UNIVERSIDADE COMUNITÁRIA DA REGIÃO DE ... - Unochapecó

UNIVERSIDADE COMUNITÁRIA DA REGIÃO DE CHAPECÓ
Programa de Pós-Graduação em Ciências Ambientais
Osmar Tomazelli Júnior
USO DE EXTRATOS VEGETAIS NO CONTROLE DE
LARVAS DE INSETOS AQUÁTICOS (INSECTA: ODONATA)
PREDADORES DE ALEVINOS EM VIVEIROS DE
PISCICULTURA
Chapecó - SC, 2009

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UNIVERSIDADE COMUNITÁRIA DA REGIÃO DE CHAPECÓ
Programa de Pós-Graduação em Ciências Ambientais
Osmar Tomazelli Júnior
Dissertação apresentada ao Programa de Pósgraduação
da Universidade Comunitária da Região de
Chapecó, como parte dos pré-requisitos para obtenção
do título de Mestre em Ciências Ambientais.
Orientador: Prof. Dr. Jacir Dal Magro
Co-orientadora: Prof a. Dra. Gilza Maria Souza Franco
Chapecó - SC, agosto, 2009.

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FICHA CATALOGRÁFICA
639.3 Tomazelli Júnior, Osmar
T655u
Uso de extratos vegetais no controle de larvas de insetos
aquáticos (insecta : odontata) predadores de alevinos em
viveiros de piscicultura /
Osmar Tomazzelli Júnior. Chapecó, 2009
77 p.
Dissertação (Mestrado) - Universidade Comunitária
Regional de Chapecó, 2009.
Orientador: Jacir Dal Magro, Gilza Maria de Souza Franco
1. Peixe – Efeitos dos inseticidas. 2. Óleos vegetais. 3. Inseto.
I. Dal Magro, Jacir. II. Franco, Gilza de Souza. III. Título
CDD639.3
Catalogação Joseana Foresti CRB 14/536
Biblioteca Central Unochapecó

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DEDICATÓRIA
Aos meus pais, Osmar e Lourdes pelo
amor, carinho e amizade que sempre
transmitiram.
À minha esposa e filha, Ingrid e Joana pelo
grande amor que nos une e por tornarem
minha vida cada dia mais feliz.

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AGRADECIMENTOS
Aos meus orientadores professor Dr. Jacir Dal Magro e professora Dra. Gilza Maria de
Souza Franco pelos ensinamentos, amizade e liberdade adquiridos durante o desenvolvimento
deste trabalho.
Aos professores Dr. Rivaldo Niero e Dr. Franco Delle Monache pela colaboração na
identificação dos compostos isolados.
Aos acadêmicos Rudi Alba, Guilherme Agnolini, Camila Cipriani e Antonio Carlos
Munarini pelo interesse, participação, colaboração e entusiasmo durante as coletas a campo e
nos ensaios laboratoriais.
Ao colega e amigo Jorge de Matos Casaca pelas valiosas discussões, por ter
disponibilizado a sua propriedade para as coletas e pelo fornecimento dos alevinos de carpa.
Ao amigo André Colombi por ter me apresentado às qualidades do cinamomo e não
somente pela permissão das coletas das sementes em sua propriedade, mas pela sua
colaboração amiga e espontânea.
Às equipes do laboratório de Química, Maria Elena Krombauer Anselmini, Raquel
Zeni Termus e Tânia Cunha; do museu zoobotânico Sandra Mara Sabedot e João Carlos
Marocco e ao Eng. Químico Dougla Mocellin pelo apoio durante a execução dos
experimentos.
À DEUS pela minha vida, saúde e perseverança.

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RESUMO
TOMAZELLI JÚNIOR, Osmar. Uso de extratos vegetais no controle de larvas de insetos
aquáticos (INSECTA: ODONATA) predadores de alevinos em viveiros de piscicultura.
Dissertação (Mestrado). Universidade Comunitária da Região de Chapecó, 2009. 77 p.
A presença de larvas de insetos predadores em viveiros de piscicultura é um dos
fatores que contribuem para a redução da sobrevivência dos alevinos e consequentemente
para a diminuição dos lucros da produção, forçando os piscicultores a aplicar quantidades
elevadas de agrotóxicos com o intuito de eliminá-las. Esses produtos são tóxicos aos peixes e
com efeitos imprevisíveis à cadeia alimentar. Dentre os insetos prejudiciais à piscicultura,
encontram-se as libélulas que pertencem à ordem Odonata, que em sua maioria fazem postura
diretamente na água. As larvas são carnívoras e vorazes predando desde pós-larvas de peixes
a alevinos tornando-se pragas de importância econômica. O uso indiscriminado de
agrotóxicos nos cultivos de peixes pode ocasionar danos aos ecossistemas aquáticos e
representar riscos à saúde dos trabalhadores e consumidores. O objetivo deste trabalho foi
avaliar o efeito de extratos vegetais adsorvidos em sílica no controle de 20s de odonata, e
realizar estudo fitoquímico dos extratos que evidenciarem atividade biológica. A adsorção do
metil paration (MP) em sílica possibilitou uma redução da concentração letal às odonatas de 8
vezes em relação a concentração indicada para diluição diretamente na água do viveiro. O MP
e o extrato alcoólico dos frutos de cinamomo (EAC) adsorvidos em sílica mostraram-se
eficientes no controle das larvas de odonata. Porém as mortalidades retardaram 12 horas no
teste com EAC em relação ao MP e prolongaram-se por 12 horas. As menores concentrações
letais encontradas tiveram uma diferença de 4 vezes entre o MP e o EAC. A CL 50-12h para o
MP foi de 0,17 mg L -1 e para o EAC a CL 50-18 h foi de 0,57 mg L -1 . Nos viveiros monitorados
foram registradas um total de 126 larvas (INSECTA: ODONATA) da subordem Anisoptera,
73 pertencentes à família Aeshnidae e 53 à Libellulidae. O gênero Neuraeschna foi dominante
nos três viveiros amostrados e foi utilizado para os testes biológicos. Durante os testes de
predação de alevinos de carpa comum (Cyprinus carpio) pela larva de Neuraeschna o
consumo diário foi de 5,2 e 7,2 alevinos nos tratamentos com e sem a presença do EAC
respectivamente. No comprimento total as odonatas eram 1,6 vezes maiores que os alevinos
de carpa comum (Cyprinus carpio), porém, 11,33 vezes mais pesadas que os mesmos,
evidenciando a desvantagem dos alevinos em relação ao seu predador. O EAC não foi tóxico
aos alevinos de carpa comum em concentrações até 7,4 vezes superiores à menor
concentração letal calculada para as larvas de Neuraeschna. Na análise fitoquímica as frações
de hexano, diclorometano, acetato de etila e etanol do EAC mostraram resultados positivos
para terpenos e esteróides. Os compostos isolados através de CC foram identificados através
de RMN. Foram isolados dois compostos, o ácido linoléico, ácido graxo comum em plantas
sendo um composto importante no metabolismo primário, e a melianona, um triterpeno
precursor dos limonóides, compostos com atividade inseticida. Na adoção das Boas Práticas
da Aquicultura a substituição de pesticidas sintéticos por produtos naturais é um caminho a
ser percorrido rumo à sustentabilidade da piscicultura.
Palavras-chave: Carpa, Melia azedarach, melianona, Neuraeschna, organofosforado

vii
ABSTRACT
TOMAZELLI JÚNIOR, Osmar. Use of vegetal extracts in the control of aquatic insect larvae
(INSECTA: ODONATA), which are predators of fingerlings in fish farming ponds.
Dissertation (Master’s Degree). Communitarian University of Chapecó, 2009, 77 p.
The presence of larvae of predator insects in fish farming ponds is one of the factors
that contribute to the reduction of the survival of fingerlings and consequently to the decrease
of production profits, forcing fish farmers to employ high levels of pesticides with the
intention to eliminate them. Those products are toxic for fish and have unpredictable effects
on the food chain. Dragonflies, which belong to the order Odonata and lay their eggs directly
in the water, are among the insects that have a harmful effect on fish farming. The larvae are
starving carnivore: they predate post-larvae fish and fingerlings and thus become
economically relevant plagues. The continuous use of pesticides in fish farming may bring
risks to aquatic ecosystems and to the health of workers and consumers. The objective of this
work is to evaluate the effect of vegetal extracts adsorved in silica to control odonata larvae
and to make a phytochemical study of the extracts that exhibit biological activity. The
adsorption of methyl parathion in silica enabled an eight times reduction of the lethal
concentration used for odonatas, comparing to the indicated concentration which is diluted
directly in the pond’s water. Methyl parathion (MP) and cinnamon’s alcoholic extract (EAC),
when adsorved in silica, showed to be efficient in the control of odonata larvae. Yet, EAC’s
test delayed mortality in 12 hours, comparing to MP’s and extended for 12 hours and more.
The smaller lethal concentrations found had a 4 times difference between MP and EAC. The
CL 50-12h was 0,17 for MP and for EAC the CL 50-18h was 0,57 mg L -1 . A total of 126 larvae
(INSECTA: ODONATA) of the suborder Anisoptera were registered in the monitored ponds.
Of those, 73 belonged to the family Aeshnidae and 53 to the Libellulidae. The genera
Neuraeschna was dominant in the three sampled ponds and was used in the biological tests.
During the tests of predation of fingerlings of common carps (Cyprinus carpio) by the
Neuraeschna larva, the daily consumption was of 5,2 and 7,2 fingerlings in the treatments
with and without EAC, respectively. In what relates to total length, odonatas were 1,6 times
bigger than fingerlings of common carps (Cyprinus carpio), yet they were 11,33 times
heavier, which demonstrate the disadvantage of the fingerling in relation with its predator.
EAC was not toxic for fingerlings of ordinary carps in concentrations 7,4 times higher than
the smaller lethal concentration calculated for Neuraeschna larvae. In the phytochemical
analysis, EAC’s fractions of hexan, dichloromethane, ethyl acetate and ethanol displayed
positive results for terpenes and steroids. The compounds isolated through chromatographic
methods were identified through NMR. Two compounds were isolated, linoleic acid, a fatty
acid common in plants (an important compound in the primary metabolism) and melianone, a
triterpene that is a precursor of limonoids (compounds with an insecticide activity). The
adoption of Good Practises in Aquaculture and the sustainability of fish farming require the
substitution of synthetic pesticides for natural products.
Key-words: Carp, Melia azedarach, melianone, Neuraeschna, organophosphate

viii
LISTA DE FIGURAS
Figura 1 – Ciclo da biossíntese dos metabólitos secundários. 11
Figura 2 – Estrutura dos terpenos IP, DMAPP e IPP. 12
Figura 3 – Rota biogenética para formação dos limonóides. 13
Figura 4 – Fórmula estrutural do metil paration: 20
Figura 5 – Exemplares do cinamomo (Melia azedarach) 30
Figura 6 – Esquema metodológico para obtenção dos extratos alcoólicos brutos e semi
purificados. 32
Figura 7 – Viveiro de alevinagem de carpa comum (Cyprinus carpio). 35
Figura 8 – Estrutura química do ácido linoléico. 40
Figura 9 – Estrutura química do triterpeno Melianona (C 30 H 26 O 4 ). 41
Figura 10 – Espectro de próton – H 1 -RMN da fração A1 43
Figura 11 – Espectro de próton – H 1 -RMN da fração A1 (continuação) 44
Figura 12 – Espectro carbono C 13 -RMN da fração A1 45
Figura 13 – Espectro carbono C 13 -RMN da fração A1 (continuação). 46
Figura 14 – Espectro de próton – H 1 -RMN da fração A2 47
Figura 15 – Espectro de próton – H 1 -RMN da fração A2 (continuação). 48
Figura 16 – Espectro de próton – H 1 -RMN da fração A2 (continuação). 49
Figura 17 – Espectro carbono C 13 -RMN da fração A2 50
Figura 18 – Espectro carbono C 13 -RMN da fração A2 (continuação). 51
Figura 19 – Espectro carbono C 13 -RMN da fração A2 (continuação). 52
Figura 20 – Comparação entre a Diversidade, Dominância e Equitabilidade das larvas de
odonata entre os viveiros amostrados. 54
Figura 21 – Imago de Neuraeschna. 56
Figura 22 – Neuraeschna adulta e exúvia. 57
Figura 23 – Mortalidade das larvas de Neuraeschna (ODONATA:AESHNIDAE) nas
diferentes concentrações do MP adsorvido em sílica. 58
Figura 24 – Mortalidade das larvas de Neuraeschna (ODONATA: AESHNIDAE) nas
diferentes concentrações do EAC adsorvido em sílica. 60
Figura 25 – Larva de Neuraeschna utilizada nos testes de predação 63
Figura 26 – Larva de Neuraeschna e efeito da predação sobre alevinos de Carpa comum
(Cyprinus carpio) utilizados nos testes de predação. 65

ix
Figura 27 – Número de larvas de carpa comum (Cyprinus carpio) consumidas pelas larvas de
Neuraeschna durante os testes de predação. 65

x
LISTA DE TABELAS
Tabela 1. Análise fitoquímica do EAC através de cromatografia em camada delgada. 39
Tabela 2. Dados do espectro C 13 -RMN do composto A2 42
Tabela 3. Média e desvio padrão das variáveis físicoquímicas da água nos três viveiros
amostrados. 56
Tabela 4. Comprimento total das larvas de Neuraeschna (ODONATA: AESHNIDAE), média
e desvio padrão das variáveis físicoquímicas da água durante os testes com MP. 59
Tabela 5. Equações lineares, R 2 e CL 50 (mg L -1 ) do MP e do EAC nos testes de toxicidade
com as larvas de Neuraeschna (ODONATA: AESHNIDAE). 61
Tabela 6. Comprimento total das larvas de Neuraeschna, média e desvio padrão das variáveis
físicoquímicas da água durante os testes com EAC. 62
Tabela 7. Comprimento total das larvas de Neuraeschna, média e desvio padrão das variáveis
físicoquímicas da água durante os testes de toxicidade com alevinos de carpa
comum. 63
Tabela 8. Comprimento total das larvas de Neuraeschna, média e desvio padrão das variáveis
físicoquímicas da água durante os testes de predação. 66

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LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS
ACAq – Associação catarinense de aquicultura
ACARPESC – Associação de Crédito e Assistência Pesqueira de Santa Catarina
AE – Acetato de etila
BID – Banco Interamericano de Desenvolvimento
CC – Cromatografia em coluna
CCD – Cromatografia em camada delgada
CERLA – Centro regional latino americano de aquicultura e pesca
CONAMA – Conselho Nacional do Meio Ambiente
DCM – Diclorometano
DL – Dose Letal.
EAC – Extrato alcoólico dos frutos do cinamomo
EAT – Extrato alcoólico das folhas do timbó
EMPASC – Empresa de Pesquisa Agropecuária de Santa Catarina
FAO – Organização das Nações Unidas para a agricultura
Hx – Hexano
MAPA – Ministério da Agricultura Pecuária e Abastecimento
MP – Metil paration
RMN- 13 C – Ressonância Magnética Nuclear de Carbono– 13
RMN- 1 H – Ressonância Magnética Nuclear de Hidrogênio
SEAP/PR – Secretaria Especial de Aquicultura e Pesca
SNO – Secretaria dos Negócios do Oeste
SUDEPE – Superintendência do Desenvolvimento da Pesca
SUDESUL – Superintendência do Desenvolvimento da Região Sul

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SUMÁRIO
1. INTRODUÇÃO 1
2. OBJETIVOS 3
2.1 Objetivo geral 3
2.2 Objetivos específicos 4
3 REFERENCIAL TEÓRICO 4
3.1 Breve histórico da piscicultura no Brasil e Oeste Catarinense 4
3.2 Cinamomo 6
3.3 Timbó 8
3.4 Produtos naturais 8
3.5 Inseticidas sintéticos e seu uso em aquicultura 19
3.6 Ordem Odonata (INSECTA:ODONATA) 24
4. MATERIAL E MÉTODOS 30
4.1 Material vegetal 30
4.2 Preparo dos extratos e adsorção dos extratos vegetais e metil paration em sílica gel 30
4.3 Análise fitoquímica e separação dos compostos 31
4.4 Identificação e elucidação estrutural dos compostos isolados. 32
4.5 Pesquisa das larvas de Odonata associadas a viveiros de alevinagem de carpa comum
(Cyprinus carpio). 32
4.6 Avaliação da eficiência dos extratos vegetais e metil paration no controle das larvas de
Odonata. 35
4.7 Avaliação da toxicidade do EAC em alevinos de carpa comum (Cyprinus carpio). 37
4.8 Testes de predação de alevinos de carpa comum (Cyprinus carpio) por larvas de Odonata
com e sem exposição ao EAC 37
5. RESULTADOS E DISCUSSÃO 38
5.1 Análise fitoquímica do EAC 38
5.2 Separação dos compostos 39
5.3 Identificação das frações A1 e A2, isoladas do EAC adsorvido em sílica através de
Ressonância Magnética (RMN) 40
5.4 Pesquisa das larvas de Odonata associadas a viveiros de alevinagem de carpa comum
(Cyprinus carpio) 53

xiii
5.5 Avaliação da eficiência dos extratos vegetais e metil paration no controle das larvas de
Neuraeschna (ODONATA: AESHNIDAE) 57
5.6 Avaliação da toxicidade do EAC em alevinos de carpa comum (Cyprinus carpio) 62
5.7 Predação de alevinos de carpa comum (Cyprinus carpio) por larvas de Neuraeschna
(ODONATA : AESHNIDAE) com e sem exposição ao EAC 63
6. CONCLUSÕES E CONSIDERAÇÕES FINAIS 66
7. REFERÊNCIAS 67

