencial da própolis como antibiótico natural.<br />
Palavras-chave: Extrato <strong>de</strong> própolis, ativida<strong>de</strong> antimicrobiana, microrganismos.
Prevalência da Gardnerella vaginalis e sua abordagem no diagnóstico<br />
colpocitológico<br />
BRAGA, C. R. B. 1 ; FERREIRA, D. S. 1 ; OLIVEIRA, M.C.S.M.A. 1 ; SILVÉRIO, A. S. D. 2<br />
1. Acadêmicos do Curso <strong>de</strong> <strong>Biomedicina</strong> - UNIFENAS, Alfenas, MG, Brasil.<br />
2. Professora do Curso <strong>de</strong> <strong>Biomedicina</strong> - UNIFENAS, Alfenas, MG, Brasil.<br />
Gardnerella vaginalis (GV) é um dos microorganismos frequentemente envolvidos em<br />
casos <strong>de</strong> vaginose. É uma bactéria anaeróbia que se <strong>de</strong>senvolve em ph alcalino,<br />
normalmente quando há um <strong>de</strong>sequilíbrio da microbiota feminina, gerado por uma<br />
diminuição do número <strong>de</strong> lactobacilos. O diagnóstico <strong>de</strong>sse microorganismo se baseia na<br />
i<strong>de</strong>ntificação através da coloração <strong>de</strong> Gram, <strong>de</strong> células chave, cobertas <strong>de</strong> coco-bacilos<br />
pleomórficos Gram lábeis (GV), ou bacilos <strong>de</strong>lgados e curvos. No exame Papanicolaou é<br />
possível a realização do diagnóstico baseado em suas características morfológicas. Os<br />
esfregaços vaginais mostram bastonetes bacilares que recobrem parcial ou totalmente as<br />
células do trato genital feminino e a<strong>de</strong>rem a sua superfície, essa disposição dos bacilos<br />
mostra um aspecto característico das células, <strong>de</strong>nominando-as <strong>de</strong> ´´Clue Cell``. Com a<br />
finalida<strong>de</strong> <strong>de</strong> investigar a prevalência da Gardnerella vaginalis como agente causador <strong>de</strong><br />
vaginose bacteriana em mulheres, foi realizado um estudo com 4233 mulheres atendidas<br />
pelo serviço <strong>de</strong> citologia clínica <strong>de</strong> um laboratório <strong>de</strong> citopatologia no período <strong>de</strong> 2000 a<br />
2006. Realizou-se um levantamento <strong>de</strong> 4233 laudos <strong>de</strong> pacientes submetidas ao exame<br />
Papanicolaou nesse período. Dentre as 4233 mulheres submetidas ao estudo através da<br />
análise estatística dos dados, observou-se que 2494 (58,91%) apresentaram a<br />
Gardnerella vaginalis como agente causador <strong>de</strong> vaginose bacteriana. Os dados obtidos<br />
encontram-se em conformida<strong>de</strong> com a literatura, e <strong>de</strong>monstram a importância das<br />
campanhas educativas com relação à saú<strong>de</strong> da mulher, bem como as <strong>de</strong>mais doenças<br />
<strong>de</strong> transmissão sexual. O exame citopatológico é sem duvida <strong>de</strong> suma relevância como o<br />
método <strong>de</strong> avaliação ginecológica da paciente, permitindo a i<strong>de</strong>ntificação <strong>de</strong> moléstias <strong>de</strong><br />
gran<strong>de</strong> importância na oncologia e na microbiologia.<br />
Palavras-chave: Gardnerella vaginalis, Vaginose bacteriana, Papanicolaou
Avaliação microbiológica <strong>de</strong> salames industrializados e artesanais comercializados<br />
na cida<strong>de</strong> <strong>de</strong> Alfenas<br />
SILVA, J. G. 1 ; OLIVEIRA, N. M. S. 1 ; FIORINI, J. E. 1<br />
1. Laboratório <strong>de</strong> Biologia e Fisiologia <strong>de</strong> Microrganismos – UNIFENAS, Alfenas, MG,<br />
Brasil.<br />
Salames Industrializados e artesanais são freqüentemente responsáveis pela veiculação<br />
<strong>de</strong> enfermida<strong>de</strong>s transmitidas por alimentos, tornando-se assunto <strong>de</strong> interesse <strong>de</strong>vido ao<br />
risco que representam à saú<strong>de</strong> pública. O objetivo <strong>de</strong>ste estudo foi avaliar a qualida<strong>de</strong><br />
microbiológica <strong>de</strong> salames industrializados e artesanais comercializados na cida<strong>de</strong> <strong>de</strong><br />
Alfenas - MG. Foram coletadas amostras provenientes <strong>de</strong> supermercados e realizadas<br />
análises microbiológicas para avaliar coliformes totais (35ºC) e termotolerantes (45ºC),<br />
bactérias mesófilas, Listeria monocytogenes e Salmonella sp. Os resultados foram<br />
comparados com os padrões vigentes no país, para alimentos <strong>de</strong>stinados ao consumo<br />
humano. Para bactérias mesófilas, as amostras apresentaram valores médios <strong>de</strong> 10 2 a<br />
10 6 UFC/g, portanto fora dos padrões vigentes. Todas as amostras apresentaram<br />
ausência <strong>de</strong> Listeria monocytogenes, coliformes totais (35ºC) e fecais (45ºC). Três<br />
amostras mostraram-se impróprias ao consumo por albergarem Salmonella sp. Concluise<br />
que alguns tipos <strong>de</strong> salames industrializados e artesanais comercializados na cida<strong>de</strong><br />
<strong>de</strong> Alfenas po<strong>de</strong>m apresentar risco à saú<strong>de</strong> pública, por indicarem contaminação<br />
microbiana acima dos valores vigentes na legislação. Estes são os resultados parciais e o<br />
trabalho encontra-se em andamento.<br />
Palavras-chave: salames, microrganismos, enfermida<strong>de</strong>s.