1
1. INTRODUÇÃO
Estima-se que a população mundial crescerá 47% até o ano de 2050 totalizando 8,9
bilhões de pessoas, como consequência haverá um crescimento na demanda por alimentos
(CARROLL, 2005). O pescado tem sido uma importante fonte de proteína animal para
consumo humano representando 35% da produção mundial e, se considerarmos isoladamente
é a maior delas. A poluição e a pesca predatória têm ao longo dos anos comprometido as
pescas oceânicas responsáveis por cerca de 64% da produção mundial de pescado. Desde
meados dos anos 80 a produção mundial de pescado marinho capturado tem se mantido
estável sem condições de aumentar devido à sobrepesca e à poluição exercida sobre as
principais populações de peixes, moluscos e algas. Em 1999 a produção de pescado capturado
foi de 85,2 milhões de toneladas, diminuindo ano após ano atingindo 81,3 milhões de
toneladas em 2003. Neste mesmo período o pescado oriundo da aquicultura aumentou de 33,5
milhões de toneladas em 1999 para 41,9 milhões de toneladas em 2003 apresentando um
crescimento de 25%, enquanto que, outras carnes apresentam um crescimento médio anual de
2,5%. Deste total 25,2 milhões de toneladas são oriundas do cultivo de peixes de água doce
(FAO, 2004; MEAT INTERNATIONAL, 2005). É importante frisar que este crescimento tem
acontecido principalmente em países pobres e em desenvolvimento. Para manter o mesmo
nível de consumo per capita anual que atualmente é de 16,2 kg (equivalente ao peso vivo)
haverá a necessidade até 2050 de aumentar a produção de pescado em 42 milhões de
toneladas, ou seja, dobrar a produção atual da aquicultura (FAO, 2004).
No Brasil a aquicultura apresentou em 2003 a maior produção da história com
278.128,5 t e, em 2006 a segunda maior com 271.695,5 t (MATIAS, 2008). Neste mesmo ano
a produção de peixes de água doce foi de 190.161,5 t com um valor bruto de produção de R$
705.014.900,00 e um crescimento relativo entre 2005 e 2006 de 6,4%, acompanhando a
tendência mundial de crescimento da atividade o (IBAMA, 2008).
A aquicultura de Santa Catarina produziu em 2007 36.649,10 t, destas 21.891,65 t são
de peixes de água doce, apresentando um crescimento em relação a 2006 de 4,96%. Esta
produção se concentra nas regiões do Litoral Norte, Vales do rios Tubarão e Araranguá,
extremo Oeste e Oeste Catarinenses (EPAGRI, 2008).
Para a produção de pescado através da piscicultura é necessário maximizar qualitativa
e quantitativamente a produção de alevinos. Os viveiros após estarem secos recebem calagem,
em seguida são preparados com esterco animal ou cama de aviário geralmente 15 dias antes
da estocagem das larvas (CASACA e TOMAZELLI, 2001; TOMAZELLI et al., 2007). As
densidades utilizadas variam de 200 a 400 larvas m -2 , dependendo da espécie e do manejo

2
empregado. Para o sucesso desta fase é necessário garantir uma boa alimentação aos alevinos
através de uma composição e densidade adequados de organismos fito e zooplanctonicos,
caso contrário há uma diminuição na sobrevivência devido à inanição e o aumento do
canibalismo pelos alevinos de maior tamanho. Rações comerciais também são utilizadas nesta
fase com uma composição protéica em torno de 56% de proteína bruta. Nesta fase, devido a
sua fragilidade os peixes estão mais expostos a doenças e ataques por predadores quando
então se verifica a utilização de uma grande variedade de produtos químicos.
(WOYNAROVICH e HORVÁTH, 1981; CASACA e TOMAZELLI, 2001).
Com o desenvolvimento da Piscicultura no Brasil, surgiram problemas que atingiram
níveis assustadores, problemas estes relacionados com a predação de alevinos por adultos e
larvas de insetos aquáticos. Neste último caso, temos uma das grandes ameaças, as larvas de
odonata. O hábito altamente predatório dessas larvas tem constituído um problema não só no
Brasil, mas também em outros países (SANTOS et al., 1988). Nos viveiros de piscicultura é
um dos fatores que contribuem para a redução da sobrevivência dos alevinos e
consequentemente para a diminuição dos lucros da produção (ZANIBONI FILHO, 2000;
CESNIK e QUEIROZ, 2004).
No cultivo de organismos aquáticos, como em todo setor de produção de alimentos, os
produtos químicos são insumos necessários para o sucesso da produção. Desde o mais simples
como nos sistemas extensivos que podem ser limitados pelo uso de fertilizantes químicos ou
orgânicos, como nos mais complexos, semi e superintensivo, onde uma variedade de produtos
naturais e sintéticos são utilizados. É seguro dizer que, como na agricultura, os produtos
químicos são ingredientes essenciais para o sucesso da aquicultura (ARTHUR et al., 1996).
O uso de inseticidas organofosforados e outros praguicidas com o objetivo de
controlar larvas de odonata e os principais grupos zooplanctonicos predadores de pós-larvas
de peixes, no Brasil, data do inicio da década de 80. Na Europa já era utilizado há quinze anos
quando de sua aplicação no preparo de viveiros de piscicultura (GARADI et al., 1988;
WOYNAROVICHM e HORVÁTH, 1981). No Brasil a eficiência do DIPTEREX (triclorfon)
e o folidol (paration metílico) no combate as odonatas foi verificada por GARADI et al.,
(1988). Embora eficiente, esse tipo de controle está proibido em vários países por causar
contaminação da água e a morte de parte do zooplâncton necessário para alimentação das póslarvas
e alevinos (ZANIBONI FILHO, 2000). Até os dias de hoje os praguicidas sintéticos
continuam a ser utilizados para estes fins e também para o controle de ectoparasitas nos
viveiros de peixes. (TAMASSIA, 1996; CRUZ, 2005; SANTOS, 2007). Nos pesquepagues
também são utilizados de forma constante, o que pode gerar diversos problemas, uma vez que

3
são produtos perigosos, recalcitrantes e cujos produtos de degradação no ambiente podem ser
tão ou mais deletérios aos organismos do que a forma original (ELER, et. al., 2006).
Diversos agrotóxicos são utilizados na pesquisa Brasileira com as propostas de avaliar
a eficácia, o uso e o custo de produtos químicos no tratamento de enfermidades de diversas
espécies. Geralmente esses trabalhos terminam de certa forma com recomendações, induzindo
ao leitor que o produto utilizado foi eficiente e, portanto pode ser usado de acordo com sua
recomendação. Pode-se citar entre os produtos utilizados triclorfon, metil paration,
diflubenzuron para o controle de parasitas externos e larvas de insetos predadores,
oxitetraciclina, sulfamerazina e cloranfenicol para o controle de bactérias e mebendazol para o
controle de platelmintos (CASACA e CASTRO, 2006).
O uso de produtos químicos em tanques de cultivo como inseticidas e bactericidas
podem ter ação cumulativa e representar risco à segurança alimentar (BOYD e MASSAUT,
1999). A aplicação destes inseticidas pode resultar em altos níveis de resíduos nos peixes,
inclusive no momento do consumo, pois normalmente os períodos de carência não são
respeitados pelos piscicultores (RODRIGUES et al., 1997). Santos (2007) detectou acumulo
nos filés de peixes submetidos ao tratamento com diflubenzuron e paration metílico, valores
estes excederam os limites máximos recomendado para alimentos segundo o Codex
Alimentarius.
A piscicultura por utilizar a água como insumo está constantemente sendo questionada
quanto às suas práticas e produtos utilizados no cultivo, tanto pelos órgãos ambientais, como
pela sociedade, que cobram práticas que comprovem a manutenção de um ambiente aquático
saudável e equilibrado. O desenvolvimento de produtos naturais para o controle de pragas e
doenças e metodologias adequadas de aplicação que venham a suprir esta lacuna na
piscicultura Brasileira colaborarão para que esta se desenvolva de forma sustentável,
garantindo a melhoria das condições ambientais, à produção de alimentos seguros e à
proteção da saúde dos produtores rurais envolvidos na produção de pescado.
2. OBJETIVOS
2.1 Objetivo geral
2.1.1 Avaliar o efeito de extratos vegetais no controle de larvas de odonata predadores de
formas jovens de peixes.

4
2.2 Objetivos específicos
2.2.1 Obtenção de extratos vegetais de Melia azedarach L. e Ateleia glazioviana Baill, através
de extração alcoólica.
2.2.2 Adsorção dos extratos brutos em sílica para o controle das larvas de odonata
disponibilizando-os no ambiente de fundo.
2.2.3 Identificar as principais classes de metabólicos secundários presentes nos extratos
vegetais com atividade biológica.
2.2.4 Isolar e identificar compostos químicos dos extratos que demonstraram atividade
biológica.
2.2.5 Pesquisar a ocorrência de larvas de odonata (ODONATA: ANISOPTERA) em viveiros
de produção de alevinos de carpa comum (Cyprinus carpio).
2.2.6 Avaliar a eficiência dos extratos vegetais e metil paration no controle das larvas de
odonata.
2.2.7 Avaliar a toxicidade dos extratos ativos em alevinos de carpa comum (Cyprinus carpio).
2.2.8 Realizar testes de predação das larvas de Neuraeschna em alevinos de carpa comum.
3. REFERENCIAL TEÓRICO
3.1 Breve histórico da piscicultura no Brasil e Oeste Catarinense
No inicio da década de 1930 Rodolpho Von Ihering começou a pensar na
domesticação de algumas espécies mais nobres dos rios Mogi Guaçu e Piracicaba, como a
piapara (Leporinus sp.), o curimbatá, (Prochilodus lineatus) e o dourado (Salminus
maxillosus). Em 1934, Ihering e seus colaboradores obtiveram êxito na reprodução induzida,
com o bagre (Rhamdia sp.) e o cascudo (Loricaria sp.), coletados nas águas do rio Tietê (
AZEVEDO, 1936 apud CASTAGNOLLI, 2004).
Em 1967 foi criada a Superintendência do Desenvolvimento da Pesca (SUDEPE),
autarquia vinculada ao Ministério da Agricultura. A SUDEPE se preocupava mais com a

5
pesca extrativa por ser um segmento organizado relegando a aquicultura a um segundo plano,
a qual praticamente inexistia em nosso país (CASTAGNOLLI, 2004).
Desde 1973 várias iniciativas foram colocadas em prática pela Associação de Crédito
e Assistência Pesqueira de Santa Catarina (ACARPESC) para promover o cultivo de peixes
de água doce, como assistência técnica aos produtores; subsídio ao preço de alevinos; suporte
à organização através de associações de piscicultores; promoções de peixe fresco; oferta de
cursos de piscicultura entre outras (BOLL, 1995). Em 1978 foi instalado em Chapecó um
escritório de assistência técnica com a presença de um técnico. A partir de 1980 a SUDEPE
passou a produzir alevinos de carpas para os produtores rurais da região em uma pequena
estação localizada nas dependências da Empresa de Pesquisa Agropecuária de Santa Catarina
(EMPASC) na cidade de Chapecó (SILVA, 2005). Um convênio entre a Prefeitura Municipal
de Chapecó, o Ministério da Agricultura, a SUDEPE e o Banco Interamericano de
Desenvolvimento (BID) marcou o início da construção do Centro Nacional de Alevinos de
Carpa, como foi denominado na época. O objetivo inicial era suprir a demanda de alevinos e
larvas na região, além de testar, nas suas dependências, técnicas de cultivo com características
regionais, objetivando obter parâmetros a serem utilizados pelos produtores rurais.
A partir de 1980 iniciou-se o programa de construção de açudes e poços através do
governo do Estado, Secretaria dos Negócios do Oeste (SNO) e a Superintendência de
Desenvolvimento da Região Sul (SUDESUL). Durante 10 anos foram construídos mais de
5.000 açudes cujo objetivo inicial era a sedentação animal e a irrigação devido às fortes
estiagens ocorridas em 1977. Efetivamente estes açudes foram utilizados para a prática da
piscicultura devido ao interesse dos produtores rurais pela atividade. Pode-se dizer que este
programa alavancou a produção de peixes no Oeste Catarinense, sendo até hoje responsável
por um grande número de açudes destinados a este fim. (SILVA, 2005).
Ao final da década de 1970 e início da década de 1980, o sistema de cultivo orientado
pelos técnicos da ACARPESC era o monocultivo de carpas alimentadas com subprodutos
existentes nas propriedades rurais. A produção era de 800 kg ha -1 ano -1 e, geralmente
ocorriam frustrações de safra pela utilização de alevinos de 0,5 a 1,0 g (CASACA e
TOMAZELLI, 2001), os quais, eram presa fácil para predadores aquáticos e de baixa
sobrevivência devidos às condições de manejo da época.
A partir de 1983, técnicos da ACARPESC e da SNO participaram do segundo e quarto
cursos em aquicultura, no Centro Regional Latino Americano de Aquicultura (CERLA) na
cidade de Pirassununga, SP. Foi um programa cooperativo entre a Organização das Nações
Unidas para Alimentação (FAO) (projeto GCP/RLA/075/ITA) e a SUDEPE com o objetivo

6
de formação profissional de alto nível para técnicos atuantes em piscicultura na América
Latina. Este curso possibilitou aos técnicos entrarem em contato com as técnicas do
policultivo integrado às outras atividades agropecuárias existentes nas propriedades agrícolas.
Dia sete de novembro de 1987, na reunião do núcleo da Associação Chapecoense de
Aquicultura (ACAq) em Chapecó, foi proposta a nova sistemática de trabalho com ênfase na
organização da produção e do produtor. Foi dado ênfase à recria de alevinos e a fórmula de
cálculo dos povoamentos, levando em consideração, além da área, como era praticado
anteriormente, ou seja, os pesos médios iniciais e finais dos peixes, a taxa de sobrevivência e
a disponibilidade de adubação orgânica. Na organização dos produtores ficou estabelecido
que fosse dado um tratamento diferenciado aos mesmos com interesse na piscicultura e que
acatassem às orientações técnicas (ACAq, 1987) .
A partir de 1988, com a introdução das carpas chinesas, desenvolveu-se um novo
sistema de criação de peixes para a região, o cultivo de espécies de diferentes hábitos
alimentares, intitulando-se Policultivo Integrado. O objetivo era aproveitar a produção de
dejetos pela suinocultura e avicultura como fertilizantes para a produção de alimento natural
na produção de pescado. O policultivo foi bem aceito pelos produtores rurais que passaram a
produzir peixes a baixo custo e de alta competitividade, possibilitando a Santa Catarina, e
particularmente ao Oeste Catarinense a projetarem-se como os maiores produtores de peixes
de água doce do país.
Com uma demanda crescente por pescados a partir da década de 1990, o Oeste
Catarinense passou a fornecer carpas para o Sudeste Brasileiro no abastecimento aos
pesquepagues. A partir daí, o policultivo de peixes fortaleceu-se como o principal sistema de
criação de peixes de água doce em Santa Catarina, com algumas variações entre as espécies
principais e taxas de estocagem. Na segunda metade da década de 1990, o mono e/ou
policultivo de tilápia tem se firmado como uma nova opção para a agricultura familiar. Com
um filé de cor branca e sabor suave, a tilápia tem conquistado seu espaço junto a produtores e
consumidores. Em 2006 a produção total de peixes de água doce no Estado foi de 22.978,44
t, onde a tilápia respondeu com 10.803,3 t da produção, e as carpas com 9.161,05 t,
representando 47% e 40% da produção total respectivamente.
3.2 Cinamomo
O cinamomo (Melia azedarach, L., 1753) é uma árvore pertencente à família
Meliaceae, a mesma do neem, do mogno, da adiroba e do cedro. Popularmente é conhecida

7
com os nomes de cinamomo, santa bárbara, lírio da china, lírio do japão, lilás do japão entre
outros (MARTINEZ, 2002).
Originária do sudeste da Ásia é uma árvore de hábito decíduo de curta duração, com
altura de 6-15 m e tronco de 30-60 cm de diâmetro. Quando jovem, a árvore apresenta uma
casca lisa externamente e, quando velha, fissurada, apresentando, às vezes abundantes
lenticelas grandes. A casca é de cor cinza parda e sabor amargo. Internamente é de cor
amarelada à marfim, textura fibrosa e estrutura laminar (SCHNEIDER, 1987).
É uma planta que apresenta boa adaptação às condições climáticas de toda a Região
Sul, podendo ser encontrada tanto na área litorânea como nas regiões com maiores altitudes.
Prefere solos férteis, profundos e bem drenados. Por possuir facilidade de adaptação e
expansão vegetativa, é bastante cultivada como árvore de sombra e ornamental presente em
milhares de residências da Região Sul.
Possui copa semiarredondada, densa. Folhas até 90 cm, alternas, bipinuladas, com
numerosos folíolos.
Os frutos tipo drupa, semiarredondados, pericarpo liso e ligeiramente transparente, de
cor amarelada quando está maduro, cerca de 15 mm de diâmetro, amarelos, lisos, mas
tornando-se rugosos. Floresce na primavera durante os meses de setembro, outubro e
novembro. Frutos maduros no outono e inverno, quando as árvores estão desfolhadas. Os
frutos, de sabor amargo e propriedades venenosas e narcóticas, podem matar suínos, mas
bovinos e aves não parecem ser suscetíveis. As sementes são dispersas por aves e morcegos, o
que impossibilita o seu controle.
O cinamomo apresenta uma madeira considerada nobre, já sendo utilizada na
fabricação de móveis de luxo, esquadria e laminação. As árvores pequenas e galhos possuem
um bom valor calorífico e são aproveitados como lenha ou produção de carvão (SOUZA
CRUZ, 1987).
São de conhecimento e uso popular as propriedades inseticidas do cinamomo. Entre os
usuários existem indicações do preparo e modo de utilização de extratos dos frutos contra
pulgões, gafanhotos e cochonilhas. Outras formas de utilização são indicadas, como por
exemplo, espalhar ramos e folhas verdes da planta pelo chão do galpão e arredores para o
controle de pulgas, ou pendurar na parede para o controle de moscas
(DICAGROECOLÓGICA, 2001) Trabalhos científicos têm demonstrado os efeitos dos
extratos de cinamomo no controle de insetos e pragas na agricultura (SALLES, 1999;
BRUNHEROTTO e VENDARAMIM, 2001; ARAÚJO et. al., 2009) e a insetos vetores e
transmissores de doenças (PROPHIRO, 2008; GUIRADO, et. al., 2009).

8
Na agropecuária é utilizado popularmente e também pesquisado pelas suas
propriedades anti-helmínticas e carrapaticidas (DANTAS, 2000; VIVAN, 2005; FALBO, et.
al. 2008).
3.3 Timbó
O timbó, Ateleia glazioviana pertence à família Fabaceae é conhecido com os nomes
populares de timbé (SC) e timbózinho.
É uma árvore caducifólia, comumente com 5 a 15 m de altura, podendo atingir até
25m. Tronco reto, fuste, com até 8 metros de comprimento. Ramificação dicotômica, copa
pequena. Folhas compostas, com 40 cm de comprimento e até 30 folíolos alternados, cada um
com até 7 cm de comprimento com nervura principal visível. Flores amareladas, reunidas em
inflorescência terminal com 15 cm de comprimento. Frutos em uma pequena vagem orbicular
indeiscente, amarela clara, alada, com a semente visível no centro, a qual é pequena, de
coloração avermelhada , lembrando um feijão.
Floresce de outubro a janeiro: de outubro a dezembro no Rio Grande do Sul e de
novembro a janeiro no Paraná. Frutos maduros de março a julho: de março a maio em Santa
Catarina, de abril a julho no Paraná e no Rio Grande do Sul. Quando plantado, a frutificação
inicia aos 4 anos de idade.
É uma espécie precursora e agressiva, invade os campos. Jamais se encontra no
interior da floresta, embora muitas vezes constitua a margem avançada dela. Apresenta
regeneração natural intensa fora da floresta primária. Forma povoamentos puros, conhecidos
por timbozais. Em muitas regiões do Rio Grande do Sul e de Santa Catarina é considerada
uma planta daninha, tal é seu vigor reprodutivo e vegetativo (CARVALHO, 1994).
3.4 Produtos naturais
Desde o quarto século A.C. existem relatos de normas para a coleta de plantas
medicinais. Os carrascos gregos, por exemplo, coletavam suas amostras do veneno cicuta
(Conium maculatum) pela manhã, quando os níveis de coniína são maiores (GOBBO-NETO e
LOPES, 2007). No Brasil os primeiros médicos portugueses, diante da escassez de remédios
vindos da Europa, foram obrigados a perceber a importância dos remédios indígenas. A vinda
da corte real para o Brasil em 1808 e o Decreto de D. João VI abrindo os portos brasileiros às
nações amigas pode ser considerado um dos primeiros marcos históricos da ciência brasileira,
porque foi a partir deste decreto que começaram a chegar ao país as primeiras expedições,

9
científicas cujo objetivo principal era dar conhecimento aos europeus da exuberância da nossa
fauna e de nossa flora (PINTO et al., 2002).
A natureza, de forma geral, tem produzido a maioria das substancias orgânicas
conhecidas. Dentre os diversos reinos da natureza, o reino vegetal é o que tem contribuído de
forma mais significativa para o fornecimento de metabólitos secundários, muitos destes de
grande valor agregado devido às suas aplicações como medicamentos, cosméticos, alimentos
e agroquímicos (PINTO et al., 2002; ARAÚJO, 2009).
As plantas possuem suas próprias defesas que as protegem de outras plantas, insetos
fitófagos e herbívoros predadores de uma maneira geral. Estas defesas são de natureza
química e, normalmente, envolvem substâncias do metabolismo secundário, as quais podem
ser chamadas de fitotoxinas ou aleloquímicos. Esse fenômeno é conhecido como alelopatia.
Os metabólitos secundários são produzidos e estocados nas folhas, caules, raízes, flores e
sementes. Muitos deles têm papéis vitais como mediadores em interações ecológicas com a
função na sobrevivência de organismos particulares, aumentando a competitividade destes em
ambiente hostil (MALHEIROS e PERES, 2001; PINTO et al., 2002). Variações temporais e
espaciais no conteúdo total, bem como as proporções relativas dos metabólitos secundários
em plantas ocorrem em diferentes níveis (sazonais e diárias; intraplanta, inter e intraespecífica)
e, apesar da existência de um controle genético, a expressão pode sofrer
modificações resultantes da interação de processos bioquímicos, fisiológicos, ecológicos e
evolutivos. Representam uma interface química entre as plantas e o ambiente circundante,
portanto, sua síntese é frequentemente afetada por condições ambientais. Os principais fatores
que podem coordenar ou alterar a taxa de produção de metabólitos secundários são:
sazonalidade, temperatura, disponibilidade hídrica, radiação ultravioleta, nutrientes, altitude,
poluição atmosférica, indução por estímulos mecânicos ou ataque de patógenos. Por exemplo,
uma espécie de Asteraceae, Chrysonthamus nauseasus, rica em terpenos possui a maior
concentração destes, 80 µg g -1 , em peso seco, no verão quando sofre ataque de insetos
herbívoros. No inverno tais níveis caem para 18 µg/g quando a planta tem suas folhas
devoradas por outros animais. (VIEGAS JÚNIOR, 2003; GOBBO-NETO e LOPES, 2007).
Brunherotto e Vendramim (2001) verificaram que apesar da variação do efeito dos extratos de
folhas, ramos e frutos de M. azedarach sobre T. absoluta, todos afetaram negativamente o
desenvolvimento do inseto, sugerindo que os ingredientes ativos estão presentes nas diversas
estruturas da planta, embora em concentrações variáveis.
Em uma alternativa de produção de alimentos, tal como se concebe a agricultura
sustentável, busca-se mobilizar harmoniosamente todos os recursos disponíveis na unidade de

10
produção de forma a reduzir o impacto ambiental e a poluição, a minimizar a dependência
externa das matérias primas, a atingir a otimização do balanço energético da produção e a
produzir alimentos baratos e de alta qualidade biológica para suprir necessidades internas e
gerar excedentes exportáveis. O emprego de substâncias extraídas de plantas silvestres, na
qualidade de inseticidas, tem inúmeras vantagens quando comparados aos efeitos dos
sintéticos. Os inseticidas naturais são obtidos de recursos renováveis e são rapidamente
biodegradados; o desenvolvimento de resistência dos insetos a essas substâncias compostas da
associação de vários princípios ativos é um processo lento, e são de fácil acesso aos
agricultores. É, portanto, aconselhável a produção de alimentos em sistemas orgânicos,
quando da implantação de programas de agricultura sustentável e de desenvolvimento local
(ROEL, 2001). Por outro lado, muitos produtos naturais são caros para serem considerados
seriamente como agroquímicos, e necessitam de legislação que exija o mesmo nível de
segurança como as existentes para os produtos sintéticos, pois muitos dos compostos mais
tóxicos ao homem são naturais (ex., aflatoxina, fumonisina, ricina) (DUKE, 2002).
3.4.1 Biossíntese dos produtos naturais
Os produtos naturais são divididos em dois grupos: metabólitos primários e
metabólitos secundários. Os metabólitos primários são produtos do metabolismo geral,
amplamente distribuídos em plantas e microorganismos. Podem-se citar aminoácidos,
proteínas, monossacarídeos, nucleotídeos, ácidos carboxílicos do ciclo do ácido cítrico,
lipídios, glicerídeos, etc. Os metabólitos secundários são produtos do metabolismo especial,
biossintetizados a partir do metabolismo primário, com distribuição restrita em certas plantas
e microorganismos. Grande parte dos princípios ativos responsáveis pela atividade de uma
planta encontra-se entre os metabólitos secundários, ou produtos naturais que englobam as
seguintes classes de compostos: terpenos, alcalóides glicosídios, flavonóides,
oligossacarídeos, cumarinas, esteróis e outros (SIMÕES et al., 2000).
A origem de todos os metabólitos secundários pode ser resumida a partir do
metabolismo da glicose (Figura 1), via dois intermediários principais, o ácido chiquímico e o
acetato. Este, fornece as unidades acetila que compõem o intermediário reativo, a acetiltiocoenzima
A (acetil-CoA), o verdadeiro precursor de vários grupos de substâncias, tais como
os aminoácidos alifáticos (e os alcalóides deles derivados), terpenóides, esteróis, ácidos
graxos e triglicerídeos (SIMÕES et al., 2000).

11
Glicose
Polissararídeos
Heterosídeos
Ácido chiquímico
Acetil-CoA
Ciclo do
ácido
cítrico
Via mevalonato
isoprenóides
terpenóides e
esteróis
Figura 1 - Ciclo da biossíntese dos metabólitos secundários (SIMÕES et al., 2000).
A descoberta do ácido mevalônico, que se forma durante o processo de fermentação da
cerveja e que é capaz de permitir o crescimento bacteriano, dependente de acetato, mesmo
quando este não está presente, permitiu elucidar a biossíntese do ácido mevalônico e os
mecanismos de conversão destes nas unidades em C5 e, portanto, precursores de todos os
isoprenóides. (ARAÚJO, 2009).
O mevalonato é formado da condensação de uma unidade da acetoacetil-CoA com
uma molécula de acetil-CoA. Após a condensação aldólica, ocorre uma hidrólise originando a
3-hidróxi-3-metilglutaril-CoA que é reduzida a mevalonato, numa reação irreversível. O
mevalonato é então convertido em isopentenil-pirofostato, ou isopreno ativo, a unidade básica
na formação dos terpenos e esteróides. A polimerização do mevalonato vai originar moléculas
de cadeias carbonadas crescentes de cinco em cinco átomos de carbono, denominada
isopreno. Terpenóides, terpenos ou isoprenóides são termos que indicam que estes compostos
são derivados do isopreno, cuja regra indica que os membros desta família são constituídos
por unidades de cinco átomos de carbono com estrutura do isopreno ligadas entre si pela
ordem cabeçacauda (SIMÕES et al., 2000). O isopreno não está envolvido diretamente na
formação dos produtos pertencentes a estas classes. As unidades bioquimicamente ativas de
isopreno são o dimetil pirofosfato (DMAPP) e o isoprenil pirofosfato (IPP) (Figura 2). Na
adição de uma unidade do DMAPP ao carbono ativo C 5 do IPP, é gerado o isômero geranil
pirofosfato. A condensação de duas unidades de IPP ou GPP gera os triterpenos (C 30 ) e os

12
tetraterpenos (C 40 ), respectivamente (YUNES e CECHINEL FILHO, 2007). São conhecidos
cerca de 30.000 terpenos e são classificados com o número de unidades de isopreno em:
hemiterpenóides, C 5 ; monoterpenóides, C 10 , sesquiterpenóides C 15 ; diterpenóides, C 20 ;
triterpenóides, C 30 e tetraterpenóides C 40 (DUBEY apud, YUNES e CECHINEL FILHO,
2007; ARAÚJO, 2009).
IP DMAPP IPP
H
OPP
OPP
Figura 2 - Estrutura dos terpenos IP, DMAPP e IPP (YUNES e CECHINEL FILHO,
2007).
Yunes e Cechinel Filho (2007), citam a ocorrência de outra via para a biossíntese dos
terpenos, a não mevalonato. A via mevalonato opera no citoplasma e mitocôndrias
sintetizando esteróides e sesquiterpenos preferencialmente, a via não mevalonato opera no
plastídio sintetizando todas as outras classes de terpenos incluindo carotenóides e clorofila.
3.4.2 Produtos naturais com ação inseticida
Os terpenos abrangem uma grande variedade de substâncias de origem vegetal e sua
importância ecológica como defensivos de plantas está bem estabelecida. Os limonóides, ou
tetranortriterpenóides, são provavelmente, os maiores representantes da classe dos terpenos
com atividade inseticida representando o nível máximo na sequência de produção de
terpenóides. No nível inferior, os monoterpenos de estrutura relativamente simples como o
limonemo e mirceno desempenham um papel de proteção contra insetos em plantas que os
produzem. São conhecidos como meliacinas, devido ao seu sabor amargo e suas principais
fontes são espécies das famílias Meliaceae, Rutaceae, e Cneoraceae. Cerca de 100
triterpenóides têm sido identificados das sementes, madeira, cascas, folhas e frutos de
Azadirachta indica (Meliaceae) (VIEIRA e ANDREI, 1997; VIEGAS JUNIOR, 2003).
Estruturalmente os limonóides são derivados de triterpenos tetracíclicos dos tipos
eufol ou tirulacol por uma série de mudanças oxidativas acompanhadas de rearranjos
moleculares, que ao final dá origem aos tetranortriterpenóides pela perda de quatro átomos de
carbono do precursor original. São classificados como tetranortriterpenóides com base na

13
oxidação de quatro anéis designados como A, B, C e D nos núcleos triterpênicos (TAYLOR,
1984; KAUR e ARORA, 2009). Segundo Vieira e Andrei (1997), esta rota biossintética
envolve vários passos, levando às mais variadas estruturas, mas que quase invariavelmente
contém 26 átomos de carbonos no seu esqueleto central (Figura 3).
HO
HO
Butirospermol
Eufano/Tirucalano
Rearrango apoeufol ou
apotirucalol
O
HO
OH
HO
O
HO
OH
Tetranortriterpenóide
(Limonóide)
Figura 3 - Rota biogenética para formação dos limonóides (VIEIRA e ANDREI, 1997).
Uma das substâncias de origem vegetal mais promissora com atividade inseticida é a
azadiractina, extraída das plantas do neem (Azadirachta indica) e do cinamomo (Melia
azedarach), ambas da família Meliaceae. Extratos de neem e cinamomo contém cerca de
quatro compostos ativos, dos quais, azadiractina, salanina, meliantriol e nimbim são os
principais, além de possuírem comprovada ação inseticida (VIEGAS JUNIOR, 2003).
A planta A. indica, de origem asiática, é considerada a mais importante planta
inseticida em todo o mundo, sendo que a sua atividade já foi referida para mais de 400

14
espécies de insetos, das quais, mais de 100 ocorrem no Brasil (BRUNHEROTTTO e
VENDRAMIM, 2001). Durante séculos foi utilizada na Índia no combate a insetos e,
atualmente, são extraídos e comercializados compostos químicos ativos sobre mais de 200
espécies de insetos, incluindo alguns moluscos. O trabalho pioneiro de Butterworth e Morgan,
em 1968, no isolamento pela primeira vez da azadiractina, foi motivado por relatos de que o
meliantriol, isolado das frutas frescas e do óleo de M. azedarach era fagoinibidor de
gafanhotos no deserto. A substância inibidora denominada de azadiractina, não se relacionava
ao meliantriol e era dotada de notável atividade fagorrepelente (VIEGAS JUNIOR, 2003).
A azadiractina é um triterpeno que causa distúrbios fisiológicos, alterando o
desenvolvimento e a funcionalidade de várias espécies de insetos praga, principalmente
devido à ação de repelência alimentar, inibidora de desenvolvimento, crescimento e na
reprodução (SALLES e RECK, 1999). Também atua interferindo no funcionamento das
glândulas endócrinas que controlam a metamorfose em insetos, impedindo o desenvolvimento
da fase larval. Este efeito ocorre em doses tão baixas como 50 ppb (MAIRESSE, 2005) e é
devido à interferência na regulação neuroendócrina de hormônios nas larvas (VIEGAS
JUNIOR, 2003). Esta substância possui o anel C-seco e tem sua ocorrência restrita às três
espécies, A. indica, Melia toosendan, e Melia azedarach.
Os limonóides apresentam grande diversidade estrutural, com anéis B-, A-, A, B e C-
seco (CHAMPAGNE et al., apud VIVAN, 2005). Alguns estudos tentando estabelecer a
relação estrutura-atividade permitiram concluir que limonóides com o anel C-seco são os mais
ativos, e uma das ações mais relevantes relatadas para plantas da família Meliaceae é a
supressora de apetite (CHAMPAGNE et al., apud VIEGAS JUNIOR, 2003).
Mordue e Nisbet (apud COSTA et al., 2004), consideram os efeitos fisiológicos dos
extratos de A. indica muito mais consistentes que os efeitos de inibição alimentar. Os efeitos
fisiológicos causam interferência no crescimento e processos de metamorfose dos insetos,
além de prejudicar a reprodução e outros processos celulares. Classificam os efeitos
fisiológicos em indiretos, que são decorrentes da interferência hormonal do ingrediente ativo;
e diretos, quando há inibição da divisão celular e síntese de proteínas, com o inseticida
atuando diretamente sobre as células e os tecidos.
O cinamomo (Melia azedarach), que também pertencente à família Meliaceae, é
originário da Índia e da Pérsia. Foi introduzida no Brasil há séculos, sendo notável pela
extraordinária facilidade de adaptação e pela vigorosa expansão vegetativa. É uma planta
sensível à umidade excessiva, além disso, reproduz-se facilmente. (MURILO, 2002). Esta
planta é uma fonte de limonóides ou terpenos complexos, com maior concentração nos frutos