Pesquisa <strong>de</strong> enteroparasitas helmintos e protozoários com ênfase em<br />
Cryptosporidium spp. e Giardia spp. em alfaces (Lactuca sativa) comercializadas<br />
na feira livre <strong>de</strong> Alfenas/MG.<br />
RODRIGUES, R.T. 1 ; SOUZA, A. V. 1 ; PEREIRA, M.A. 1<br />
1. Laboratório <strong>de</strong> Parasitologia - UNIFENAS, Alfenas, MG, Brasil.<br />
A presença <strong>de</strong> enteroparasitas helmintos e protozoários tem sido relatada em amostras<br />
<strong>de</strong> alimentos que incluem vegetais folhosos, tais como alface (Lactuca sativa). Estes<br />
parasitos são reconhecidos mundialmente como importantes agentes causadores <strong>de</strong><br />
gastroenterites em humanos e diarréia em animais. Giardia spp e Cryptosporidium spp.,<br />
re-emergente e emergente, <strong>de</strong>stacam-se pela elevada incidência <strong>de</strong> casos,<br />
características <strong>de</strong> resistência aos tratamentos químicos e capacida<strong>de</strong> <strong>de</strong> permanência no<br />
meio ambiente. O importante papel <strong>de</strong>sses protozoários em vários surtos epidêmicos <strong>de</strong><br />
veiculação hídrica e alimentar coloca em evidência as hortaliças que por serem ingeridas<br />
cruas, favorecem a aquisição <strong>de</strong> parasitoses. No Brasil, são escassos os dados sobre a<br />
ocorrência <strong>de</strong> helmintos e protozoários, com <strong>de</strong>staque para Giardia spp. e<br />
Cryptosporidium ssp., em vegetais folhosos como alface, alimentos frescos amplamente<br />
consumidos pela população. O propósito <strong>de</strong>ste estudo foi investigar a ocorrência <strong>de</strong><br />
protozoários e helmintos intestinais, em amostras <strong>de</strong> alface cultivadas na região agrícola<br />
e comercializadas na feira livre <strong>de</strong> Alfenas/MG., assim como, investigar as condições<br />
higiênico-sanitárias das Unida<strong>de</strong>s <strong>de</strong> Produção Agrícola - UPAs estudadas (n=10). Para<br />
tanto, as coletas foram realizadas durante seis meses consecutivos, observando períodos<br />
que caracterizassem a acentuada sazonalida<strong>de</strong> dos parasitos. As diversas amostras <strong>de</strong><br />
alface, após serem lavadas com 100 mL <strong>de</strong> solução contendo Tween 80 (1 %), foram<br />
filtradas em membranas <strong>de</strong> ésteres mistos <strong>de</strong> celulose (47 mm <strong>de</strong> diâmetro e 3 µm <strong>de</strong><br />
porosida<strong>de</strong> nominal), seguida <strong>de</strong> eluição mediante extração mecânica dos parasitos.<br />
Após concentração por centrifugação (1050 x g por 10 minutos), os sedimentos<br />
resultantes foram examinados mediante colorações temporárias e permanentes para<br />
enteroparasitas em geral e, particularmente, pela reação <strong>de</strong> imunofluorescência direta<br />
para cistos <strong>de</strong> Giardia spp e oocistos <strong>de</strong> Cryptosporidium spp. Também se utilizou a<br />
técnica <strong>de</strong> centrífugo-flutuação em Sulfato <strong>de</strong> zinco, com o intuito <strong>de</strong> comparar a<br />
eficiência <strong>de</strong> <strong>de</strong>tecção <strong>de</strong>stes protozoários em vegetais folhosos. A técnica <strong>de</strong> centrífugoflutuação<br />
em Sulfato <strong>de</strong> zinco, comparada a Técnica <strong>de</strong> Filtração em Membrana,<br />
mostrou-se ineficiente, pois não foi revelada a presença <strong>de</strong> nenhum parasito intestinal<br />
humano ou bioindicador <strong>de</strong> contaminação fecal. A sensibilida<strong>de</strong> da técnica <strong>de</strong> Filtração<br />
em Membrana para amostras <strong>de</strong> alface, além <strong>de</strong> revelar a presença <strong>de</strong> 4,9 % <strong>de</strong><br />
helmintos intestinais (Ovos <strong>de</strong> Taenia sp. e Ovos <strong>de</strong> Toxocara sp.) e 6,7 % (Cistos <strong>de</strong><br />
Entamoeba coli) <strong>de</strong> protozoários comensais bioindicadores. Cistos <strong>de</strong> Giardia spp. foram<br />
encontrados em 30 % das amostras <strong>de</strong> alface, com <strong>de</strong>nsida<strong>de</strong> <strong>de</strong> 270 a 1380 cistos/50g.,<br />
e, oocistos <strong>de</strong> Cryptosoridium spp. foram encontrados em 33,3 % das amostras <strong>de</strong> alface,<br />
com <strong>de</strong>nsida<strong>de</strong> <strong>de</strong> 110 a 1060 cistos/50g., <strong>de</strong> folhas <strong>de</strong> vegetal além da presença <strong>de</strong><br />
helmintos intestinais, o que representa elevada importância em Saú<strong>de</strong> Pública, dada a<br />
possibilida<strong>de</strong> <strong>de</strong> aquisição <strong>de</strong> giardiose e criptosporidiose, assim como as <strong>de</strong>mais<br />
enteroparasitoses. O esclarecimento sobre a dispersão <strong>de</strong>stes parasitas no ambiente e o<br />
aperfeiçoamento <strong>de</strong> procedimentos <strong>de</strong> <strong>de</strong>tecção dos mesmos quer em amostras hídricas<br />
ou alimentares são vantajosos para o entendimento da epi<strong>de</strong>miologia <strong>de</strong>stes patógenos.<br />
Palavras-chave: helminto intestinal, protozoário intestinal, Cryptosporidium spp., Giardia<br />
spp., hortaliça, veiculação alimentar.
Frequência do polimorfismo SER228SER em pacientes brasileiros com a doença <strong>de</strong><br />
CHRCOT-MARIE-TOOTH tipo 1<br />
SILVA, F.O. 1 ; LIMA, S. P. G 1 ; BORGHETTI, V. H. S 1 ; BARREIRA, A. A. 1 ; MARQUES, W<br />
Jr. 1<br />
1. Departamento <strong>de</strong> Neurociências e ciências do Comportamento da Faculda<strong>de</strong> <strong>de</strong><br />
Medicina <strong>de</strong> Ribeirão Preto – USP.<br />
A doença <strong>de</strong> Charcot-Marie-Tooth tipo 1 (CMT1) é a mais freqüente Neuropatia<br />
Hereditária Sensitivo Motora, sendo um grupo heterogêneo <strong>de</strong> afecções com <strong>de</strong>scrição<br />
sempre crescente <strong>de</strong> quadros clínicos variados com diferentes tipos <strong>de</strong> herança. A<br />
CMT1B que ocorre <strong>de</strong>vido alterações no gene da proteína zero da mielina (MPZ ou P0) e<br />
representa <strong>de</strong> 5% a 10% das CMT geral, tendo sido i<strong>de</strong>ntificadas até o momento 123<br />
diferentes mutações neste gene. O objetivo do presente estudo foi avaliar a freqüência do<br />
polimorfismo Ser228Ser em pacientes brasileiros com CMT1 e em pacientes normais da<br />
população brasileira. Foram avaliados 50 pacientes do Hospital das Clinicas da<br />
FMRP/USP. O DNA foi extraído por método rotineiro. Após a pesquisa da duplicação<br />
17p11.2-p.12, o gene da MPZ foi seqüenciado nas duas direções com a química Big Dye<br />
e análise no seqüenciador automático ABI377. Em seis pacientes, foram <strong>de</strong>tectadas as<br />
transições da base C para T, transição da trinca <strong>de</strong> bases “TCC” para o “TCT” que<br />
codificam o mesmo aminoácido, mantendo assim na posição 228 o aminoácido do grupo<br />
polar Serina (Ser228Ser). Este polimorfismo foi <strong>de</strong>scrito anteriormente por Nelis et al.<br />
(1994); Roa et al. (1996); Bort et al. (1997) e Mersiyanova et al., (2000). Ser228Ser<br />