15
(GRZYBOWSKY, 2006). Um grande número de limonóides com ação fagoinibidora e outras
propriedades para o controle de insetos tem sido isolados de Melia azedarach e M.
toosendam. (FUKUIAMA et al., 2000; CARPINELLA et al., 2002). CARPINELLA et. al.
(2002), isolaram o limonóide meliartenina com forte ação fagoinibidora em testes com larvas
de Epilachna paenulata Germ. (Coleoptera: Coccinellidae) e Spodoptera eridania
(Lepidoptera: Noctuidae).
Dos extratos metanólicos dos frutos de M. azedarach (Meliaceae) foram isolados a 1-
cinamoil-melianolona que é estruturalmente semelhante à azadiractina e apresentou atividade
inseticida equivalente. Esta planta também é fonte das maliacarpinas que são inseticidas tão
potentes quanto a azadiractina (VIEGAS JUNIOR, 2003). Como agente antialimentar em
cinamomo Huang (apud MAIRESSE, 2005) isolou meliacarpina, seis trichilinas e três
azedaractinas, azedaractina a, 12-O-acetilazedaractina A e 12-O- acetilazedaractina B e
azedaractina C, diferente dos demais, por ter um oxigênio sem função no C-12. Meliacarpinas
identificadas como 1,3-dicinnamoyl-11-hydroxymeliacarpin, 1-cinnamoyl-3-methacrylyl-11-
hydroxymeliacarpin e 1-cinamoyl-3-acetyl-11-hydroxymeliacarpin foram relatadas como
principais constituintes inseticidas e reguladores (desruptores) do crescimento das folhas de
cinamomo. As propriedades inseticidas foram comprovadas em bioensaios com Spodoptera
litorallis e comparáveis com a azadiractina do nim. Além disso, possuem uma forte ação
contra a metamorfose em insetos (BOHNENSTENGEL et al., 1999).
O extrato etanólico dos frutos de Melia azedarach mostrou ação inibitória a fungos
nas concentrações de 50-300 mg mL -1 e fungicida de 60 – 500 mg mL -1 contra Aspergillus
flavus, Fusarium moniliforme, Microsporum canis e Candida albicans. O screening
fitoquímico foi positivo para flavonóides, lignanas, triterpenos e negativo para alcalóides
(CARPINELLA et al., 1998).
Mairesse (2005), visando avaliar o efeito do extrato de folhas do cinamomo, Melia
azedarach sobre o crescimento e desenvolvimento de Spodoptera frugiperda, testando doses
nas concentrações de 0,31 até 22.22% p/v concluiu que esta meliaceae contém componentes
extremamente tóxicos e antialimentares à Spodoptera frugifera, o que a torna mais promissora
que Azadirachta indica para a Região Sul do Brasil; pela maior disponibilidade de material
para preparação de extratos, pela maior adaptação dessa espécie e pela maior sustentabilidade
que significa a coleta de folhas sem comprometimento da planta.
Segundo Cruz (2005), o efeito da exposição de peixes à extratos aquosos de A. indica
foram a desorganização do arranjo cordonal dos hepatócitos, vacuolização citoplasmática e
necrose das células epiteliais de revestimento dos canalículos biliares. Avaliou também a

16
eficácia do inseticida paration metílico e do pesticida natural azadiractina contido no extrato
aquoso de folhas secas de neem no controle de Anacanthorus penilabiatus (Monogenea) em
pacu (Piaractus mesopotamicus). A eficácia do paration metílico foi maior com o aumento da
concentração e o tempo de exposição. Na concentração de 7 mg L -1 de paration metílico
ocorreu a maior eficácia de controle em todos os tempos de exposição. As maiores eficácias
ocorreram nos tempos de 16 e 24 horas de exposição com 96,2 e 97% de controle. Para o
extrato aquoso de folhas de neem a maior eficácia de controle (89,2%) foi com a concentração
de 2,9 mg L -1 , após 120 horas de exposição. A eficácia nos tratamentos com 1,47 mg/L foi de
83,9% de controle e com 1,18 mg/L, 85,5% após 120 h de exposição. O paration metílico
apresentou maior eficácia de controle do A. penilabiatus que o extrato aquoso do neem. O
tempo de exposição para se obter eficácia do extrato aquoso do neem foi de 120 horas, o que
pode inviabilizar a sua utilização em tratamentos terapêuticos.
Segundo Srivastava e Raidaza (apud CRUZ, 2005, p. 40), a azadiractina não
apresentou efeito embriofetotóxico e teratogênico em ratos, não produzindo efeito
morfológico, visceral e esquelético. Portanto, esses autores consideraram a azadiractina como
um biopesticida alternativo aos inseticidas sintéticos. Schmutterer (apud CRUZ, 2005, p. 40)
estimou a dose letal (DL 50 ) de 7.000 mg kg -1 para ratos, e não foi observada toxicidade aguda
oral para patos que ingeriram 5.000 a 8.750 mg kg -1 .
Segmentos de riachos foram tratados com extrato de neem para determinar os efeitos
sobre as comunidades de insetos aquáticos. Após nove dias de tratamento não houve diferença
significativa entre os controles e os segmentos de riachos tratados com extrato na
concentração de 0,9 mg L -1 . Entretanto, a estrutura das comunidades dos insetos aquáticos nos
riachos tratados na concentração de 3,0 mg L -1 diferiram significativamente dos controles
(KREUTZWEISER et al., 2000).
Aplicações aéreas sobre ambientes lênticos de um produto comercial à base de neem
resultando em concentrações na água de 5 a 10 µg L -1 causaram efeitos adversos
significativos sobre comunidades de crustáceos zooplanctonicos como redução do número de
copépodos adultos e redução da biomassa total do zooplâncton (KREUTZWEISER, et. al.,
2000),
Em um estudo que objetivou verificar a eficiência de extratos vegetais obtidos das
folhas de Allamanda cathartica, Ruta graveolens, Melia azedarach, Chysanthemum sp e
Ateleia glazioviana, o autor encontrou para A. cathartica a presença de alcalóides, cumarinas,
flavonóides, esteróis e triterpenos. Comparando extratos aquosos com hidroalcoólicos, os
maiores rendimentos em extratos aquosos foram obtidos com folhas de cinamomo e para os

17
extratos hidroalcoólicos com folhas de arruda. Tanto para R. graveolens e M. azedarach a
análise química foi positiva para alcalóides, flavonóides, esteróis e triterpenos (GRANDO,
2003). A análise cromatográfica em camada delgada (CCD) com Melia azedarach, para
diferentes classes de compostos em CCD, revelou a presença de alcalóides, flavonóides,
esteróis e triterpenos (KROMBAUER, 2001).
Os timbós verdadeiros (plantas do gênero Derris), originários da Amazônia Brasileira,
têm demonstrado importância crescente por produzirem uma classe de compostos
flavonóidicos relacionados à rotenona, e que possuem atividade tóxica para peixes e
mamíferos. Foi estudada a toxicidade, estabelecendo a dose letal 50% (DL 50 ) do extrato
alcoólico do pó de Derris sp. para três espécies de peixes filogeneticamente diferentes e um
mamífero. As DL 50 foram de 2,6 µg mL -1 para Colosoma macropomum, 4,8 µg mL -1 para
Oreochromis niloticus, 14,2 µg mL -1 para Plescostomus sp e DL 50 de 100,0 mg kg -1 para
Rattus norvegicus. Denotam acentuadas diferenças entre os valores de DL 50 , principalmente
entre os peixes e o rato. Isto provavelmente é devido a fatores toxicocinéticos que se
relacionam com as diferentes barreiras teciduais encontradas pelos rotenóides quando
administrados pela via oral em mamíferos (MASCARO et. al., 1998).
As folhas do timbó (Ateleia glazioviana Baill.) são conhecidas na região Oeste de
Santa Catarina como potencialmente tóxicas a mamíferos ocasionando não raramente a morte
de bovinos após se alimentarem desta planta. Com atividade inseticida, o timbó possui o
flavonóide rutina (CANTARELLI et al., 2005). Em Santa Catarina é produzido
comercialmente um produto comercial à base de extratos das folhas do timbó. Este produto é
indicado para o controle de formigas cortadeiras, caseiras e cupins. Para as formigas
cortadeiras é indicado o uso de 15 g em formigueiros de 70 cm de diâmetro, em áreas
infestadas é recomendado o uso de 10g a cada 5 m 2 (CITROMAX, 2008). Este extrato
comercial foi avaliado como formicida em diferentes doses no controle de Acromyrmex lundi,
formiga cortadeira, em campos nativos no Rio Grande do Sul. As doses testadas de 5, 10 e
15g deste extrato comercial apresentou ação de choque, havendo alto percentual de controle
nos primeiros cinco dias. O controle de A. lundi foi eficiente em todas as doses testadas,
obtendo-se um percentual de controle superior a 85%, não havendo diferença no tamanho do
formigueiro no percentual de controle (CANTARELLI et al., 2005)
Analisando as folhas de timbó (Ateleia glazioviana Baill.) através de cromatografia
gasosa e cromatografia de camada delgada (CCD), as análises demonstraram a presença de
esteróides, terpenos, cumarinas, alcalóides e flavonóides (VIEIRA, 2000).

18
3.4.3 Uso de produtos naturais na aquicultura
Os produtos naturais começam chamar a atenção para uso em aquicultura em
substituição a produtos sintéticos no controle de pragas e doenças abrindo novas fronteiras de
estudo em graves problemas enfrentados por esta atividade. São ricos em uma grande
variedade de nutrientes e um repositório de novos aditivos para alimentação de animais
aquáticos. Podem ser utilizados como atrativos, para aumentar a digestibilidade dos
nutrientes, melhorar a conversão alimentar, incrementar o ganho de peso e no controle de
parasitoses (XIANG e ZHOU, 2000).
Ardó et al. (2008), após estudar o efeito dos extratos de Astragalus membranacea e
Loricera japônica incorporada na ração para alimentação de tilápias infectadas com
Aeromonas hydrophila, concluiu que agiram como imunoestimulantes, aumentado a resposta
imune das tilápias em cultivo. Abutbul et al. (2005), identificaram extratos aquosos de plantas
do deserto com atividades antibacterianas sobre patógenos de peixes como Aeromonas
hydrophila, Photobacterium damselae subsp. piscicida, Streptococcus iniae e Vibrio
alginolyticus.
Um dos sérios problemas enfrentado pela piscicultura no mundo inteiro é o gosto de
barro na carne dos peixes cultivados oriundo dos compostos metabólicos, 2-metilisoborneol e
geosmina excretados pelas cianofíceas. Para melhorar a qualidade da água em substituição à
algicidas à base de cobre, os quais não são seletivos e matam outros organismos presentes no
plâncton como as algas verdes (Clorophyta), compostos naturais como a antraquinona foram
identificados como algicidas seletivos no controle do desenvolvimento excessivo de
cianofíceas que causam severas perdas econômicas na produção do catfish Ictalurus punctatus
nos Estados Unidos. (DUKE, 2002).
Pereira et al. (2008), verificou a eficácia do extrato aquoso de folhas de Terminalia
catappa no controle de monogenéticos em apaiari, Astronotus ocellatus. Constatou ausência
de parasitos nos grupos tratados com 50, 75, e 100 ml L -1 deste extrato e infestação muito alta
de parasitos no grupo controle.
Balasubramanian et al. (2007), estudaram a atividade antiviral dos extratos de 20
plantas medicinais contra o vírus da mancha branca no camarão Peneaeus monodon. Das
plantas testadas cinco extratos mostraram atividade antiviral, Aegle marmelos, Cynodon
dactylon, Lantana camara, Momordica charantia e Phyllanthus amarus quando aplicados
através de injeção intramuscular contendo uma suspensão com os vírus e os extratos. O
extrato aquoso de C. dactylon foi o antiviral mais potente, não houve mortalidades e não foi
detectado o vírus a uma concentração de 100 mg kg -1 de peso vivo animal. Enquanto que o

19
extrato metanólico de M. chariantia mostrou atividade antiviral significativa a uma
concentração de 150 mg kg -1 de peso vivo animal. Devido à inviabilidade de se utilizar os
extratos em produções de larga escala com injeções intramusculares foi estudada a ação do
extrato de Cynodon dactylon via oral. Extratos desta planta foram incorporados na ração, nas
concentrações de 1 e 2% em uma fazenda de produção em escala de Penaeus monodon. Na
concentração de 1% houve 40% de mortalidade e na concentração de 2% não houve
mortalidade e detecção do vírus, mostrando-se com forte atividade antiviral.
(BALASUBRAMANIAN et al., 2008).
Os estudos citados abrem um extenso campo de estudo fitoquímico na identificação
dos grupos químicos, identificação e isolamento das moléculas biologicamente ativas para uso
na aquicultura.
3.5 Inseticidas sintéticos e seu uso em aquicultura
No Brasil, a maioria dos produtos utilizados como quimioterápicos na aquicultura são
de uso agrícola ou veterinário. Como não foram desenvolvidos para uso no ambiente aquático
pode-se supor que estas práticas são bastante imprevisíveis do ponto de vista dos destinos e
efeitos dos compostos. Mesmo assim, alguns inseticidas e acaricidas vêm sendo utilizados
pelos produtores brasileiros devido à eficiência e relativa simplicidade operacional. Apesar de
alertar para os riscos, a maioria das publicações nacionais sobre piscicultura trazem
indicações de qual o melhor produto, dose e duração do tratamento para eliminação das
pragas estabelecidas nos cultivos. (SANTOS, 2007).
Os agrotóxicos, presentes no meio aquático, podem atingir o homem pela ingestão de
água e de alimentos contaminados, como os peixes. Os peixes entram em contato direto com
os agrotóxicos, principalmente pela via dérmica, superfície externa do corpo com suas
inúmeras estruturas sensoriais, brânquias, oral e em todo o trato gastrintestinal
(MATAQUEIRO, 2002).
A aplicação destes praguicidas pode resultar em altos níveis de resíduos nos peixes,
inclusive no momento do consumo, pois normalmente os períodos de carência não são
respeitados pelos piscicultores (RODRIGUES et al., 1997). Os inseticidas organofosforados
podem causar ainda efeitos tóxicos subagudos nos peixes, notadamente na morfologia e
fisiologia dos animais (CRUZ, 2005).
Os organofosforados são um grupo de compostos que historicamente têm sido
utilizados como pesticidas. Estes compostos são potentes inibidores de acetilcolinoesterase
tendo um profundo efeito no sistema nervoso dos organismos expostos. A ação inseticida

20
destes compostos foi primeiramente observada durante a segunda guerra mundial no
desenvolvimento de gases tóxicos. Pertencem a este grupo químico inseticidas como
malation, diclorvos, paration e metil paration entre outros. São liposolúveis com capacidade
de penetrar nos mais diversos tecidos, como na pele e da placenta para o feto. O metil paration
(MP) (Figura 4) foi registrado nos EUA em 1954, e em 1978 teve seu uso restrito devido à
confirmação de efeitos tóxicos sobre trabalhadores. (EDWARSDS e THOUNWOU, 2005).
S O CH 3
O 2
N
O
P
O CH 3
Figura 4 - Fórmula estrutural do metil paration: C 8 H 10 NO 5 PS.
IUPAC: O, O-dimetil O-4-nitrofenil fosforotioato
O MP está registrado no Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento
(MAPA) como acaricida/inseticida com uso permitido nas culturas do algodão, alho, batata,
cebola, feijão, milho, soja e trigo, com um intervalo de segurança de 15 dias (MAPA, 2009).
Está incluído na lista de substâncias perigosas da convenção de Roterdã devido a alta
toxicidade aguda, neurotoxicidade, suspeita de desregulação endócrina, mutagenicidade e
carcinogenicidade (ANVISA, 2008). São transportados no meio ambiente de várias formas.
Quando aplicado como inseticida, o MP é rapidamente degradado por fotólise, hidrólise com
pH >7 e biodegradação por microorganismos no sedimento e na água. A solubilidade na água
é de 50 mg L -1 , podendo ser facilmente transportado pela chuva e vento para áreas
circundantes. Estudos sobre a degradação do MP indicaram que a meia vida em água doce foi
de 25,6 e 24,6 dias para rios e lagos respectivamente; em solo arenoso de 11,2 dias e argiloso
de 5,6 dias (EDWARSDS e THOUNWOU, 2005). O MP é moderadamente tóxico aos peixes
e animais que se alimentam de peixes Os valores de DL 50 (96 h) vão de 1,9 a 8,9 mg L -1 em
salmão, trutas, goldfish, carpa, minnow, black bullhead, catfish, perca e bluegill (NATIONAL
LIBRARY OF MEDICINE apud SANTOS, 2007).
Em aquacultura, os organofosforados destacam-se com amplo espectro de aplicações,
de um modo geral para o controle de ectoparasitoses, odonatas, copépodos, monogenéticos,
trematodos, remoção de miscidáceos em viveiros de camarão entre outros usos. Seu uso é
bastante controvertido devido a sua toxicidade às espécies não alvo (WESTON, 1996). São
utilizados em diversas oportunidades e etapas do processo para controlar larvas de odonatas,

21
que é o principal inseto predador de peixes. Na prática de alevinagem em áreas tropicais e
subtropicais, devido às condições ecológicas, há favorecimento do desenvolvimento
temporário das larvas destes insetos, que causam grande predação e mortalidade de alevinos.
O metil paration destaca-se como o inseticida mais empregado na piscicultura para prevenir
perdas de alevinos pela predação por estas larvas e chironomideos (FIGUEIREDO e
SENHORINI, 1990).
Os organofosforados atuam inibindo a ação da enzima acetil colinesterase, formando
um complexo estável no sítio esterásico da enzima, impedindo a reação da acetilcolina com
este sítio (CRUZ, 2005). Os órgãos de peixes mais afetados pelos agentes químicos são as
brânquias e a pele, pois exibem grande superfície de contato e ambos apresentam células de
muco, que possuem papel importante na resistência aos patógenos e as substâncias tóxicas A
seguir, os agentes químicos têm atuação sobre o fígado, que tem papel fundamental no
metabolismo das substâncias tóxicas e sobre o rim, que atua na manutenção da estabilidade
interna e na excreção. Rodrigues et al. (1997), registrou alterações agudas no baço de juvenis
de Prochilodus scrofa quando expostos ao organofosforado Dipterex 500 (Trichlorfon) na
concentração de 0,2 µg L -1 .
Boyd e Massaut (1999) listaram as principais substâncias utilizadas na aquicultura que
podem oferecer perigo, como por exemplo: fertilizantes, materiais alcalinos, oxidantes,
coagulantes, osmorreguladores, algicidas, herbicidas, pesticidas, probióticos e metais pesados.
Os riscos foram atribuídos através de exames das propriedades das substâncias, de
informações sobre a segurança dos produtos oferecidos pelos fabricantes e do conhecimento
dos efeitos dos nutrientes e de outros poluentes aquáticos. Determinaram o grau de risco de
contaminação: grau zero (não estabelece riscos associados); grau um (substâncias com leves
riscos à segurança com base nas propriedades dos compostos ou do uso em outras áreas); grau
dois (experiência demonstra nível moderado de preocupações); e grau três (substâncias que já
causaram danos sérios no passado). Os inseticidas e pesticidas foram classificados como risco
ambiental (RA) de bioacumulação, grau 3, risco humano (RH) como perigo tóxico de grau 2 e
perigo alimentar (PA) de bioacumulação de grau 3. Alertam desta forma para os riscos
associados ao uso de produtos químicos nos tanques de cultivo, indicando que diversos
compostos empregados, sobretudo os praguicidas e bactericidas, podem ter ação
bioacumulativa e representar risco de segurança alimentar. Alem disso deve-se considerar a
ação destes compostos a organismos não alvo, que podem, além de interferir na comunidade
biológica dos tanques, representar riscos às comunidades selvagens estabelecidas nos
ecossistemas que receberão estes efluentes.

22
Um dos primeiros trabalhos que avaliaram o uso de inseticidas organofosforados no
combate às odonatas e na seleção zooplanctonica em piscicultura foi realizado por Garadi, et.
al., 1988. Neste, foram analisados quatro produtos químicos: Dipterex 50 - Trichlorfon 500 g
L -1 (dimethyl 2,2,2-thrichloro-1-hydroxyethyl-phosphonate), inseticida e larvicida, utilizado
para seleção de zooplâncton, cuja função em piscicultura é combater os cladóceros e os
copépodos; Folidol emulsão 60%, - Paration Metílico 600 g L -1 (O, O-dimetil O-4-nitrofenil
fosforotioato), inseticida e acaricida, também usado em piscicultura para a mesma finalidade;
Dimegron 50 – Phoshamidon 500 g L -1 (fosfato de dimetila 2-cloro-2-dietilcarbamoil-1-
metila-vinila) inseticida sistêmico e Kelthane CE - Dicofol (1,1-bis (clorofenil)-2,2,-
tricloroetanol). As conclusões e recomendações deste trabalho são as seguintes: o inseticida
Dipterex 50 seleciona o zooplâncton e elimina as odonatas a 1,0 ppm eliminando os
copépodos e cladóceros, mas com sobrevivência dos rotíferos, que é o alimento indispensável
às pós-larvas na primeira semana de estocagem. Para carpa comum pode-se colocá-lo antes ou
depois da estocagem das larvas, já para os peixes nativos, curimatã e tambaqui, pode-se
adubar e colocar o inseticida cinco a seis dias antes da estocagem, pois estes são sensíveis ao
inseticida e, caso se adicione durante o cultivo de alevinagem eles morrem; o Folidol
(paration metílico) elimina as odonatas, mas não seleciona o zooplâncton. As larvas das
odonatas morrem na concentração de 0,5 ppm Pode-se aplicá-lo tanto para carpa comum
como para os peixes nativos, após a estocagem, bem como para o tambaqui. Os outros
inseticidas Dimecron – 50 e Kelthane – CE, não foram eficientes nem para a seleção do
zooplâncton nem para a eliminação das odonatas, sendo considerados antieconômicos e
inviáveis para estas finalidades.
Em pesquisa os organofosforados são estudados com objetivo de avaliação do risco
ambiental, e na determinação de doses seguras para o controle de parasitoses em piscicultura
(COLARES e NASCIMENTO, 1988; GARADI et al., 1988; ALCÂNTRARA et. al., 1994;
TAMASSIA, 1996; GUIMARÃES, 2000; ONAKA, 2001; CRUZ el al., 2004), como por
exemplo no controle de tricodiniose, dactilogiridose e doenças causadas por crustáceos em
peixes (ALEXANDRINO DE PEREZ, apud MATAQUEIRO, 2002). Um dos manuais da
FAO para o cultivo de carpas adotado pelos principais órgãos de fomento do país traz a
recomendação de uso de organofosforados para o controle de predadores durante a
alevinagem (WOYNAROVICH e HORVÁTH, 1981).
As formas mais comuns de indicação do uso de organofosforados na piscicultura são
as seguintes: banhos rápidos, com a exposição dos peixes à elevada concentração do
xenobiótico por curto período; banhos prolongados, com baixa concentração por períodos

23
mais longos e, finalmente, tratamento por tempo indefinido, durante os quais os peixes são
expostos a baixas concentrações do xenobiótico por tempo indeterminado. Estes
procedimentos, são empregados em viveiros de maior área, escavados em terra e sem
qualquer revestimento, muito comuns entre os piscicultores. Os tratamentos mediante banhos
com produtos organofosforados resultam na liberação de material tóxico aos ecossistemas
(LOPES et al., 1999; MATAQUEIRO, 2002).
Pavanelli (1998), lista os produtos utilizados para banhos nos próprios tanques de
criação para o controle de monogenéticos, ergasilídeos, lerneose e aeglídeos, entre eles, o uso
de triclorfon na concentração de 25 g L -1 na água recomendando fazer 4 aplicações de 5 a 10
minutos durante uma semana, outras dosagens podem ser aplicadas de acordo com a
posologia prescrita pelos fabricantes. Alerta que este produto não pode ser aplicado em
temperaturas superiores a 32 ºC e não deve ser usado em peixes utilizados para o consumo
humano.
Pesquisa realizada com 89 proprietários de pisciculturas em pesqueiros na bacia
hidrográfica do Mogi-Guaçu revelou que 77,4% das propriedades executam práticas de
manejo que requerem o uso de substâncias químicas. Dos 84 questionários respondidos, 33
confirmam o uso de praguicidas no tratamento de enfermidades ou predadores. O praguicida
mais utilizado foi o dimilin (diflubenzuron) em 23 empreendimentos, e o segundo foi o
folidol (paration metílico) em três empreendimentos e com uma concentração de 0,4 g m -3 na
água dos viveiros (SANTOS, 2007).
Em sua tese de doutorado sobre o destino e efeito após aplicações de praguicidas em
tanques experimentais e nas pisciculturas e pesqueiros da bacia do rio Mogi-Guaçu, Santos,
(2007) concluiu que o uso de pesticidas nas atividades aquícolas tem sido uma prática comum
nos últimos anos e que os principais ingredientes e concentrações empregadas podem trazer
graves consequências para o meio ambiente e para os consumidores. Salientou que houve
acumulo de diflubenzuron e de paration metílico nos peixes submetidos aos tratamentos com
Dimilin e Folisuper, respectivamente, sendo que em todos os tempos amostrados os valores
excederam o limite máximo recomendado para alimentos, segundo o Codex Alimentarius
(SANTOS, 2007).
Através de testes de avaliação da toxicidade aguda do metil paration para alevinos de
pacu em água mole e água do ambiente natural, Mataqueiro, 2002, encontrou os valores de
Cl 50 de 4,06 e 5,15 mg L -1 respectivamente.
Rao e Rao (1981) investigaram os efeitos do paration metílico na síntese de derivados
lipídicos, em diferentes tecidos de peixes (músculo, brânquia, fígado e cérebro). As análises

24
quantitativas registraram decréscimo de lipídios totais e fosfolipídios, e acréscimo de ácidos
graxos livres em peixes expostos a 0,09 ppm, por 48 h (dose subletal). Os autores sugerem
com estes resultados que houve maior requisição de energia pelos peixes nesta condição.
O Conselho Nacional do Meio Ambiente (CONAMA 357) estabelece como parâmetro
para compostos orgânicos em corpos de águas de Classe I tanto para água doce como salobra
a concentração de 0,04 µ L -1 e para classe III de água doce 35,0 µ L -1 de paration.
“Considerando as concentrações citadas para uso do paration metílico em piscicultura
equilave a dizer que são 12.500 vezes superiores à concentração máxima permitida pelo
CONAMA 357 para águas de classe I”.
3.6 Ordem Odonata
3.6.1 Distribuição e diversidade das odonatas em água doce
As Odonatas são um grupo de insetos relativamente pequenos, com 5.600 espécies no
mundo, sendo 2.586 pertencentes à subordem Zygoptera e 2.812 à subordem Anisoptera.
Devido ao seu tamanho, cor e o comportamento diurno, tornaram-se popular para
entomologistas profissionais e amadores. Na atualidade os padrões de diversidade são
diretamente influenciados pela variação da temperatura, onde se observa um rápido aumento
de diversidade dos pólos ao equador, mas com redução em áreas com baixa precipitação. As
regiões biogeográficas com maior número de espécies são a Oriental, Neotropical,
Afrotropical e Australiana com 1.665, 1.636, 889, e 870 espécies, respectivamente. A alta
diversidade das odonatas em regiões tropicais pode ser explicado parcialmente pela
ocorrência de uma grande quantidade de ambientes aquáticos. Na região neotropical,
compreendendo América do Sul e Central estima-se a ocorrência de 21 famílias, 186 gêneros
e 1636 espécies. As famílias com maior número de espécies são as Coenagrionidae,
Libellulidae, Gomphidae e Aeshnidae com 370, 352, 273 e 127 espécies, respectivamente. As
espécies não descritas são estimadas em torno de 400 a 500 nesta região biogeográfica. A
mata atlântica e a bacia do rio Paraná estão entre as regiões da América do Sul de maior
diversidade de odonatas (KALMAN, 2008). De Marco e Vianna (2005) realizaram um estudo
sobre o estado de conhecimento e da distribuição da riqueza de espécies que possam indicar
quais são as áreas prioritárias para estudos de levantamento. Os resultados do estudo somam
14 famílias, 102 gêneros e 514 espécies. Discutem a escassez de dados de diversidade, pois os
6.203 registros do Brasil estão distribuídos em apenas 29% do território nacional. As riquezas
de espécies e de gêneros se concentram principalmente nas regiões dos estados do Rio de

25
Janeiro, Minas Gerais e São Paulo, na calha do rio Amazonas e em alguns pontos isolados em
Cuiabá.
Costa et al. (2000), realizaram levantamento da diversidade e distribuição dos
odonatas (INSECTA) no Estado de São Paulo com base em acervos, coleções particulares e
bibliográficas. Foram encontradas 12 famílias, 78 gêneros, 251 espécies registradas, 116 das
quais possuem larvas conhecidas e 16 espécies novas a serem descritas. Da família
Colopterigydae dois gêneros foram registrados no Estado de São Paulo, Hataerina Hagen,
1953 e Mnesarete Cowley, 1934.
3.6.2 Características e reprodução
As Odonatas são popularmente conhecidos como libélulas, lavabunda, lavadeira,
cavalo de judeu, zig zag, jacinta entre outros. São hemimetábolos com adultos terrestres,
aéreos e larvas aquáticas. Pertencentes à ordem Odonata são divididos em três subordens:
Anisozygoptera (restrita à região asiática), Anisoptera e Zygoptera. Os adultos de Anisóptera
pousam com as asas abertas e possuem as bases das asas anteriores e posteriores diferentes e
os da subordem Zygoptera as bases das asas são semelhantes e pousam com as asas fechadas
sobre o dorso (SOUZA et al., 2007).
São insetos que apresentam a cabeça grande e muito móvel; aparelho bucal
mastigador, com poderosas mandíbulas; antenas curtas, pouco perceptíveis à vista desarmada;
pernas não alongadas; asas membranosas, compridas e rígidas, com grande número de
nervuras longitudinais e transversais; as asas não se cruzam sobre o corpo, pois estão sempre
distendidas em sentido perpendicular aos lados deste, ou ao longo do abdômen, sem recobrilo;
abdômen alongado, cilíndrico, fino, sempre mais estreito que o tórax, com dez segmentos
distintos; às vezes extremamente longo, como nas espécies Mecistogaster, onde alcança mais
de 15 centímetros de comprimento (CARRERA, 1973; BUZZI 2002).
Ambos os sexos podem copular várias vezes ao dia. O macho antes da cópula transfere
o esperma através do orifício genital (gonósporo), situado no nono segmento, para os órgãos
copuladores, situados no lado ventral do segundo segmento abdominal, dobrando o abdômen
para baixo e para frente. Na cópula, durante o vôo em posição característica, a fêmea entra em
contato com o órgão copulador do macho realizando a fertilização dos ovos.
Em geral, há um dimorfismo sexual discreto e outras vezes aberrante, manifestado
geralmente nas cores das asas e do corpo. A maioria das espécies neotropicais têm asas
transparentes, mas algumas espécies apresentam manchas basais na asa posterior dos machos,
de cor amarela ou parda; alguns machos de Libellulidae possuem faixas negras transversais,

26
outros apresentam as asas anteriores iridescentes e as posteriores hialinas. Nos anisópteros os
dois sexos têm em geral cor semelhante. Nos zigópteros em grande parte das vezes os machos
são mais vivamente coloridos.
As posturas endofíticas ocorrem sobre a vegetação ou material orgânico e as exofíticas
diretamente na água. A postura na superfície da água é feita com o mergulho apenas da
extremidade apical do abdômen da libélula que, assim, em vôo rápido, larga a sua carga de
ovos. Estes se espalham na tona ou vão para o fundo; em algumas espécies, porém, os ovos se
aglutinam no meio de uma massa gelatinosa, que a fêmea deposita com a desova. Após duas
ou três semanas eclodem as larvas que continuam vivendo nas águas onde foi feita a postura
que podem ser águas lóticas ou lênticas. Nas águas lóticas elas podem se enterrar, viver sob
pedras ou entre detritos; as das águas lênticas vivem na periferia ou sobre algum substrato
(CARRERA, 1973; McCAFFERTY e PROVONSHA A.V., 1998; BUZZI, 2002).
3.6.3 Adaptação à vida aquática
As larvas, ou formas jovens também chamadas de náiades ou odonáiades são do tipo
campodeiforme, passam por 12 ou mais mudas e a maioria alcança a maturidade entre um e
três anos e são bem adaptadas ao meio aquático. As náiades da subordem Anisoptera respiram
o oxigênio misturado na água por meio de brânquias traqueais, situadas no intestino posterior;
a água , com a contração dos músculos abdominais da larva, é aspirada pela abertura anal e,
antes de ser expelida, passa pela cavidade respiratória, banhando as referidas brânquias. Estes
movimentos contínuos para suprimento de oxigênio podem expelir água pelo ânus com força
suficiente para movimentar a larva por propulsão. A área anal da larva é especializada e
adaptada para as funções de respiração e osmoregulação com a finalidade de trocas gasosas e
absorção de íons para manter o balanço iônico. Na câmara retal de algumas espécies se
desenvolve um euglenóide flagelado durante os meses de inverno, provendo uma fonte
adicional de oxigênio. (McCAFFERTY e PROVONSHA A.V., 1998).
As náiades da subordem Zigoptera também respiram o oxigênio dissolvido na água,
mas por folíolos caudais que funcionam como brânquias traqueais. Nestas libélulas é muito
provável seja a respiração cutânea mais importante que a realizada pelos folíolos caudais
(CARRERA, 1973; McCAFFERTY e PROVONSHA A.V.; 1998, BUZZI, 2002).
3.6.4 Alimentação e predação
A maioria dos adultos se alimentam de insetos capturados em pleno vôo, com auxílio
das pernas que ficam dispostas em cesto. Alguns pousam pra comer a presa, enquanto outros

27
o fazem em pleno vôo. As presas podem ser pequenos dípteros, mariposas, abelhas,
borboletas e outras libélulas (BUZZI, 2002).
O aparelho bucal das larvas é desenvolvido, tendo as suas peças forma característica,
principalmente a do lábio, que apresenta articulações especiais, permitindo distenção brusca
para a captura de larvas e ninfas de insetos aquáticos, que são prontamente devoradas.
Pequenos vertebrados, como larvas e alevinos de peixes, às vezes não escapam ao ataque
dessas larvas (CARRERA, 1973). Larvas maiores, como da família Aeshnidae, atacam às
vezes, girinos e pequenos peixes (BUZZI, 2002).
O padrão de comportamento predador demonstrado pelas larvas de libélula é similar a
uma variedade de animais incluindo certas aranhas, sapos e camaleões, os quais usam a
velocidade como principal armadilha para capturar suas presas. As larvas de libélula são,
entretanto, únicas, utilizam um lábio curiosamente modificado para agarrar suas presas.
Durante seu descanso o lábio alongado é dobrado abaixo da cabeça, mas pode ser projetado
com grande rapidez e a presa é capturada pela ação de uma pinça labial. Há dois padrões de
comportamento predador: as que se movem entre a vegetação aquática e utilizam seus grandes
olhos para detectar a presa à distância e, subsequentemente, orientá-la até ela; enquanto outras
larvas vivem no fundo dos lagos e detectam a maioria de suas presas por estímulo táctil.
Estudando o comportamento de caça de dez espécies de odonata da ordem Anisoptera através
de vários estímulos, o autor concluiu que o tamanho e movimento da presa são importantes no
seu reconhecimento, enquanto que o formato, cor e odor não são. A velocidade da projeção
para frente do lábio é na ordem de 15 a 20 milésimos de segundos, e no momento do ataque o
sifão anal é fechado para que a pressão sanguínea, a qual provém a força para a extensão do
lábio, seja toda direcionada para este fim (PRITCHARD, 1965).
Para a projeção do lábio modificado, tanto para defesa como para o ataque, as larvas
de libélula utilizam pressão hidráulica, tendo para isto duas vantagens: primeiro, um sistema
hidráulico pode ser uma fonte de força multifuncional e, em segundo lugar, economia de
energia para o sistema neuromuscular. A larva de libélula utiliza pressão hidráulica para os
movimentos de respiração, nos movimentos de locomoção por propulsão e na extensão do
lábio (TANAKA e HISADA, 1980).
A predação de alevinos por larvas de insetos da Ordem Odonata, Sub Ordem
Anisoptera, vulgarmente conhecidas por libélulas ou lavadeiras, podem acarretar perdas
econômicas significativas na piscicultura (PRITCHARD, 1965; TAVE et al., 1990;
ZANIBONI FILHO, 2000).