parece ser a variante mais comum <strong>de</strong> MPZ, ocorrendo em várias populações. A<br />
freqüência <strong>de</strong>ste polimorfismo obtido no trabalho <strong>de</strong> Nelis et al. (1994) foi <strong>de</strong> 4,1%. A<br />
freqüência que nós obtivemos foi ainda maior, sendo <strong>de</strong> 12% na população brasileira com<br />
CMT1 negativos para a duplicação 17p. Nós analisamos famílias <strong>de</strong> pacientes que<br />
apresentavam esse polimorfismo e também i<strong>de</strong>ntificamos Ser228Ser em indivíduos<br />
saudáveis. Analisamos 100 indivíduos normais e surpreen<strong>de</strong>ntemente obtivemos uma<br />
freqüência <strong>de</strong> 39%. Com esse achado surge uma dúvida interessante, se o polimorfismo<br />
Ser228Ser po<strong>de</strong> representar um efeito <strong>de</strong> um ancestral comum ou se faz refletir a<br />
presença <strong>de</strong> um potencial “hot spot” no códon 228 do gene MPZ. Mais estudos também<br />
serão necessários para esclarecer o verda<strong>de</strong>iro efeito do polimorfismo Ser228Ser, tanto<br />
em pacientes quanto em indivíduos normais.<br />
Palavras-chave: Doença <strong>de</strong> Charcot-Marie-Tooth, neurociências, biologia molecular<br />
Agência financiadora: Cnpq
Freqüência da mutação SER72 em pacientes com a doença <strong>de</strong> CHARCOT-MARIE-<br />
TOOTH tipo 1<br />
SILVA, F. O 1 ; LIMA, S. P.G. 1 , BORGHETTI, V. H. S. 1 ; BUENO, K. C. 1 ; BARREIRA, A.<br />
A. 1 ; MARQUES W. Jr. 1<br />
1. Departamento <strong>de</strong> Neurociências e ciências do Comportamento Faculda<strong>de</strong> <strong>de</strong> Medicina<br />
<strong>de</strong> Ribeirão Preto – USP.<br />
Mutações <strong>de</strong> ponto no gene PMP22 resultam em neuropatias <strong>de</strong>smielinizantes com uma<br />
varieda<strong>de</strong> <strong>de</strong> fenótipos como Charcot-Marie-Tooth 1 (CMT1A), Síndrome <strong>de</strong> Dejerine-<br />
Sottas (DSS), Neuropatia Congênita Hipomielinizante (CHN) ou Neuropatia Hereditária<br />
com Sensibilida<strong>de</strong> a Pressão Palpatória (HNPP). Muitas <strong>de</strong>ssas mutações <strong>de</strong> ponto estão<br />
no segundo domínio transmembrânico, agrupando a Ser72, que é responsável por<br />
aproximadamente 26% das mutações encontradas neste gene e 0,6% das mutações <strong>de</strong><br />
CMT1. A substituição mais freqüente é a Ser72Leu, encontrada em 14 <strong>de</strong> 17 mutações<br />
nesta posição. Este “hot spot” po<strong>de</strong> ser consi<strong>de</strong>rado uma estratégia para pesquisa <strong>de</strong><br />
mutações <strong>de</strong> ponto em neuropatias hereditárias <strong>de</strong>smielinizantes. O objetivo do presente<br />
estudo foi avaliar a freqüência da mutação Ser72Leu em uma população <strong>de</strong> CMT1 que foi<br />
negativa para a duplicação do cromossomo 17p11. 2. Foi testado o DNA <strong>de</strong> 200<br />
pacientes negativos para duplicação, no Laboratório <strong>de</strong> Neurologia Aplicada e<br />
Experimental do Departamento <strong>de</strong> Neurologia da Faculda<strong>de</strong> <strong>de</strong> Medicina <strong>de</strong> Ribeirão<br />
Preto/USP, para a substituição Ser72Leu. O DNA foi extraído por método rotineiro. A<br />
mutação Ser72Leu foi inicialmente pesquisada por PCR seguida por digestão com a<br />
enzima TaqI. Mais recentemente, nós fizemos o screening <strong>de</strong>sta mutação usando a<br />
técnica <strong>de</strong> DHPLC. Nós encontramos somente uma mutação Ser72Leu <strong>de</strong>ntre os 200<br />
pacientes negativos para a duplicação. Ambas as técnicas apresentaram ser igualmente<br />
eficientes. A freqüência estimada da mutação Ser72Leu encontrada neste estudo<br />
apresentou resultados semelhantes à <strong>de</strong> outros trabalhos publicados. Embora, mais<br />
estudos serão necessários para confirmar estes números. É uma estratégia importante a<br />
pesquisa <strong>de</strong>sta mutação se a duplicação é ausente e nenhuma mutação é presente no<br />
gene da conexina32, que é responsável no mínimo por 10% dos pacientes com CMT1.<br />
Ambas as técnicas que foram utilizadas são confiáveis, <strong>de</strong> fácil execução e <strong>de</strong> custo<br />
efetivo, além disso, o DHPLC po<strong>de</strong> <strong>de</strong>tectar outras mutações eventualmente presentes<br />
no exon 4 do gene PMP22. Como estes pacientes têm geralmente um severo fenótipo, a<br />
probabilida<strong>de</strong> <strong>de</strong> um resultado positivo aumenta significativamente se isto for também<br />
consi<strong>de</strong>rado.<br />
Palavras-chave: Doença <strong>de</strong> Charcot-Marie-Tooth, neurociências, biologia molecular<br />
Agência financiadora: Cnpq
Escalas para pacientes neurológicos<br />
SILVA, F.O. 1 , CERQUETANE, T. R. 2 , FRATESCHI, M. E. B. J. M 3<br />
1.Centro Universitário “Barão <strong>de</strong> Mauá” e Faculda<strong>de</strong> <strong>de</strong> Medicina <strong>de</strong> Ribeirão Preto<br />
(USP) – SP.<br />
A observação clínica empírica não constitui mais um método aceitável sem dados<br />
objetivos, que apóiem a tomada <strong>de</strong> <strong>de</strong>cisão. A escala é uma forma <strong>de</strong> medida confiável,<br />
fácil <strong>de</strong> ser aplicada e possibilita ao profissional <strong>de</strong> fisioterapia avaliar <strong>de</strong> modo<br />
minucioso, fato que garante tratar da melhor forma seu paciente, gerando melhora na<br />
evolução do quadro clínico <strong>de</strong> cada paciente. As escalas utilizadas neste estudo foram<br />
escolhidas <strong>de</strong> acordo com sua construção, valida<strong>de</strong> e confiabilida<strong>de</strong>, itens essenciais<br />
para concluir a eficácia da escalas, acompanhando os métodos aplicados pela<br />
comunida<strong>de</strong> científica atualmente. A partir <strong>de</strong>ste direcionamento, foram <strong>de</strong>terminadas as<br />
escalas que serão aplicadas na avaliação clínica dos pacientes neurológicos. Estas são:<br />
Asworth modificada, Barthel, GMFM, Marcha <strong>de</strong> 10 metros e NIHSS. Os objetivos <strong>de</strong>ste<br />
estudo foram: realizar estudo <strong>de</strong> caráter bibliográfico sobre escalas utilizadas em<br />
pacientes com patologias neurológicas visando busca <strong>de</strong> melhores métodos quantitativos<br />
<strong>de</strong> avaliação clínica; aumentar o conhecimento sobre métodos <strong>de</strong> avaliações<br />
quantitativas, utilizar os métodos mais a<strong>de</strong>quados na avaliação <strong>de</strong>stes pacientes durante<br />
prática clínica dos alunos <strong>de</strong> fisioterapia <strong>de</strong> qualquer instituição <strong>de</strong> ensino superior<br />
brasileira e possibilitar melhora na avaliação e atendimento clínico dos pacientes<br />
neurológicos, que apresentam as patologias mais freqüentes, estudadas anteriormente.<br />
Foi realizada pesquisa bibliográfica, sendo <strong>de</strong>senvolvido a partir do material já elaborado,<br />
constituído principalmente <strong>de</strong> livros e artigos científicos. A pesquisa bibliográfica é uma<br />
pesquisa exploratória, realizada para obter conhecimentos, procurando buscar<br />
informações publicadas em livros e documentos como catálogos, folhetos, artigos, além<br />