28
Por vários anos o controle destes insetos no Brasil vem sendo realizado por meio de
aplicação de inseticidas químicos do grupo dos organofosforados realizada diretamente na
água do tanque de criação. Embora eficiente este tipo de controle está proibido em vários
países por causar a contaminação da água e a morte de parte do zooplâncton necessária para a
alimentação das pós-larvas e alevinos, reduzindo dessa forma, a disponibilidade de alimento
natural (ZANIBONI FILHO, 2000)
Fonseca et. al. (2004), estudaram as principais espécies de odonata presentes em
pisciculturas da região de Divinópolis e Itaúna, Estado de Minas Gerais, e avaliaram o efeito
de B. Thuringiensis var. israelensis sobre o terceiro, quinto e sétimo instares da espécie P.
flavescens. As espécies encontradas foram Acantharion sp. Aphylla theodorina, Brachymesia
furcata, Micrathyria hesperis, Pantala flavescens, e Perithemis moorna. A espécie mais
frequente nas coletas foi P. favescens, totalizando 37% do total dos indivíduos coletados. Não
houve efeito significativo do produto microbiano sobre o controle da espécie estudada.
Em um teste sobre predação de larvas de catfish, Ictalurus punctatus, o autor estocou
viveiros com densidades de 50.000 a 100.000 larvas de peixes /ha. Antes da estocagem alguns
viveiros foram tratados com metil paration para matar as larvas de libélula, enquanto que nos
outros viveiros não foi realizado este tratamento. A sobrevivência das larvas de catfish nos
viveiros tratados foi de 79 a 98%; as larvas de libélula consumiram todas as larvas de catfish
dentro de 47 dias nos viveiros não tratados (TAVE et. al., 1990).
Na comparação da preferência da larva de odonata, Pantala sp. sobre alevinos de
tilápia, Oreochromis mossambicus, de cores escura e dourada, o autor concluiu que com o
aumento da densidade de tilápias e de larvas de odonata aumentou também a predação com
uma densidade de 1 larva de odonata a cada 7 larvas de tilápia. As larvas de odonata predaram
mais significativamente as tilápias escuras do que as douradas, concluindo que a cor dourada
não fez com que estas tilápias fossem mais suscetíveis à predação do que às escuras (TAVE e
SMITHERMAN 1990).
Estudando o potencial de predação de alguns insetos aquáticos Pantala (Libellulidae),
Coenagrion (Coenagrionidae) e Notonecta (Notonectidae) sobre larvas de carpa comum,
Cyprinus carpio, a predação das ninfas do gênero Pantala sp aumentaram em relação ao
comprimento do corpo. Ninfas pequenas, médias e grandes consumiram em média 0,91, 1,5 e
2,5 larvas de carpa comum respectivamente. Os dados também indicam que quanto maiores
forem os insetos maiores são suas presas, com exceção da larva da Pantala sp. Quando as
ninfas chegaram ao tamanho de 19 mm o consumo foi reduzido, provavelmente devido à
preparação do inseto à metamorfose. O consumo médio diário dos gêneros Pantala,

29
Coenagrion, Tropistermus, Notonecta e Sigara foram 1,64, 0,43, 0,34, 1,50 e 0,0,
respectivamente (GONZÁLES e LEAL, 1995).
Soares et al. (2001), avaliaram a influência da disponibilidade de presas, do contraste
visual e do tamanho das larvas de Odonata (Pantala sp.) sobre a predação de cladóceros
(Simocephalus serulatus). Observaram aumento na taxa de predação com o aumento na
disponibilidade de presas, e quanto a cor da parede dos aquários houve maior taxa de
predação em aquários com parede escura.
Gabiatti (2001), estudando a fauna de Odonata do Rio Caçador, Seara-SC,
identificando a diversidade de táxons e analisando a influência de algumas variáveis
ambientais sobre esta fauna, constatou a presença de dez gêneros agrupados em cinco
famílias: Coenagrionidae – Ammphyagrion, Acanthagrion, Argia e Enallagma;
Calopterygidae – Hetaerina, Gopmphydae – Progomphus e Phyllocycla; Libellulidae –
Libellula e Perithemys; Aeshnidae – Anax. As análises mostraram que a alcalinidade, o
oxigênio dissolvido da água e o teor de matéria orgânica do sedimento são as variáveis
ambientais que mais influenciaram na distribuição e ocorrência das larvas de odonata no Rio
Caçador.
Ravanello (2004) estudou a ocorrência dos gêneros de Odonata no rio Lajeado São
José, relacionando a densidade e diversidade dos gêneros encontrados com os fatores
físicoquímicos da água e tipo de substrato e comparou a eficiência dos métodos de coleta
utilizados. Foram identificadas 344 náiades de Odonata distribuídas em sete famílias e 16
gêneros, sendo as famílias: Libellulidae, Gomphidae, Aeshnidae, Coenagrionidae,
Megapodagrionidae, Calopterygidae e Protoneuridae. A família libellulidae foi a que
apresentou maior número de gêneros: Perithemis, Erythrodiplax, Dasythemis, Dythemis,
Orthemis. As variáveis abióticas que mais influenciaram na distribuição das náiades foram
textura granulométrica do rio, teor de matéria orgânica no sedimento, oxigênio dissolvido e
condutividade elétrica.
A dieta e o grupo trófico de uma assembléia de insetos aquáticos foi estudada em um
riacho tropical. Os gêneros de algumas ordens de insetos, como Lepidoptera, Ephemeroptera,
Plecoptera, Odonata e Hemiptera, apresentaram especialização alimentar. Por outro lado, as
ordens Trichoptera, Coleoptera e Diptera mostraram grande variação na dieta, com gêneros de
diferentes grupos tróficos. Alguns gêneros das ordens Trichoptera, Lepidoptera, Coleoptera e
Diptera apresentaram variação sazonal na dieta relacionada a mudanças na composição da
comunidade e à dieta generalista desses gêneros. Entretanto, a comparação sazonal de grupos
tróficos não mostrou diferenças estatísticas significativas. A grande importância da matéria

30
orgânica, um recurso não limitado, na dieta dos insetos aquáticos no Ribeirão do Atalho pode
ser a explicação para a estabilidade da organização trófica dessa comunidade. As odonatas
apresentaram-se como estritamente carnívoras alimentando-se de insetos aquáticos e
anelídeos com o maior número de gêneros; são predadores especializados e se alimentam de
presas de diferentes tipos e tamanhos (MOTTA e UIEDA, 2004).
4. MATERIAL E MÉTODOS
4.1 Material vegetal
Os frutos do cinamomo Melia azedarach L. (Família Meliaceae) foram coletados na
propriedade rural do Sr. André Colombi situada no município de Guatambu-SC e localizada a
27º 06’ 34.24” S e 52º 42’ 39.65” O (Figura 5). As folhas do timbó, Ateleia glazioviana são
provenientes do campus da UNOCHAPECÓ situado na cidade de Chapecó-SC e localizado a
27º 05’ 35.23” S e 52º 39’ 52” O.
Figura 5 - Em primeiro plano dois exemplares do cinamomo, Melia azedarach, na
propriedade do Sr. André Colombi – Guatambu-SC.
4.2 Preparo dos extratos e adsorção dos extratos vegetais e metil paration em sílica gel
Os frutos do cinamomo, Melia azedarach (1,34 kg) e folhas do timbó, Ateleia
glazioviana (0,30 kg), foram secos a temperatura de 40ºC e submetidos à maceração com
etanol por 7 dias em um percolador e homogeneizados em intervalos de 24 horas. Para os
frutos de cinamomo foram preparadas duas extrações, com 555,72 e 784,28 g em 2 L de
etanol cada uma. Após este período, os macerados foram filtrados, recolhidos e concentrados

31
em evaporador rotatório sob pressão reduzida, obtendo-se os extratos etanólicos brutos de
cinamomo (EAC) 57,67 g e do timbó (EAT) 13,58 g.
Para a realização dos testes biológicos tanto o EAC, EAT como o metil paration (MP)
(adquirido no comércio local com a marca comercial Folisuper®) foram adsorvidos em sílica
Gel 60 F 254 (Merck) em um evaporador rotatório com pressão reduzida para uma completa
homogeneização e retirada total dos solventes, os quais foram diclorometano para os extratos
e etanol para o metil paration. Foram adsorvidos 27,67 g do EAC em 200 g de sílica gel e 89
µL do MP e 13,58 g do EAT em 100 g de sílica gel.
4.3 Análise fitoquímica e separação dos compostos
A obtenção dos extratos semi purificados foi acompanhada por cromatografia de
camada delgada (CCD) para identificação do perfil cromatográfico e identificação dos
eluentes para uma melhor separação dos compostos (MARINI-BETTÓLO et al., 1981 apud
YUNES e CALIXTO, 2001). Para estes procedimentos foram utilizadas placas de sílica Gel
60 F 254 (Merck) como fase estacionária, e como eluentes misturas de diferentes proporções
com os solventes: hexano, diclorometano, acetato de etila e etanol.
Para revelar as diferentes classes de compostos foram utilizados reveladores
específicos como: anisaldeído sulfúrico para terpenóides e esteróides, Dragendorff para
alcalóides, cloreto férrico (3%) para flavonóides e taninos e raios UV para cumarinas
(YUNES e CALIXTO, 2001).
O EAC adsorvido em sílica foi cromatografado em uma coluna aberta (CC)
(Hostettmann et al., 1997 apud Yunes e Calixto, 2001) empacotada com hexano (Hx) 100% e
sílica Gel 60 F 254 (Merck). No topo da mesma foi adicionado em forma de pastilha 100 g da
sílica com o EAC. Os eluentes hexano, diclorometano, acetato de etila (AE) e etanol foram
utilizados em um gradiente de polaridade crescente de 5 em 5% (Figura 6). Após a separação,
os mesmos foram removidos com o auxílio de um rotoevaporador a pressão reduzida. Os
compostos presentes em cada fração obtida foram analisados por cromatografia de camada
delgada (CCD).
Uma nova CC foi realizada com o EAC adsorvido em sílica utilizado nos testes
biológicos. Foram utilizados 250 mL de cada eluente (hexano, diclorometano, acetato de etila
e etanol) em um gradiente de polaridade crescente. A mudança de polaridade entre os eluentes
deu-se lentamente com adição de 5 em 5% do eluente com maior polaridade. Os eluentes mais
os produtos carreados nas CC foram recolhidos por gotejamento em frascos de 10 mL e

32
numerados sequencialmente. Posteriormente, os compostos presentes em cada um destes
frascos foram analisados por CCD dando origem a subfrações semelhantes.
Cinamomo
(Melia azedarach)
Timbó
(Ateleia glazioviana)
Extração alcoólica
Obtenção dos extratos
brutos
Testes biológicos in vitro
Extrato de
Hexano
Extrato de
Diclorometano
Extrato de
Acetato de Etila
Extrato de
Etanol
Figura 6 - Esquema metodológico para obtenção dos extratos alcoólicos brutos e semi
purificados.
4.4 Identificação e elucidação estrutural dos compostos isolados
Os compostos isolados foram identificados por métodos espectroscópicos usuais. Foi
utilizada técnica de Ressonância Magnética de Hidrogênio (RMN- 1 H) e carbono (RMN- 13 C),
realizados em colaboração com o professor Dr. Franco Delle Monache (CNR/Roma), e com o
professor Dr. Rivaldo Niero (UNIVALI). O ponto de fusão das substâncias foi determinado e
comparado com dados disponíveis na literatura.
4.5 Pesquisa das larvas de Odonata associadas a viveiros de alevinagem de carpa comum
(Cyprinus carpio).
4.5.1 Localização e preparo dos viveiros
Na região Oeste de Santa Catarina o período de criação de alevinos , ocorre entre os
meses de setembro a março de cada ano. Cada lote de alevinos é mantido nos viveiros por
aproximadamente 45 a 60 dias.
A pesquisa das larvas de odonata associadas aos viveiros de alevinagem de carpa
comum (Cyprinus carpio) ocorreu em uma propriedade particular, produtora de alevinos,
situada a 27º04`12`` S e 52º42`28``O, localizada na Região Oeste de Santa Catarina, na
cidade de Chapecó-SC, de 30 de outubro a 29 de dezembro de 2007. O preparo dos viveiros
foi realizado através de calagem de fundo utilizando 200 g m -2 de calcário dolomítico e

33
adubação orgânica com 100 g m -2 de cama de aviário peneirada. O três viveiros amostrados
possuem área superficial de 500, 505 e 510 m 2 , respectivamente viveiros 1, 2 e 3. O objetivo
deste tratamento é propiciar o desenvolvimento de fito e zooplâncton, buscando-se otimizar a
produção de rotíferos, pois possuem tamanho ideal para a primeira alimentação das póslarvas,
além de alto valor nutritivo. A utilização de calcário (CaCO 3 ) mantém em bom nível a
reserva alcalina dos viveiros para que o pH oscile dentro de uma faixa segura para a
manutenção de uma boa qualidade de água e é uma fonte importante de carbono inorgânico
para uma produção primária intensa (BOYD, 1982). O enchimento dos viveiros foi realizado
durante dois dias com água oriunda de outros viveiros previamente fertilizados para que
houvesse uma rápida floração do plâncton.
As pós-larvas de carpa comum (Cyprinus carpio), oriundas do laboratório de
reprodução induzida onde foram alimentadas com ração em pó com 56% de proteína bruta
durante dois dias foram estocadas a uma densidade de 200 pós-larvas m -2 , permanecendo nos
viveiros até o final da coleta das larvas de odonata, quando então foi realizada a despesca total
e comercialização dos alevinos.
4.5.2 Amostragem das larvas de odonata
As larvas foram coletadas nos três viveiros de alevinagem descritos, através de um
coletor de arrasto de fundo (APHA, 1998) com malha de 300 µm. Os arrastos foram
padronizados nos três viveiros em três minutos em cada lateral (taludes ao longo do eixo
longitudinal dos viveiros) e uma no centro do viveiro, com periodicidade quinzenal ao longo
do período de alevinagem dos viveiros amostrados (Figura 7). Em campo as amostras foram
pré triadas e as larvas foram colocadas em sacos plásticos com água do próprio viveiro e
transportadas vivas até o laboratório. O restante do sedimento foi acondicionado em sacos
plásticos e levado imediatamente ao laboratório onde foi lavado em um jogo de peneiras com
malhas de 3,0, 2,0 e 1,0 mm, e as larvas encontradas acondicionadas em álcool 70%.
Posteriormente as larvas foram identificadas ao nível gênero com o auxílio da chave de
identificação publicada por Costa et al., 2004.
Os dados foram analisados através dos seguintes índices:
Dominância de Berger e Parker: Considera a maior proporção da espécie com o
maior número de indivíduos.

34
Onde: é o número de indivíduos da espécie mais abundante e é o número
total de indivíduos da amostra
Diversidade específica de Shannon-Winer: A diversidade de espécie refere-se à
variedade de espécies de organismos vivos de uma determinada comunidade, habitat ou
região.
Onde é o número de indivíduos na i-nésima espécie; é o número total de
indivíduos
Riqueza de espécies Jackknife 1 a ordem: A riqueza refere-se à abundância numérica
de uma determinada área geográfica, região ou comunidade.
Onde é o número de espécies observadas; é o número de espécie que está
presente em somente um agrupamento (espécie de agrupamento) e
é o número de
agrupamentos que contém i esima espécie de um agrupamento.
Equitabilidade: refere-se ao padrão de distribuição de indivíduos entre as espécies,
sendo proporcional à diversidade, exceto se houver codominância de espécie.
Onde:
é o índice de Shanon-Wiener e H max’ é dado pela seguinte expressão
onde s é o número de espécies amostradas.
Concomitante às amostragens das larvas de Odonata, foram mensuradas as variáveis
físicoquímicas da água como, temperatura (através de medidor de temperatura digital), pH
(pHmetro digital), condutividade elétrica (condutivímetro digital) e oxigênio dissolvido
(oxímetro digital).

35
Figura 7 – Viveiro de alevinagem de carpa comum (Cyprinus carpio).
4.6 Avaliação da eficiência dos extratos vegetais e metil paration no controle das larvas
de Odonata.
4.6.1 Avaliação do controle das larvas de odonata com MP
Os testes biológicos foram realizados no Laboratório de Ecologia e Química da
UNOCHAPECÓ em sala climatizada a 23˚C e fotoperíodo de 12 horas. Foram utilizados
aquários de polietileno com dimensões de 17 cm de comprimento x 11,5 cm de largura x 10
cm de altura com capacidade para 1,0 L instalados em uma bancada e abastecidos com água
de abastecimento local proveniente de um poço tubular profundo. Os aquários foram
preparados com 0,5 cm de areia sobre o fundo, previamente esterilizada a 121ºC durante uma
hora. As concentrações dos tratamentos foram obtidas através da pesagem da sílica adsorvida
com o MP ou o EAC, em seguida aplicados sobre o substrato de areia e colocado água. Para
testar a eficiência da utilização da sílica no fundo dos recipientes, foi utilizado primeiramente
o MP, organofosforado largamente utilizado na piscicultura para controle de larvas de insetos.
As larvas de odonata, Neuraeschna sp. (Família Aeshnidae), provenientes de um
viveiro de alevinagem de carpa comum (Cyprinus carpio) foram coletadas e levadas
imediatamente ao laboratório em um recipiente com água do próprio viveiro, onde foi medido
o comprimento total, a biomassa e aclimatadas no laboratório em um período de 24 horas
anterior aos testes. Para a realização dos testes as larvas foram individualizadas e distribuídas
aleatoriamente nos aquários previamente preparados e expostas a concentrações crescentes de
paration metílico adsorvidos em sílica, e ao tratamento controle com cinco repetições. Foram

36
realizados testes preliminares com metil paration nas concentrações 5,0; 2,0; 1,0 e 0,50 mg L -
1 . Os testes definitivos foram realizados nas concentrações de 0,50; 0,25; 0,13 e 0,06 mg L -1 .
As avaliações foram realizadas com intervalo de seis horas após o início dos testes
registrando-se o número de larvas mortas em cada tratamento. Os dados da temperatura da
água, concentração de oxigênio dissolvido (OD), pH e condutividade elétrica foram obtidos
durante as avaliações, com oxímetro, pHmetro e condutivímetro digitais.
4.6.2 Avaliação do controle das larvas de odonata com EAC e EAT
Os testes biológicos foram realizados no Laboratório de Ecologia e Química da
UNOCHAPECÓ em sala climatizada a 23˚C e foto período de 12 horas. Foram utilizados
aquários de polietileno com dimensões de 17 cm de comprimento x 11,5 cm de largura x
10cm de altura com capacidade para 1,0 L instalados em uma bancada e abastecidos com
água de abastecimento local proveniente de um poço tubular profundo. Os aquários foram
preparados com 0,5 cm de areia sobre o fundo, previamente esterilizada a 121ºC durante uma
hora. As concentrações dos tratamentos foram obtidas através da pesagem da sílica adsorvida
com o EAC e EAT, em seguida aplicados sobre o substrato de areia e colocado água.
As larvas de odonata, Neuraeschna sp. (Família Aeshnidae), provenientes de um
viveiro de alevinagem de carpa comum (Cyprinus carpio) foram coletadas e levadas
imediatamente ao laboratório em um recipiente com água do próprio viveiro, onde foi medito
o comprimento total, pesadas e aclimatadas no laboratório em um período de 24 horas anterior
aos testes. Para a realização dos testes as larvas foram individualizadas e distribuídas
aleatoriamente nos aquários previamente preparados e expostas a concentrações crescentes do
EAC adsorvido em sílica, e ao tratamento controle com cinco repetições.
Para avaliar o efeito dos extratos sobre as larvas foram conduzidos testes preliminares
com o EAC e EAT com três tratamentos nas seguintes concentrações: 5,0; 2,0 e 1,0 mg L -1 ,
pois não é conhecido o efeito dos extratos sobre as larvas de odonata. Os testes definitivos
foram realizados somente com o EAC, pois o EAT não apresentou atividade biológica, em
quatro tratamentos nas concentrações de 2,0; 1,0; 0,5 e 0,25 mg L -1 .
As avaliações foram realizadas com intervalo de seis horas após o início dos testes
registrando-se o número de larvas mortas em cada tratamento. Os dados da temperatura da
água, concentração de oxigênio dissolvido (OD), pH e condutividade elétrica foram obtidos
durante as avaliações, com oxímetro, pHmetro e condutivímetro digitais.