<strong>de</strong> revistas e sites científicos. Durante esse procedimento foram utilizados como fontes<br />
<strong>de</strong> dados livros referentes às escalas neurológicas, neurologia infantil e neurologia,<br />
levantados na biblioteca Nicolau Dinamarco Spinelli (Centro Universitário “Barão <strong>de</strong><br />
Mauá”), na biblioteca Dr. Pedro Daniel Penha Filho da Universida<strong>de</strong> <strong>de</strong> São Paulo <strong>de</strong><br />
Ribeirão Preto (FMRP-USP), na biblioteca central da Universida<strong>de</strong> <strong>de</strong> Ribeirão Preto<br />
(UNAERP) e na Universida<strong>de</strong> Paulista do Campus <strong>de</strong> Ribeirão Preto (UNIP); além <strong>de</strong><br />
achados bibliográficos contidos na internet através <strong>de</strong> sites <strong>de</strong> busca nacionais e<br />
internacionais, incluindo sites <strong>de</strong> bases <strong>de</strong> dados como pubmed, scielo, lilacs e bireme;<br />
com uso das palavras-chaves: escalas, escalas neurológicas, neurologia, neurologia<br />
infantil, scales e neurological scales. Foram utilizados artigos e trabalhos cedidos <strong>de</strong><br />
acervo pessoal. A medição objetiva, em especial às escalas, fornece dados concretos<br />
sobre as conseqüências mais comuns às patologias neurológicas: aci<strong>de</strong>nte vascular<br />
cerebral (AVC) e paralisia cerebral (PC). Este trabalho permitiu elucidar <strong>de</strong> modo claro e<br />
preciso a <strong>de</strong>finição <strong>de</strong> medidas objetivas e sua importância <strong>de</strong>ntro da comunida<strong>de</strong><br />
científica atual.<br />
Palavras-chave: Neurologia, pediatria, escalas <strong>de</strong> avaliação
Eletroforese <strong>de</strong> enzima multiloco (MLEE) e análises <strong>de</strong> agrupamento <strong>de</strong> Candida<br />
albicans isolada da cavida<strong>de</strong> bucal <strong>de</strong> estudantes brasileiros saudáveis<br />
DA SILVA, J.J. 1 , BASSI, R.C. 1 , FLORÊNCIO, D. 1 , RESENDE, M.R. 1 , ALVES, V.E. 1 , DA<br />
SILVA, L.M. 1 , RODRIGUES, R.S. 1 , BORIOLLO, M.F.G. 1<br />
1. Laboratório <strong>de</strong> Genética e Biologia Molecular - <strong>Unifenas</strong>, Alfenas, MG, Brasil.<br />
Candida albicans e espécies relacionadas são encontradas <strong>de</strong> forma ubíqua e comensal<br />
na microbiota <strong>de</strong> cavida<strong>de</strong>s (retal, bucal, vaginal, uretral, nasal, aural) e pele humanas.<br />
Estas espécies são consi<strong>de</strong>radas patógenos oportunistas capazes <strong>de</strong> causar infecções,<br />
variando <strong>de</strong>s<strong>de</strong> <strong>de</strong>sor<strong>de</strong>ns mucocutâneas, não comprometedoras ao indivíduo, até<br />
doenças invasivas, envolvendo quase todos os órgãos. O objetivo da presente pesquisa<br />
foi avaliar a diversida<strong>de</strong> genética <strong>de</strong> C. albicans isolada da cavida<strong>de</strong> bucal <strong>de</strong> populações<br />
<strong>de</strong> estudantes clinicamente saudáveis através <strong>de</strong> marcadores isoenzimáticos (MLEE) e<br />
análises <strong>de</strong> agrupamento. Isolados <strong>de</strong> leveduras foram previamente i<strong>de</strong>ntificados através<br />
dos ensaios <strong>de</strong> formação <strong>de</strong> tubo germinativo, teste <strong>de</strong> produção <strong>de</strong> clamidoconí<strong>de</strong>os,<br />
crescimento em meio cromogênico CHROMagar Candida ® , e testes <strong>de</strong> assimilação e<br />
fermentação <strong>de</strong> carboidratos. Enzimas intracelulares, <strong>de</strong> leveduras previamente<br />
cultivadas, foram extraídas em água bi<strong>de</strong>stilada gelada empregando-se pérolas <strong>de</strong> vidro<br />
e aparelho BeadBeater (Biospec Products, Inc.). Essas enzimas foram separadas em<br />
géis <strong>de</strong> amido, sob tensão <strong>de</strong> 130 volts a 4ºC overnight, e submetidas ao processo <strong>de</strong><br />
revelação por métodos <strong>de</strong>scritos para 11 sistemas: álcool <strong>de</strong>sidrogenase, sorbitol<br />
<strong>de</strong>sidrogenase, manitol-1-fosfato <strong>de</strong>sidrogenase, malato <strong>de</strong>sidrogenase, isocitrato<br />
<strong>de</strong>sidrogenase, glucose <strong>de</strong>sidrogenase, glucose-6-fosfato <strong>de</strong>sidrogenase, aspartato<br />
<strong>de</strong>sidrogenase, catalase, peroxidase e leucina aminopeptidase. A interpretação genética<br />
dos padrões <strong>de</strong> MLEE foi realizada seguindo a regra comumente aceita, a qual permite a<br />
<strong>de</strong>dução da composição alélica <strong>de</strong> um organismo diplói<strong>de</strong>. A diversida<strong>de</strong> e o<br />
relacionamento genético <strong>de</strong>ntro e entre populações <strong>de</strong> isolados <strong>de</strong> C. albicans foram<br />
<strong>de</strong>terminados pelo coeficiente <strong>de</strong> distância genética <strong>de</strong> Nei e visualizados em<br />
<strong>de</strong>ndrogramas UPGMA gerados pelo método SAHN (Sequential, Agglomerative,<br />
Hierarchic, Nonoverlapping Clustering Methods) algoritmo UPGMA (Unweighted Pair-<br />
Group Method Using an Arithmetic Average). Essas análises foram feitas com o auxilio do<br />
software NTSYSpc versão 2.2. Alta diversida<strong>de</strong> genética <strong>de</strong> C. albicans foi observada<br />
em todas as populações <strong>de</strong> estudantes, com predominância <strong>de</strong> algumas linhagens.<br />
Nenhuma correlação foi observada entre grupos <strong>de</strong> linhagens altamente relacionadas e<br />
<strong>de</strong>terminada população <strong>de</strong> estudantes. Em adição, divergências significantes entre as<br />
freqüências genotípicas observadas e esperadas não foram <strong>de</strong>tectadas (teste do<br />
equilíbrio <strong>de</strong> Hardy-Weinberg). A existência <strong>de</strong> rotas <strong>de</strong> propagação direta e indireta<br />
<strong>de</strong>ntro e entre populações <strong>de</strong> estudantes saudáveis foi sugerida pela presente análise.<br />
Alterações microevolucionárias foram observadas em isolados <strong>de</strong> C. albicans<br />
provenientes <strong>de</strong> estudantes <strong>de</strong> uma mesma escola (origem geográfica). Tais resultados<br />
vêm contribuir com os estudos sobre a diversida<strong>de</strong> e epi<strong>de</strong>miologia molecular <strong>de</strong>ssa<br />
espécie em populações <strong>de</strong> indivíduos clinicamente saudáveis. Ainda, esses dados<br />
po<strong>de</strong>riam ser utilizados comparativamente com outras análises retrospectivas e em<br />
andamento <strong>de</strong> C. albicans a fim <strong>de</strong> <strong>de</strong>tectar a existência <strong>de</strong> grupos <strong>de</strong> leveduras<br />
predominantes em candidíases e contribuir com o <strong>de</strong>senvolvimento <strong>de</strong> estratégias para a<br />
prevenção <strong>de</strong> sua transmissão entre populações imunocompetentes ou<br />
imunossuprimidas.<br />
Palavras-chave: C. albicans, diversida<strong>de</strong> genética, estudantes saudáveis, MLEE, análises<br />
<strong>de</strong> agrupamento.
Comparação da mutagenicida<strong>de</strong> entre eritrócitos policromáticos (medula óssea) e<br />
normocromáticos (sangue periférico) micronucleados obtidos no teste do<br />
micronúcleo em roedores in vivo<br />
ALVES, V.E.¹; CABRAL, J.H.C.¹; RESENDE, M.R.¹; FLORÊNCIO, D¹; DA SILVA, J.J.¹;<br />
BASSI, R.C.¹; DA COSTA, A.M.D.D.¹; FIORINI, J.E.¹; DA SILVA, L.M.¹; LOPES, J.R.G.¹;<br />
NOGUEIRA, D. A. 2 ; BORIOLLO, M.F.G.¹<br />
1.Laboratório <strong>de</strong> Genética e Biologia Molecular - UNIFENAS, Alfenas, MG, Brasil.<br />
2. Universida<strong>de</strong> Fe<strong>de</strong>ral <strong>de</strong> Alfenas, UNIFAL, Alfenas, MG, Brasil.<br />
O teste do micronúcleo em roedores in vivo tem sido amplamente utilizado para a<br />
<strong>de</strong>tecção <strong>de</strong> agentes clastogênicos e aneugênicos e, ainda, aceito pelas agências<br />
internacionais e instituições governamentais, como parte da bateria <strong>de</strong> testes<br />
recomendada para se estabelecer a avaliação e o registro <strong>de</strong> novos produtos químicos e<br />
farmacêuticos que entram anualmente no mercado mundial. Micronúcleos são analisados<br />
em eritrócitos policromáticos <strong>de</strong> medula óssea (PCEs, eritrócitos jovens) <strong>de</strong><br />
camundongos ou ratos. Alternativamente em camundongo, os micronúcleos po<strong>de</strong>m ser<br />
analisados em eritrócitos normocromáticos circulantes (NCE, eritrócitos maduros), visto<br />
que o baço <strong>de</strong> camundongo não seqüestra do sangue eritrócitos micronucleados. A<br />
presente pesquisa compara os resultados <strong>de</strong> mutagenicida<strong>de</strong> do N-Nitroso-N-ethylurea<br />
(controle positivo), NaCl 0,9% (controle negativo) e extrato hidroalcólico <strong>de</strong> sementes <strong>de</strong><br />
girassol (H. annuus Linné), obtidos a partir do teste do micronúcleo em PCEs (medula<br />
óssea) e NCEs (sangue circulante) <strong>de</strong> roedores in vivo. Camundongos Swiss albinus<br />
(machos e fêmeas) adultos jovens (30g a 40g) foram utilizados no teste. Antece<strong>de</strong>ndo o<br />
ensaio, esses animais foram aclimatados às condições do laboratório por 7 dias, tratados<br />
com ração comercial Labina Purina ® e água ad libitum em ambiente climatizado a 22°C ±<br />
3°C e ciclos <strong>de</strong> luminosida<strong>de</strong> <strong>de</strong> 12h. O tratamento foi administrado por gavagem<br />
(100µL.10g -1 <strong>de</strong> massa corpórea) uma única vez empregando-se cinco grupos <strong>de</strong> animais<br />
(3 machos e 3 fêmeas por grupo), e em duplicata a fim <strong>de</strong> posterior análises nos tempos<br />
<strong>de</strong> 24h e 48h (extrato hidroalcóolico <strong>de</strong> H. annuus Linné para os tratamentos <strong>de</strong> 250, 500,<br />
1000, 1500 e 2000mg.Kg -1 ). Controles negativo (NaCl 0,9%) e positivo (50 mg.Kg -1 <strong>de</strong> N-<br />
Nitroso-N-ethylurea) foram incluídos. Após os tempos <strong>de</strong> tratamento, o sangue periférico<br />
(ducto lacrimal) foi coletado por meio <strong>de</strong> capilares contendo heparina e submetido ao<br />
esfregaço diretamente em lâmina. Então, os animais foram sacrificados por inalação <strong>de</strong><br />
CO 2 em câmaras <strong>de</strong> acrílico adaptadas, e os fêmures foram retirados e, rapidamente,<br />
células da medula óssea foram coletadas (1mL <strong>de</strong> NaCI 0,9%), homogeneizadas e<br />
centrifugadas (1000rpm/5min). Sedimentos celulares foram ressuspensos (500µL <strong>de</strong><br />
formol 4% em NaCI 0,9%) e cada lâmina também foi preparada por esfregaço. As<br />
lâminas <strong>de</strong> ambos os procedimentos foram mantidas a temperatura ambiente e<br />
submetidas a coloração (Leishman eosina-azul). PCEs e NCEs foram analisados quanto<br />
a presença <strong>de</strong> micronúcleos (aumento <strong>de</strong> 1000X), contados (2000 PCEs e NCEs/animal)<br />
e fotografados. Os dados foram submetidos à análise estatística <strong>de</strong> variância em<br />
<strong>de</strong>lineamento inteiramente casualizado, e ao teste Tukey (5% <strong>de</strong> significância)<br />
empregando o software SAS ® (versão 8.01). Os resultados revelaram parida<strong>de</strong> qualitativa<br />
dos ensaios realizados com PCEs e NCEs provenientes da medula óssea e sangue<br />
periférico, sugerindo ausência <strong>de</strong> restrição para os ensaios do micronúcleo empregando<br />
roedores in vivo (camundongos Swiss albinus).<br />
Palavras-chave: mutagenicida<strong>de</strong>, eritrócitos policromáticos e normocromáticos,<br />
micronúcleo.