37
4.7 Avaliação da toxicidade do EAC em alevinos de carpa comum (Cyprinus carpio)
Os testes com alevinos de carpa comum foram realizados no Laboratório de Ecologia
e Química da UNOCHAPECÓ em sala climatizada a 23˚C e foto período de 12 horas. Foram
utilizados aquários de polietileno com dimensões de 17 cm de comprimento x 11,5 cm de
largura x 10 cm de altura com capacidade para 1,0 L instalados em uma bancada e abastecidos
com água de um poço tubular profundo. Os aquários foram preparados com 0,5 cm de areia
sobre o fundo, previamente esterilizada a 121ºC durante uma hora. As concentrações dos
tratamentos foram obtidas através da pesagem da sílica adsorvida com o EAC, em seguida
aplicados sobre o substrato de areia e colocado água.
Os alevinos de carpa comum (Cyprino carpio), oriundos de uma propriedade rural
produtora de alevinos na Linha Simonetto, interior de Chapecó-SC, obtidos através de
reprodução induzida estavam com quinze dias de permanência em um viveiro de terra onde se
alimentavam de plâncton e ração balanceada em pó. Após tomada das medidas de
comprimento e peso foram distribuídos aleatoriamente três alevinos por aquário previamente
preparados e expostos às concentrações crescentes de EAC adsorvidos em sílica de 2,0; 1,0;
0,50 e 0,25 mg L -1 , e ao tratamento controle com cinco repetições.
As avaliações foram realizadas com intervalo de seis horas após o início dos testes
registrando-se o número de alevinos vivos em cada tratamento. Os dados da temperatura da
água, concentração de oxigênio dissolvido (OD), pH e condutividade foram obtidos durante
as avaliações, com oxímetro, pHmetro e condutivímetro digitais.
4.8 Testes de predação de alevinos de carpa comum (Cyprinus carpio) por larvas de
Odonata com e sem exposição ao EAC
Os testes de predação de alevinos de carpa comum (Cypriuns carpio) por larvas de
odonata (Neuraeschna sp.) foram realizados no Laboratório de Ecologia e Química da
UNOCHAPECÓ em sala climatizada a 23˚C e foto período de 12 horas. Foram utilizados
aquários de polietileno com dimensões de 17 cm de comprimento x 11,5 cm de largura x 10
cm de altura com capacidade para 1,0 L instalados em uma bancada e abastecidos com água
de um poço tubular profundo. Os aquários foram preparados com 0,5 cm de areia sobre o
fundo, previamente esterilizada a 121ºC durante uma hora. A determinação da concentração
do EAC foi realizada através da pesagem da sílica adsorvida com o extrato e em seguida
aplicada sobre o substrato de areia e colocado água.
Os alevinos de carpa comum (Cyprino carpio), oriundos de uma propriedade rural
produtora de alevinos na Linha Simonetto, interior de Chapecó-SC e as larvas de odonata

38
(Neuraeschna sp.) foram coletados simultaneamente no mesmo viveiro de terra. Os alevinos
utilizados, obtidos através de reprodução induzida estavam com quinze dias de permanência
neste viveiro onde se alimentavam de plâncton e ração balanceada em pó. Os alevinos de
carpa comum foram coletados com um puçá e as larvas de odonata através de um coletor de
fundo com malha de 300µ. Foram levados imediatamente ao laboratório, em água do próprio
viveiro com aeração quando então foram tomadas as medias de comprimento e peso tanto dos
alevinos quanto das larvas de odonata e aclimatados por 24 horas. Para o início dos testes
foram distribuídos aleatoriamente três alevinos e uma larva de odonata por aquário
previamente preparados. Foram testados dois tratamentos, um com a exposição das larvas ao
EAC adsorvido em sílica e outro sem exposição ao extrato. A concentração do EAC foi de
0,375 mg L -1 calculada previamente durante os testes de toxicidade.
As larvas de odonata foram colocadas nos aquários uma hora antes dos alevinos,
momento caracterizado como início do experimento. Durante o experimento foram efetuadas
contagens a cada três horas dos alevinos remanescentes (vivos) em cada unidade
experimental, sendo repostos os alevinos consumidos de modo que permaneceram três
alevinos de carpa após cada contagem. Os dados da temperatura da água, concentração de
oxigênio dissolvido (OD), pH e condutividade foram obtidos durante as avaliações, com
oxímetro , pHmetro e condutivímetro digitais.
Para análise estatística foram utilizados os dados das somas dos alevinos consumidos
durante o período experimental e submetidos à análise de variância a 5% de probabilidade.
5. RESULTADOS E DISCUSSÃO
5.1 Análise fitoquímica do EAC
O EAC com os frutos do cinamomo apresentou um rendimento de 4,3% e o EAT com
um rendimento de 14,5 % calculado sobre a massa seca das folhas de timbó utilizadas na
extração de 93,15 g. Como os resultados preliminares com o EAT adsorvido em sílica não
apresentaram atividade biológica deu-se prosseguimento na análise fitoquímica e aos testes
biológicos restantes com o EAC.
A partir do EAC realizou-se o particionamento com solventes de polaridade crescente
onde foram obtidas as frações do hexano, diclorometano, acetato de etila e etanol. Foram
montadas duas colunas, cada uma com 50 g de sílica gel eluída em hexano e adicionada uma
pastilha com massa total de 15 g e uma concentração de 13,83 % do EAC adsorvido em sílica,
portanto 2,08 g de EAC por pastilha.

39
Na análise fitoquímica as frações de hexano (Hx), diclorometano, acetato de etila e
etanol mostraram resultados positivos para terpenos e esteróides. As frações do
diclorometano, acetato de etila e etanol também mostraram resultados positivos para
cumarinas quando revelados com raios UV. Em todas as frações não houve resultado positivo
para flavonóides quando revelados com cloreto férrico 3% (FeCl 3 ). Para alcalóides houve
resultado positivo na fração do acetato de etila quando revelado com a solução de
Draggendorf e para taninos não foi evidenciada presença em nenhuma das frações obtidas
(Tabela 1).
Dominguez et al. (1958), não encontraram a presença de alcalóides em extratos de
éter de petróleo e etanol nos frutos de Melia azedarach revelados com a solução de
Draggendorf, mas obtiveram resultado positivo com extrato aquoso, e resultado negativos
foram encontrados para flavonóides e taninos. Patil et al. (2003), evidenciaram a presença de
alcalóides e flavonóides em fração etanólica dos frutos de Melia azedarach.
Tabela 1. Análise fitoquímica do EAC através de cromatografia em camada delgada
(CCD).
Terpenos Flavonóides Cumarinas Alcalóides Taninos
Hx + - - - -
Diclorometano + - + - -
AE + - + + -
Etanol + - + - -
+ presente; - ausente
5.2 Separação dos compostos
A cromatografia em coluna é usada para separar compostos de uma mistura. É uma
técnica de partição entre duas fases, sólida e líquida, baseada na capacidade de adsorção e
solubilidade. O acompanhamento dos extratos semi-purificados através de cromatografia de
camada delgada (CCD) é usada como uma técnica qualitativa, na verificação do grau de
pureza de um composto ou na determinação do número de componentes de uma mistura
(YUNES e CALIXTO, 2001).
A análise fitoquímica além de revelar parcialmente as classes das substâncias
presentes em cada fração analisada, permite ainda selecionar os melhores eluentes para
realização das CC. Como o cinamomo é uma fonte importante de terpenos foi dada especial
atenção a analise desta classe de composto.

40
As subfrações aplicadas em placas de CCD quando reveladas com anisaldeído para
terpenos e esteróides e que indicaram a presença de somente um composto foram:
diclorometano (DCM) 30,0 mg; DCM/AE (95:5) 40,0 mg; DCM/AE (80:20) 70,0 mg;
DCM/AE (60:40) 70,0 mg; DCM/AE (50:50) 30,0 mg; Hx/AE (88:12) 30,0 mg e Hx/AE
(60:40). Após determinação do pondo de fusão foram enviadas para posterior identificação.
5.3 Identificação das frações A1 e A2, isoladas do EAC adsorvido em sílica através de
Ressonância Magnética (RMN)
Foram identificados dois compostos das frações denominadas A1 e A2. A fração A1
foi obtida com o eluente DCM (100 %), e a A2 com o eluente DCM/AE (60:40). Na primeira
foi identificada o ácido linoléico (Figura 8); e na segunda, o triterpenóide melianona (Figura
9). As massas e rendimentos obtidos foram de 40 mg - 1,1% e 70 mg - 2,0% para A1 e A2,
respectivamente. A fração A2 formou cristais incolores e o ponto de fusão determinado foi de
166-168 ºC. Segundo Nakanish et al. (1986) o ponto de fusão da melianona é de 214-215ºC, a
diferença pode ter ocorrido devido a impurezas na amostra.
Na análise de RMN para a fração A1 observou-se nos espectros de próton – H 1 -RMN
(Figuras 10 e 11) sinal intenso em 5.34 e 5.36 (devido aos -CH=CH- cis); triplete a 2.31
(devido ao -CH2- em alfa ao -COO-); triplete em 0.88 (devido ao Me terminal; triplete em
1.59 (devido ao -CH2- em beta a -COO-); sinal intenso no intervalo 1.25 e 1.41, devido a -
(CH2)n; multiplete em 2.00, devido aos -CH2- alílicos; multiplete em 2.75, devido aos -CH2-
duplamente alílicos; e no espectro carbono: C 13 -RMN (Figuras 12 e 13): Sinal 14.1 Me
terminal; sinal em 34,2 devido ao -CH2- alfa ao Me (C-2); em 29,9 devido ao CH2 beta ao
Me; em 31,9 sinal carbono alfa ao -COO- (C-2); A cadeia -C(9)=C(10)-CH2-C(12)=C(13)- da
4 sinais; 128.0/127.9 para C-9 e C-10, 130/129,7 para C-12 e C-13 . Sinal a 27.2 (CH2
alílicos) e a 25.0 (CH2 duplamente alílico).
18
13
12
10
9
5
3
C
1
O
OH
Ácido cis,cis-9,12-octadecadienóico (ÁCIDO LINOLEICO)
Figura 8 – Estrutura química do ácido linoléico.
Enquanto os animais utilizam as gorduras para a armazenagem de energia, as plantas
as utilizam principalmente para armazenar carbono. Gorduras e óleos são formas importantes
de armazenagem de carbono reduzido em muitas sementes. Os ácidos graxos em plantas são

41
normalmente ácidos carboxílicos de cadeia reta com um número par de átomos de carbono.
As cadeias de carbono podem ser tão curtas quanto de 12 unidades ou tão longas quanto de
20, mas mais comumente elas têm 16 ou 18 carbonos de extensão. Os principais ácidos
graxos insaturados nos lipídeos vegetais são os ácidos oléico (18;1), linoléico (18:2) e
linolênico (18:3). Estão presentes também nas membranas biológicas que são bicamadas de
fosfolipídios que contém proteínas. Visto que os vegetais não podem regular a temperatura
dos seus corpos, eles frequentemente enfrentam o problema de manter a fluidez da membrana
sob condições de baixas temperaturas, as quais tendem a aumentar a compactação da mesma.
Assim, os fosfolipídios vegetais apresentam um alto percentual de ácidos graxos insaturados,
como o ácido oléico, ácido linoléico e α-linolênico que aumentam a fluidez da membrana
(TAIZ, L. 2004). Vivan (2005) cita ainda óleos, glicerídeos de ácido palmítico, oléico,
linoléico e esteárico, vanilina, ácido vanílico e azadiractina como principais compostos
presentes nos frutos e sementes de Melia azedarach.
Através da análise de RMN da fração A2 (Figuras 14, 15 e 16) observou-se no
espectro de próton – H 1 -RMN: δ: 5.38 (triplete) e 5.37 (m); 5.32, 3.92 (multiplete) e 3.87
(multiplete), 2.86 (multiplete) e 2.72 (multiplete) e nove sinais singletes 1.33, 1.31, 1.31, 1.11,
1.04, 1.02, 1.01, 0,89 e 0.85 (totalizando 21H, 7 grupos metila). (Os sinais de ambos os
espectros, de próton e do carbono, foram comparados com os espectros obtidos por
Nakanishi, et. al. (1986) na identificação do triterpenóide melianona em extratos alcoólicos
dos frutos de Melia toosendan. Análise do espectro de carbono C 13 -RMN da melianona
(Figuras 17, 18 e 19) encontra-se na Tabela 2.
R
O
O
O
R= H, OH - Epímero
Figura 9 - Estrutura química do triterpeno Melianona (C 30 H 26 O 4 ).
A estrutura química da melianona, triterpenos tetracíclicos foi isolada e identificada
por Lavie et. al. (1967), a partir do extrato de frutos de Melia azedarach.

42
Protolimonóides são considerados os precursores biogenéticos dos limonóides. Vários
protolimonóides foram isolados das folhas e frutos do neem (Azadirachta indica): das folhas e
óleo, melantriol; dos frutos frescos, melianona, este o maior constituinte de Melia azedarach e
nimolinone, das folhas verdes nimbocinone, das camadas do fruto e folhas, limocinol,
limocinone e kulactone (POLONSKY, et. al., 1977).
Su et. al. (1990), avaliando os compostos fagoinibidores do fruto de Phellodendron
chinese com ação sobre Reticulitermes speratus encontrou que o composto melianona
mostrou atividade de inibição alimentar na concentração de 100 µg/disco, sendo mais intenso
em altas dosagens (1000 µg/disco). Matias (apud FALBO et al., 2008, p. 882) cita a presença
dos metabólitos triterpenóides melianona, melianol e meliantriol no fruto de Melia azedarach
e que apresentam atividade anti-helmíntica.
Biavatti (apud, WESTERNON, 2006, p. 24) confirmou a atividade citotóxica do
protolimonóide, melianona, no biomonitoramento com microcrustáceo Artemia Salina.
Melantriol e melianona são os principais compostos presentes nos frutos do gênero
Melia, encontrando-se também presentes cinnamoylmelianolone e melianol (RANA, 2008,
POLONSKY et al., 1977).
Melantriol isolado do óleo do neem e dos frutos frescos de Melia azedarach mostrou
forte ação fagoalimentar no gafanhoto do deserto Schistocerca gregária, na concentração de 8
µg cm -2 . Também foi relatada ação fagoalimentar da melianona sobre Epilachna varivestis
(SCHWINGER et. al., apud INTRODUCTION, [199-], pag. 9).
Tabela 2. Dados do espectro C 13 -RMN do composto A2
Carbono Deslocamento Carbono Deslocamento Carbono Deslocamento
(ppm)
(ppm)
(ppm)
C-1 38.46 C-11 17.71 C-21 101.83; 97.80
C-2 35.10 C-12 35.18 C-22 31.51; 31.31
C-3 216.89 C-13 43.76; 43.58 C-23 78.46; 77.01
C-4 47.87 C-14 50.78; 50.42 C-24 67.74; 65.34
C-5 52.43; 52.37 C-15 34.26 C-25 58.06; 57.28
C-6 23.25 C-16 27.47; 27.32 C-26 25.01; 24.91
C-7 118.2; 118.09 C-17 47.06; 45.23 C-27 19.41; 19.18
C-8 145.74; 145.57 C-18 12.74 C-28 24.38
C-9 40.60; 48.38 C-19 24.52 C-29 21.56
C-10 34.89 C-20 33.8; 31.69 C-30 22.62