CHARCOT-MARIE-TOOTH ligada ao X (CMTX): i<strong>de</strong>ntificação <strong>de</strong> uma nova mutação<br />
no gene da conexina 32<br />
SILVA, F.O. 1 ; LIMA, S. P. G. 1 ; BORGHETTI, V. H. S 1 ; BARREIRA, A. A. 1 ; MARQUES, W.<br />
Jr. 1<br />
1. Departamento <strong>de</strong> Neurociências e Ciências do Comportamento da Faculda<strong>de</strong> <strong>de</strong><br />
Medicina <strong>de</strong> Ribeirão Preto – USP.<br />
A doença <strong>de</strong> Charcot-Marie-Tooth ligada ao X (CMTX) é a segunda causa mais freqüente<br />
<strong>de</strong> neuropatia hereditária, atrás da duplicação 17p11.2 (CMT1A). O gene responsável<br />
pela CMTX é a conexina 32 (Cx32), tendo sido i<strong>de</strong>ntificadas até o momento mais <strong>de</strong> 250<br />
diferentes mutações. Em geral, os homens são mais intensamente acometidos e as<br />
respectivas velocida<strong>de</strong>s <strong>de</strong> condução (VC) situam-se em níveis intermediários (30-40<br />
m/s), enquanto nas mulheres a neuropatia é, em geral, mais branda e a VC mais alta,<br />
sugerindo axonopatia. Relatamos uma nova mutação no gene da Cx32 e o respectivo<br />
fenótipo. Dois irmãos com CMT foram submetidos à avaliação clínica e eletrofisiológica.<br />
O DNA foi extraído por método rotineiro. Após a pesquisa da duplicação 17p11.2-p.12, o<br />
gene da Cx32 foi seqüenciado nas duas direções com a química Big Dye e análise no<br />
sequenciador automático ABI377. Foi i<strong>de</strong>ntificada uma mutação missense, ainda não<br />
<strong>de</strong>scrita, c.T394C (p.W132R) localizada no terceiro domínio transmembrânico (TM3) da<br />
conexina 32, po<strong>de</strong>ndo esta mutação afetar a estrutura da proteína potencialmente,<br />
modificando sua função. A mutação estava presente nos dois irmãos, tendo o caso índice<br />
30 anos. Aos 12 anos iniciou quadro lentamente progressivo <strong>de</strong> dificulda<strong>de</strong> para marcha<br />
e tremor em membros superiores. Seu irmão mais velho e quatro primos maternos<br />
apresentam quadro clínico semelhante, enquanto duas primas maternas tinham apenas<br />
pés cavos. A mãe, já falecida, sempre foi consi<strong>de</strong>rada normal. Ao exame, apresentava<br />
fraqueza, hipotonia e hipotrofia <strong>de</strong> predomínio distal, mais acentuada em membros<br />
inferiores e pés cavos. A sensibilida<strong>de</strong> profunda nos pododáctilos estava intensamente<br />
afetada. Os reflexos profundos estavam ausentes, exceto o patelar e o triciptal que<br />
estavam diminuídos. Havia ainda tremor postural e <strong>de</strong> ação nos membros superiores. O<br />
exame eletroneuromiográfico evi<strong>de</strong>nciou polineuropatia sensitivo-motora <strong>de</strong>smielinizante<br />
simétrica com mo<strong>de</strong>rada redução das velocida<strong>de</strong>s <strong>de</strong> condução (VC mediano = 33 m/s).<br />
No caso apresentado, chama atenção o comprometimento exclusivo, ou predominante e<br />
mais grave dos indivíduos do sexo masculino. Clinicamente merece <strong>de</strong>staque a presença<br />
do tremor associado à mutação W132R, um achado incomum na CMTX.<br />
Eletrofisiologicamente, a VC intermediária parece ser uma característica marcante <strong>de</strong>ssa<br />
forma <strong>de</strong> Neuropatia Hereditária Sensitivo Motora (NHSM), embora não permita distinção<br />
com CMT1. Apesar <strong>de</strong> uma gran<strong>de</strong> varieda<strong>de</strong> <strong>de</strong> fenótipos terem sido <strong>de</strong>scritos<br />
associados a mutações no gene da Cx32, nosso achado confirma que a presença <strong>de</strong><br />
uma NHSM afetando mais intensamente indivíduos do sexo masculino associado à VC<br />
intermediária são fortemente indicativos <strong>de</strong> CMTX. A nova mutação <strong>de</strong>scrita expan<strong>de</strong><br />
ainda mais o já enorme contingente <strong>de</strong> mutações associadas ao gene Cx32.<br />
Palavras-chave: doença <strong>de</strong> Charcot-Marie-Tooth, neurociências, biologia molecular<br />
Agência financiadora: Cnpq
Diversida<strong>de</strong> genética <strong>de</strong> candida albicans e candida dublieniensis produtores <strong>de</strong><br />
exoenzimas provenientes da cavida<strong>de</strong> bucal <strong>de</strong> pacientes diabéticos brasileiros<br />
BASSI, R.C. 1 ; SPOLIDÓRIO, D.M.P. 1 ; BORIOLLO, M.F.G. 1<br />
1. Laboratório <strong>de</strong> Genética e Biologia Molecular - UNIFENAS, Alfenas, MG, Brasil.<br />
Pacientes diabéticos apresentam elevadas suscetibilida<strong>de</strong>s às espécies <strong>de</strong> Candida,<br />
especialmente C. albicans, com elevados índices <strong>de</strong> candidíases bucal. A presente<br />
pesquisa investigou a diversida<strong>de</strong> genética e a virulência <strong>de</strong> isolados bucais <strong>de</strong> C.<br />
albicans e C. dubliniensis provenientes pacientes com diagnósticos <strong>de</strong> diabetes mellitos<br />
sob controle clínico. O estudo envolveu 54 pacientes provenientes das Unida<strong>de</strong>s <strong>de</strong><br />
Atendimento do Programa Saú<strong>de</strong> da Família - Ministério da Saú<strong>de</strong> do Brasil -, do<br />
município <strong>de</strong> Limeira, estado <strong>de</strong> São Paulo. A diversida<strong>de</strong> genética e a virulência foram<br />
avaliadas por marcadores isoenzimáticos (MLEE) e análises <strong>de</strong> agrupamento e pelos<br />
testes <strong>de</strong> produção <strong>de</strong> aspartil proteinases e fosfolipases em meios <strong>de</strong> cultura<br />
microbiológicos específicos, respectivamente. Espécies <strong>de</strong> Candida foram observadas<br />
em 79,9% dos pacientes, sendo 70,4% <strong>de</strong>les colonizados por C. albicans com ou sem<br />
associação a outras espécies do gênero, incluindo C. tropicalis, C. krusei e C.<br />
dubliniensis. Um total <strong>de</strong> 84 linhagens (ETs – Electrophoretic Types) em 189 isolados <strong>de</strong><br />
C. albicans e 6 isolados <strong>de</strong> C. dubliniensis foram encontrados. A maioria dos pacientes<br />
Candida–positivo (92,1%) compartilhou isolados altamente relacionados, porém nãoidênticos<br />
com pacientes diabéticos não-relacionados, in<strong>de</strong>pen<strong>de</strong>ntemente do gênero do<br />
paciente. Entretanto, clusters gênero-específicos e menores também foram observados,<br />
os quais <strong>de</strong>monstraram um modo mono- ou policlonal <strong>de</strong> colonização bucal em um<br />
mesmo paciente. Ativida<strong>de</strong>s exoenzimáticas <strong>de</strong> aspartil poteinases e fosfolipases<br />
ocorreram em 100% e 92,6% dos isolados <strong>de</strong> C. albicans, respectivamente sem qualquer<br />
correlação com o gênero do paciente, ET (electrophoretic type), e clusters <strong>de</strong> isolados<br />
altamente relacionados. Os resultados sugerem a ocorrência bucal <strong>de</strong> linhagens (ETs)<br />
altamente relacionadas e não-idênticas <strong>de</strong> C. albicans, capazes <strong>de</strong> produzir altos níveis<br />
<strong>de</strong> exoenzimas, entre a maioria dos pacientes portadores <strong>de</strong> diabetes mellitos nãorelacionados<br />
sob controle clínico, in<strong>de</strong>pen<strong>de</strong>ntemente do gênero.<br />
Palavras-chave: C. albicans, C. dubliniensis, diabetes mellitus, virulência, MLEE.
Análise da mutagenicida<strong>de</strong> do extrato <strong>de</strong> Helianthus annuus Linné (girassol)<br />
através do teste <strong>de</strong> micronúcleo in vivo.<br />
FLORÊNCIO, D 1 ; RESENDE, M.R. 1 ; ALVES, V.E. 1 ; DA SILVA, J.J 1 ; BASSI, R.C. 1 ; D.A.,<br />
COSTA, A.M.D.D. 1 ; FIORINI, J.E. 2 ; DA SILVA, L.M. 1 ; NOGUEIRA, D.A. 3 ; BORIOLLO,<br />
M.F.G. 1<br />
1. Laboratório <strong>de</strong> Genética e Biologia Molecular - UNIFENAS, Alfenas, MG, Brasil.<br />
2. 1. Laboratório <strong>de</strong> Biologia e Fisiologia <strong>de</strong> Microrganismos – UNIFENAS, Alfenas, MG,<br />
Brasil.<br />
3. Universida<strong>de</strong> Fe<strong>de</strong>ral <strong>de</strong> Alfenas – UNIFAL, Alfenas, MG, Brasil.<br />
O extrato ou óleo da semente <strong>de</strong> H. annuus Linné (Família Asteraceae) possui amplas<br />
indicações como suplemento nutricional e como agente antioxidante. Relatos apontam<br />
efeitos benéficos ao sistema cardiovascular e no combate a radicais livres. O teste do<br />
micronúcleo em medula óssea <strong>de</strong> roedores in vivo tem sido amplamente utilizado para a<br />
<strong>de</strong>tecção <strong>de</strong> agentes clastogênicos e aneugênicos e, ainda, aceito pelas agências<br />
internacionais e instituições governamentais, como parte da bateria <strong>de</strong> testes<br />
recomendada para se estabelecer a avaliação e o registro <strong>de</strong> novos produtos químicos e<br />
farmacêuticos que entram anualmente no mercado mundial. A presente pesquisa vem<br />
contribuir para o conhecimento do potencial genotóxico <strong>de</strong>sse extrato, até o presente<br />
momento inexistente. Devido a sua potencialida<strong>de</strong> nutricional e terapêutica em humanos,<br />
analisou-se o seu potencial mutagênico através do teste do micronúcleo em roedores in<br />
vivo. Camundongos Swiss albinus (machos e fêmeas) adultos jovens (30g a 40g) foram<br />
utilizados no teste. Antece<strong>de</strong>ndo o ensaio, esses animais foram aclimatados às<br />
condições do laboratório por 7 dias, tratados com ração comercial Labina Purina ® e água<br />
ad libitum em ambiente climatizado a 22°C ± 3°C e ciclos <strong>de</strong> luminosida<strong>de</strong> <strong>de</strong> 12h. O<br />
tratamento foi administrado por gavagem (100µL.10g -1 <strong>de</strong> massa corpórea) uma única<br />
vez empregando-se cinco grupos <strong>de</strong> animais (3 machos e 3 fêmeas por grupo), e em<br />
duplicata a fim <strong>de</strong> posterior análises nos tempos <strong>de</strong> 24h e 48h (tratamentos <strong>de</strong> 250, 500,<br />
1000, 1500 e 2000mg.Kg -1 ). Controles negativo (NaCl 0,9%) e positivo (50 mg.Kg -1 <strong>de</strong> N-<br />
Nitroso-N-ethylurea) foram incluídos. Após os tempos <strong>de</strong> tratamento, os animais foram<br />
sacrificados por inalação <strong>de</strong> CO 2 em câmaras <strong>de</strong> acrílico adaptadas. Os fêmures foram<br />
retirados e, rapidamente, células da medula óssea foram coletadas (1mL <strong>de</strong> NaCI 0,9%),<br />
homogeneizadas e centrifugadas (1000rpm/5min). Sedimentos celulares foram<br />
ressuspensos (500µL <strong>de</strong> formol 4% em NaCI 0,9%). As lâminas foram preparadas por<br />
esfregaço, mantidas a temperatura ambiente e submetidas a coloração (Leishman<br />
eosina-azul). Eritrócitos policromáticos (PCEs) foram analisados quanto a presença <strong>de</strong><br />
micronúcleos (aumento <strong>de</strong> 1000×), contados (2000 PCEs/animal) e fotografados. Os<br />
dados foram submetidos à análise estatística <strong>de</strong> variância, em <strong>de</strong>lineamento inteiramente<br />
casualizado e esquema fatorial 7×2×2 (tratamento×sexo×tempo), e ao teste Tukey (5% <strong>de</strong><br />
significância) empregando o software SAS ® (versão 8.01). Os resultados revelaram<br />
diferenças estatísticas significativas do número/índice percentual <strong>de</strong> PCEs<br />
micronucleados entre o grupo <strong>de</strong> animais do controle positivo (ENU 50 mg.Kg -1 ) e<br />
controle negativo (NaCl 0,9%), bem como controle positivo e tratamentos (250-<br />
2000mg.Kg -1 ) com o extrato. Entretanto, essas diferenças não foram observadas entre o<br />
grupo <strong>de</strong> animais do controle negativo e o grupo <strong>de</strong> animais tratados com o extrato e,<br />
ainda, entre os sexos e os tempos <strong>de</strong> tratamento (24-48h), sugerindo que o extrato<br />
hidroalcóolico <strong>de</strong> sementes <strong>de</strong> H. annuus Linné não apresenta potencial clastogênico<br />
e/ou aneugênico.<br />
Palavras-chave: Helianthus annuus Linné (girassol), extrato hidroalcoólico, teste do<br />
micronúcleo, mutagênese, girassol.
Ensaio <strong>de</strong> mutagenicida<strong>de</strong> do extrato <strong>de</strong> Ziziphus joazeiro Mart. empregando o<br />
teste do micronúcleo em roedores in vivo<br />
RESENDE, M.R.¹, ALVES, V.E.¹, CABRAL, J.H.C¹, FLORÊNCIO, D¹, DA SILVA, J.J.¹,<br />
BASSI, R.C.¹; DA COSTA, A.M.D.D.¹, FIORINI, J.E.¹, DA SILVA, L.M.¹, NOGUEIRA,<br />
D.A.², PINTO, L.H.F¹, LOPES, J.R.G¹, BORIOLLO, M.FG.¹<br />
1.Laboratório <strong>de</strong> Genética e Biologia Molecular - UNIFENAS, Alfenas, MG, Brasil.<br />
2. Universida<strong>de</strong> Fe<strong>de</strong>ral <strong>de</strong> Alfenas - UNIFAL, Alfenas, MG, Brasil.<br />
Cascas e folhas <strong>de</strong> Ziziphus joazeiro Mart. (raspa-<strong>de</strong>-juá) são tradicionalmente usadas na<br />
medicina popular do nor<strong>de</strong>ste, na forma <strong>de</strong> extrato feito com água, usado por via oral<br />
para alívio <strong>de</strong> problemas gástricos, e externamente para limpeza dos cabelos e dos<br />
<strong>de</strong>ntes e para clarear a pele do rosto, sendo referido inclusive como tonico capilar,<br />
anticaspa e remédio útil nas doenças da pele. O teste do micronúcleo em medula óssea<br />
<strong>de</strong> roedores in vivo tem sido amplamente utilizado para a <strong>de</strong>tecção <strong>de</strong> agentes<br />
clastogênicos e aneugênicos e, ainda, aceito pelas agências internacionais e instituições<br />
governamentais, como parte da bateria <strong>de</strong> testes recomendada para se estabelecer a<br />
avaliação e o registro <strong>de</strong> novos produtos químicos e farmacêuticos que entram<br />
anualmente no mercado mundial. A presente pesquisa vem contribuir para o<br />
conhecimento do potencial genotóxico <strong>de</strong>sse extrato, até o presente momento<br />
inexistente. Devido a sua potencialida<strong>de</strong> nutricional e terapêutica em humanos, analisouse<br />
o seu potencial mutagênico através do teste do micronúcleo em roedores in vivo.<br />
Camundongos Swiss albinus (machos e fêmeas) adultos jovens (30g a 40g) foram<br />
utilizados no teste. Antece<strong>de</strong>ndo o ensaio, esses animais foram aclimatados às<br />
condições do laboratório por 7 dias, tratados com ração comercial Labina Purina ® e água<br />
ad libitum em ambiente climatizado a 22°C ± 3°C e ciclos <strong>de</strong> luminosida<strong>de</strong> <strong>de</strong> 12h. O<br />
tratamento foi administrado por gavagem (100µL.10g -1 <strong>de</strong> massa corpórea) uma única<br />
vez empregando-se cinco grupos <strong>de</strong> animais (3 machos e 3 fêmeas por grupo), e em<br />
duplicata a fim <strong>de</strong> posteriores análises nos tempos <strong>de</strong> 24h e 48h (tratamentos <strong>de</strong> 500,<br />
1000, 1500 e 2000mg.Kg -1 ). Controles negativo (NaCl 0,9%) e positivo (50 mg.Kg -1 <strong>de</strong> N-<br />
Nitroso-N-ethylurea) foram incluídos. Após os tempos <strong>de</strong> tratamento, os animais foram<br />
sacrificados por inalação <strong>de</strong> CO 2 em câmaras <strong>de</strong> acrílico adaptadas. Os fêmures foram<br />
retirados e, rapidamente, células da medula óssea foram coletadas (1mL <strong>de</strong> NaCI 0,9%),<br />
homogeneizadas e centrifugadas (1000rpm/5min). Sedimentos celulares foram<br />
ressuspensos (500µL <strong>de</strong> formol 4% em NaCI 0,9%). As lâminas foram preparadas por<br />
esfregaço, mantidas a temperatura ambiente e submetidas a coloração (Leishman<br />
eosina-azul). Eritrócitos policromáticos (PCEs) foram analisados quanto a presença <strong>de</strong><br />
micronúcleos (aumento <strong>de</strong> 1000X), contados (2000 PCEs/animal) e fotografados. Os<br />
dados foram submetidos à análise estatística <strong>de</strong> variância, em <strong>de</strong>lineamento inteiramente<br />
casualizado e esquema fatorial 7X2X2 (tratamentoXsexoXtempo), e ao teste Tukey (5%<br />
<strong>de</strong> significância) empregando o software SAS ® (versão 8.01). Os resultados revelaram<br />
diferenças estatísticas significativas do número/índice percentual <strong>de</strong> PCEs<br />
micronucleados entre o grupo <strong>de</strong> animais do controle positivo (ENU 50 mg.Kg -1 ) e<br />
controle negativo (NaCl 0,9%) ou todos os tratamentos realizados. Portanto, sugere-se<br />
ausência <strong>de</strong> potencial clastogênico e/ou aneugênico do extrato <strong>de</strong> Ziziphus joazeiro Mart.<br />
Palavras-chave: extrato <strong>de</strong> Ziziphus joazeiro Mart. (raspa-<strong>de</strong>-juá), micronúcleo,<br />
genotoxida<strong>de</strong>.
Padrão <strong>de</strong> colonizacão mono e policlonal <strong>de</strong> Candida albicans altamente virulenta<br />
entre pacientes diabéticos e seus cônjuges não-diabéticos<br />
BORIOLLO, M.F.G. 1 ; BASSI, R.C. 1 ; SPOLIDÓRIO, D. M. P. 1<br />
1. Laboratório <strong>de</strong> Genética e Biologia Molecular, Universida<strong>de</strong> <strong>de</strong> Alfenas,<br />
Alfenas, MG, Brasil.<br />
Infecções bucais por espécies <strong>de</strong> Candida po<strong>de</strong>m ser freqüentes e severas em pacientes<br />
com diabetes mellitus. Essas espécies têm <strong>de</strong>senvolvido mecanismos específicos <strong>de</strong><br />
virulência que conferem habilida<strong>de</strong>s para colonizar as superfícies dos hospe<strong>de</strong>iros, e<br />
invadir tecidos profundos ou evadir as <strong>de</strong>fesas dos hospe<strong>de</strong>iros. A presente pesquisa<br />
investigou o perfil <strong>de</strong> colonização bucal por C. albicans, associada ou não a outras<br />
espécies do gênero, e sua habilida<strong>de</strong> <strong>de</strong> virulência e transmissão entre pacientes com<br />
diagnóstico clínico <strong>de</strong> diabetes mellitos e seus cônjuges não-diabéticos. Amostras bucais<br />
<strong>de</strong> 52 casais foram plaqueadas diretamente sobre meio cromogênico a fim <strong>de</strong> avaliar a<br />
homogeneida<strong>de</strong> populacional das espécies <strong>de</strong> Candida. A <strong>de</strong>tecção <strong>de</strong> linhagens <strong>de</strong> C.<br />
albicans strains (Electrophoretic Types - ETs) e seus relacionamentos genéticos foram<br />
estabelecidos por marcadores isoenzimáticos (MLEE) e análises <strong>de</strong> agrupamento. A<br />
virulência dos isolados <strong>de</strong> C. albicans foi avaliada pelos testes <strong>de</strong> proteinases e<br />
fosfolipases usando métodos <strong>de</strong> cultura microbiológicos específicos. Em 12 casais<br />
(23,1%), ambos os cônjuges mostraram colonização por C. albicans exclusivamente<br />
(9,6%) ou em associação (13,5%), incluindo C. tropicalis, C. krusei, C. dubliniensis e<br />
Candida spp. Em trinta e três casais (63,4%), apenas um dos cônjuges foi colonizado por<br />
C. albicans (i.e., 19 pacientes diabéticos versus 14 cônjuges não-diabéticos). Espécies <strong>de</strong><br />
Candida não-albicans foram observadas em ambos os cônjuges <strong>de</strong> três casais (5,7%), e<br />
a ausência <strong>de</strong> colonização por essas leveduras ocorreu em quatro casais (7,7%). MLEE<br />
revelou 52 linhagens entre 119 isolados <strong>de</strong> C. albicans e 6 isolados <strong>de</strong> C. dubliniensis.<br />
Linhagens idênticas (1,9% dos casais / 8,3% dos casais C. albicans-positivos) ou<br />
altamente relacionadas (13,5% dos casais / 58,3% dos casais C. albicans-positivos)<br />
foram observadas em ambos os cônjuges <strong>de</strong> oito casais, enquanto que linhagens<br />
mo<strong>de</strong>radamente relacionadas ou relacionadas geneticamente à distância ocorreram entre<br />
cônjuges <strong>de</strong> quatro casais (7,7% dos casais / 33,4% dos casais C. albicans-positivos).<br />
Em adição, casais ou cônjuges não-relacionados também mostraram um padrão <strong>de</strong><br />
colonização por linhagens idênticas ou altamente relacionadas. A habilida<strong>de</strong> <strong>de</strong> virulência<br />
foi observada em acima <strong>de</strong> 90% dos isolados testados in<strong>de</strong>pen<strong>de</strong>ntemente das<br />
características genéticas do patógeno ou clínicas do hospe<strong>de</strong>iro. A colonização bucal<br />
simultânea por espécies <strong>de</strong> Candida, especialmente C. albicans, entre pacientes<br />
diabéticos e seus respectivos cônjuges foi relativamente baixa (12 <strong>de</strong> 52 casais), porém<br />
na maioria <strong>de</strong>sses casos a transmissão e a adaptação/microevolução <strong>de</strong> linhagens<br />
po<strong>de</strong>m ocorrer entre cônjuges relacionados (8 <strong>de</strong> 12 casais). In<strong>de</strong>pen<strong>de</strong>ntemente <strong>de</strong>ssa<br />
colonização simultânea, a maioria dos pacientes diabéticos (34 <strong>de</strong> 52) e dos seus<br />
cônjuges não-diabéticos (29 <strong>de</strong> 52) po<strong>de</strong>m representar uma fonte <strong>de</strong> transmissão e, em<br />
condições <strong>de</strong> imunossupressão, apresentar sintomatologia clínica infecciosa proveniente<br />
<strong>de</strong> uma variabilida<strong>de</strong> <strong>de</strong> linhagens oportunistas <strong>de</strong> C. albicans, altamente virulentas, bem<br />
como outras espécies <strong>de</strong> Candida menos freqüentes.<br />
Palavras-chave: C. albicans, transmissibilida<strong>de</strong> bucal, diabetes mellitus, virulência,<br />
MLEE.