Figura 10 - Espectro de próton – H 1 -RMN da fração A1
43

Figura 11 - Espectro de próton – H 1 -RMN da fração A1 (continuação)
44

Figura 12 - Espectro carbono C 13 -RMN da fração A1
45

Figura 13 - Espectro carbono C 13 -RMN da fração A1 (continuação).
46

Figura 14 - Espectro de próton – H 1 -RMN da fração A2
47

Figura 15 - Espectro de próton – H 1 -RMN da fração A2 (continuação).
48

Figura 16 - Espectro de próton – H 1 -RMN da fração A2 (continuação).
49

Figura 17 - Espectro carbono C 13 -RMN da fração A2
50

Figura 18 - Espectro carbono C 13 -RMN da fração A2 (continuação).
51

Figura 19 - Espectro carbono C 13 -RMN da fração A2 (continuação).
52

53
5.4 Pesquisa das larvas de Odonata associadas a viveiros de alevinagem de carpa comum
(Cyprinus carpio)
São raros os trabalhos na região Oeste de Santa Catarina quanto à diversidade das
larvas de Odonata em viveiros de piscicultura. Klaus (2004), em um estudo que identificou as
náiades de odonata em tanques de piscicultura no município de São Carlos-SC, encontrou em
quatro tanques avaliados 5 famílias e 13 gêneros. Os mais frequentes foram da família
Libellulidae: Orthemis com 38,18%, Perithemis, 30,18% e Erythrodiplax, 24%.
Na compilação de outros dois trabalhos realizados no Oeste de Santa Catarina,
Gabiatti (2003) e Ravanello (2004), encontraram 26 gêneros distribuídos em seis famílias
(RAVANELLO, 2004).
Os gêneros encontrados na estação produtora de alevinos na Linha Simonetto em
Chapecó-SC, pertencem à família Aeshnidae: Limnetron, Neuraeschna e Rhionaeshna e à
família Libellulidae: Anatya; Dythemis; Erythrodiplax; Micrathyria; Nephepeltia; Orthemis;
Pantala e Tramea.
Nos três viveiros monitorados nesta pesquisa foram encontradas um total de 126 larvas
(INSECTA: ODONATA) da subordem Anisoptera, 80 larvas pertencentes à família
Aeshnidae e 46 à Libellulidae. Embora com maior número de larvas amostradas, a família
Aeshnidae foi representada por somente três gêneros, Neuraeschna com 72, Rhionaeshna com
6 e Limnetron com duas larvas. Neuraeschna e Rhionaeshna foram os únicos gêneros que
ocorreram nos três viveiros. Da família Libellulidae ocorreram oito gêneros e 46 larvas.
Do total das larvas amostradas, as pertencentes ao gênero Neuraeschna representaram
57,14%. Erythrodiplax, Orthemis e Micrathyrya foram as mais abundantes das Libellulidae
com 14,29, 8,73 e 6,35%, respectivamente. Os demais gêneros foram mais raros, dentre eles:
Anatya (2,38%), Dythemis (1,59%), Nephepeltia (1,59%) e Tramea (1,59%). Todas as larvas,
exceto Dythemis (descrita por habitar ambientes lóticos), são descritas por habitarem
ambientes lênticos, incluindo-se tanques de piscicultura (COSTA et. al., 2004). Nos três
viveiros monitorados, as larvas de Neuraeschna ocorreram 15 dias após o alagamento dos
mesmos com comprimento total de até 3,0 cm e, no final das coletas, apresentavam-se com as
tecas alares bem desenvolvidas e em fase de emergência. Segundo Costa et. al. (2004), a
Neuraeschna é uma larva de porte grande (49-51mm), apresentando o dorso do abdômen liso
e vértex sem tubérculo. Na figura 21 um imago de Neuraeschna, a emergência ocorreu no
laboratório.
A diversidade refere-se à variedade de espécies de organismos vivos de uma
determinada comunidade, habitat ou região. O viveiro 1, com 10 gêneros, apresentou a maior

54
diversidade (H’), seguido por ordem decrescente os viveiros 3 e 2, respectivamente (Figura
20).
A riqueza, que se refere à abundância numérica de uma determinada área geográfica,
região ou comunidade, diferiu significativamente entre os viveiros e entre os taludes (p

55
dos machos, apresentam o triângulo anal formado por 2-4 células. Os adultos, figura 22, são
facilmente reconhecidos pela semelhança entre os triângulos das asas anteriores e posteriores,.
ocorrendo em ambientes lênticos, habitando poças d´água e brejos (COSTA et. al., 2000;
COSTA et. al., 2004).
Santos et. al. (1988), estudando a ocorrência desta família em tanques de piscicultura
com os taludes em concreto, encontrou as seguintes espécies: Coryphaescha luteipennis,
Burmeister, 1839, Anax amasili, Burmeister, 1839, Anax concolor Brauer, 1865 e
Castoraeshna, Martin, 1908.
A família Libellulidae agrupa a maioria das espécies de Odonata e as mais
frequentemente encontradas entre os Anisoptera, são amplamente distribuídos no Brasil
(COSTA et al., 2000). As larvas não têm ovopositor e desovam na superfície da água,
raspando o abdômen e soltando os ovos (postura exofítica), daí o nome vulgar de
“lavabunda”. As que melhor se adaptaram aos tanques de piscicultura, com as paredes de
concreto e sem plantas nas margens ou flutuantes são: Pantala flavescens Fabricius, 1798,
Tramea cophysa Hagen, 1867, Miathyrya marcella Selys, 1857, Perithemis mooma Kirby,
1889 e outras dos gêneros Micrathyria sp. e Erythrodiplax sp. Nestas condições, há falta de
substrato para postura das Aeshnidae (SANTOS, et. al., 1988). Fonseca et al. (2004),
pesquisou as espécies de Odonata presentes em duas estações de piscicultura em Minas Gerais
através da captura de ninfas e adultos. As larvas encontradas foram Pantala flavescens
(Fabricius, 1978), Brachymesia furcata (Hangen, 1861) e Perithemis mooma (Kirby,1889),
entre as adultas Pantala flavescens (Fabricius, 1978), Erytthrodiplax fusca (Rambur, 1842) e
Perithemis mooma (Kirby,1889).
O comportamento das odonatas de se distribuírem nas bordas dos viveiros, ou seja,
nos taludes próximos às margens, torna especialmente expostos à predação pós-larvas de
peixes que habitam estas áreas, em busca de alimento e temperaturas adequadas.
Cabe ressaltar que durante o monitoramento realizado não foi encontrada nenhuma
larva de Pantala flavescens (Fabricius, 1978), mas, durante coletas esporádicas a mesma foi
capturada no final do mês de fevereiro e início de março de 2008 e 2009 em viveiros cujas
despescas já haviam sido realizadas.
Um aspecto importante do comportamento das larvas de odonata é o canibalismo. As
larvas da família Aeshnidae são muito predadoras e atingem o maior porte entre as odonatas
brasileiras (SANTOS et. al., 1988). Provavelmente este comportamento predatório e as
condições para uma postura exofítica sejam a respostas para a dominância das larvas da
família Aeshnidae. Na tabela 3 encontram-se os valores das variáveis físicoquímicas da água

56
aferidas nos três viveiros amostrados. Segundo Boyd (1982), encontram-se dentro da faixa
considerada ideal para piscicultura.
Tabela 3. Média e desvio padrão das variáveis físicoquímicas da água nos três viveiros
amostrados.
Viveiros
Temperatura da água Oxigênio
(ºC) Dissolvido (mg L -1 )
pH
1 24,12±2,00 7,97±2,49 6,88±0,48
2 24,25±1,48 9,49±2,41 6,80±0,19
3 25,20±0,89 6,59±3,00 6,71±0,23
Figura 21 - Imago de Neuraeschna.

57
Figura 22 - Neuraeschna adulta e exúvia.
5.5 Avaliação da eficiência dos extratos vegetais e metil paration no controle das larvas
de Neuraeschna (ODONATA: AESHNIDAE)
5.5.1 Avaliação do controle das larvas de Neuraeschna (ODONATA: AESHNIDAE) com
MP
Nos testes preliminares a maior concentração testada foi de 10 vezes a concentração
indicada para uso diretamente na água e a menor coincide com a concentração indicada por
Woynarovich e Horvath (1981) e Garadi et. al. (1988). A razão desta diferença é porque não
havia conhecimento de resultados anteriores com esta metodologia.
Com 6 horas de exposição houve mortalidade nas concentrações de 5,0 e 2,0 mg L -1 de
duas e uma larva respectivamente. O primeiro tratamento com mortalidade total foi na
concentração de 5,0 mg L -1 às 12 horas de exposição, quando tiveram início mortalidades nos
tratamentos 2,0 e 0,5 mg L -1 . Às 18 horas de teste os dois tratamentos com maior
concentração apresentaram mortalidade total das larvas enquanto que nas concentrações de
1,0 e 0,5 mg L -1 houve mortalidade de 80%. O experimento foi concluído às 24 horas com

58
mortalidade total em todos os tratamentos exceto na concentração de 1,0 mg L -1 , onde
permaneceu uma larva viva, porém não apresentava reação quando estimulada à predação.
Na tentativa de encontrar uma concentração letal mínima foi dado prosseguimento aos
testes biológicos com mais quatro tratamentos nas concentrações de 0,5; 0,25; 0,13 e 0,06 mg
L -1 . O início da mortalidade deu-se às 12 horas de exposição com 60% e 50% nos tratamentos
0,25 e 0,13 mg L -1 respectivamente, e 20% nos tratamentos 0,5 e 0,06 mg L -1 . Às 18 horas
ocorreu mortalidade total das larvas em todos os tratamentos com exceção do tratamento 0,5
mg L -1 . Ao final do experimento houve mortalidade de todas as larvas em todos os
tratamentos (Figura 23). A CL 50-12h calculada neste estudo foi de 0,17 mg L -1 de metil paration
(Tabela 5).
100
Porcentagem de larvas mortas
80
60
40
20
0
0,5 mg/L
0,25 mg/L
0,13 mg/L
0,06 mg/L
Controle
6 12 18 24
Horas de exposição
Figura 23 - Mortalidade das larvas de Neuraeschna (ODONATA:AESHNIDAE) nas
diferentes concentrações do MP adsorvido em sílica.
O metil paration é um potente inibidor de acetilcolinoesterase tendo um profundo
efeito no sistema nervoso dos organismos expostos, causando excitação contínua levando à
paralisia (EDWARDS e THOUNWOU, 2005; SANTOS, 2007). Os inseticidas
organofosforados são utilizados, de modo geral na piscicultura em aplicação direta na água
para o controle de odonatas e parasitas externos. A recomendação mais utilizada para o
controle de larvas de odonata é de 0,5 mg L -1 de metil paration considerando para o cálculo de
diluição todo o volume de água dos viveiros de piscicultura (WOYNAROVICH e

59
HORVÁTH, 1981; GARADI et al., 1988; TAMASSIA, 1996). Não há nenhum estudo que
indique qual a concentração deste organofosforado disponível para os insetos bentônicos e
que possa ser comparado com este estudo.
Com a incorporação no MP em sílica houve uma redução de 2,94 vezes da dose letal
em relação à indicação técnica tradicional para o controle das odonatas. O resultado mais
importante deste experimento foi a eficácia deste método de controle para que se possa dar
prosseguimento ao trabalhos utilizando a sílica como base para a aplicação de produtos
naturais (extratos vegetais) em substituição aos praguicidas sintéticos.
Não houve diferença significativa (p

60
Na tentativa de encontrar uma concentração letal mínima foi dado prosseguimento aos
testes biológicos com mais quatro tratamentos 2,0 ; 1,0 ; 0,50 e 0,25 mg L -1 .
No teste definitivo o tratamento de 2,0 mg L -1 confirmou o teste preliminar com início
da mortalidade às 12 horas de exposição, nos demais iniciaram às 18 horas. Ao completar 24
horas todas as larvas estavam mortas nos tratamentos 2,0 e 0,5 mg L -1 , 80% e 40% nos
tratamentos 1,0 e 0,25 mg L -1 respectivamente. No tratamento de menor concentração, 0,25
mg L -1 , às 30 horas de exposição, 60% das larvas estavam mortas, o que se repetiu até às 36
horas quando foi encerrado o teste, pois as larvas remanescentes apresentavam-se com
movimentos lentos e sem reflexos quando estimuladas à alimentação (Figura 24). Ao final do
experimento as larvas do tratamento controle apresentavam-se com movimentos e reflexos
normais.
100
Porcentagem de larvas mortas
80
60
40
20
0
2 mg/L
1 mg/L
0,5mg/L
0,25 mg/L
Controle
6 12 18 24 30 36
Horas de exposição
Figura 24 - Mortalidade das larvas de Neuraeschna (ODONATA: AESHNIDAE) nas
diferentes concentrações do EAC adsorvido em sílica.

61
Tabela 5. Equações lineares, R 2 e CL 50 (mg L -1 ) do MP e do EAC nos testes de
toxicidade com as larvas de Neuraeschna (ODONATA: AESHNIDAE).
Equação Linear R 2 CL 50
(mg L -1 )
Metil paration
12 h y = 248,5 x + 7,66 0,89 0,17
Extrato Alcoólico de
Cinamomo (EAC)
18 h y = 248,56 x + 7,66 0,89 0,57
24 h y = 323,10 x + 19,39 0,78 0,37
30 h y = 375,72 x + 23,67 0,85 0,27
36 h y = 375,72 x + 23,67 0,85 0,27
Na tabela 5 encontram-se as equações lineares, R 2 e CL 50 (mg L -1 ) do MP e EAC para
as larvas de Neuraeschna.
Não houve diferença significativa (p>0,05) entre as variáveis físicoquímicas nos
tratamentos. (Tabela 6). Os valores obtidos se encontram dentro da faixa considerada ideal
para piscicultura (BOYD, 1982).
Extrato de frutos e folhas de Melia azedarach e do neem Azadirachta indica tem sido
estudados para o controle de insetos pragas em cultivos agronômicos e no controle de
parasitoses em peixes (HAMMAD e McAUSLANE, 2006, VIEGAS, 2003, CRUZ, 2005).
Experimentos realizados a partir de distintas concentrações de extrato de sementes e folhas de
Melia azedarach demonstram a atividade fagoinibidora, um fagoinibidor é definido como a
substância que inibe a alimentação, e efeito negativo no desenvolvimento e sobrevivência de
várias espécies de insetos que atacam diversos cultivos agronômicos (VIEIRA e ANDREI,
1997). Monoterpenos, como por exemplo, 1,2-epóxi-pulegona, aparentemente tem sua ação
inseticida decorrente da inibição da acetilcolinesterase (VIEGAS JÚNIOR, 2003), porém não
foram encontrados estudos sobre o uso de extratos desta planta para o controle de insetos
aquáticos.
A toxicidade aguda da azadiractina foi avaliada por Dunkel e Ricilards (1998) para
seis espécies de invertebrados aquáticos: Drunella grandis, D. doddsi, Skwala paralela,
Brachicentrus occidentalis, B. americanus e Caecidotea intermédia. A CL 50 - 24h estimada
variou de 1,8 a 9,2 mg L -1 para estas espécies.
Kreutzweiser et al. (1999), avaliaram os danos causados às comunidades de insetos em
córregos naturais com exposição de 5 h e expostas a uma formulação comercial à base do
neem, limitando à concentração máxima de 1,05 mg L -1 de azadiractina. Das oito espécies de
insetos testados, uma era odonata, Ophigomphus sp (ODONATA: GOMPHIDAE), exposta
durante 5 horas a uma concentração de 0,84 mg L -1 . Houve 15,5% de deslocamento para áreas

62
sem a presença deste triterpenóide contra 26,7% do controle. Ao final de 5 dias de
observação, ocorreu nesta mesma concentração, 6,7% de mortalidade das odonatas expostas à
azadiractina e 8,8% no controle. As diferenças entre as espécies testadas, duração de
exposição e diferenças entre as formulações comerciais do neem utilizadas não permitem
fazer comparações com os resultados obtidos, mas servem de referência para futuros trabalhos
(KREUTZWEISER et al., 1999).
Em um programa de controle de insetos aquáticos em córregos no Canadá com
aplicação de 50g ha -1 resultou em uma concentração na água de 0,035 mg L -1 , a qual não
afetou os insetos alvos de controle em testes laboratoriais (KREUTZWEISER et al., 1999).
Esta diferença, entre a concentração aplicada e a disponível na água justifica a incorporação
tanto do MP quanto do EAC em sílica, pois permite disponibilizar os compostos químicos
mais próximos às larvas alvo, e provavelmente esta seja a explicação para obtenção de uma
concentração letal mínima 8 vezes inferior à concentração utilizada tradicionalmente na
piscicultura.
Tabela 6. Comprimento total das larvas de Neuraeschna, média e desvio padrão das
variáveis físicoquímicas da água durante os testes com EAC.
Oxigênio
Condutividade
Tratamentos Tamanho das Temperatura da
(mg L -1 Dissolvido pH
) larvas (cm) água (ºC)
(mg L -1 (µS cm -1 )
)
5,0 4,5± 0,1 22,00±1,50 4,9±0,8 7,7±0,8 120,89 ±7,7
2,0 4,4± 0,05 21,70±2,20 5,1±0,6 7,8±0,9 130,01±7,8
1,0 4,6 ±0,2 22,10±2,30 5,2±0,5 7,9±0,8 129,90±9,8
0,5 4,4±0,10 22,50±2,00 4,8±0,7 7,7±0,8 121,35±7,3
0,25 4,5±0,15 22,60±1,95 5,0±0,4 7,6±0,9 111,50 ±1,7
Controle 4,4±0,12 22,60 ±1,80 5,0±0,7 7,7±0,6 114,90± 0,7
5.6 Avaliação da toxicidade do EAC em alevinos de carpa comum (Cyprinus carpio)
Durante as 36 horas de teste com os alevinos de carpa comum (Cyprinus carpio)
expostos aos tratamentos 2,0; 1,0; 0,5 e 0,25 mg L -1 do EAC adsorvido em sílica não houve
mortalidade. A mobilidade e reflexos destes alevinos permaneceram inalterados quando
comparados ao tratamento controle (sem EAC). Portanto, o EAC não se mostrou tóxico nas
concentrações e no período testado ao alevinos de carpa comum. Como não foram
encontrados trabalhos sobre a toxicidade do extrato do cinamomo em alevinos de carpa
comum, observa-se que Cruz (2005) determinou a toxicidade aguda CL (I) 50-96 H de 1,30 mg
L -1 em alevinos de pacu (P. mesopotamicus) com base na azadiractina, correspondendo a uma
concentração de 100 mg L -1 do extrato aquoso testado, concentração esta superior às testadas

63
neste experimento. Não houve diferença significativa (p>0,05) entre as variáveis físico
químicas da água entre os tratamentos. (Tabela 7). Os valores obtidos se encontram dentro da
faixa considerada ideal para piscicultura (BOYD, 1982).
Tabela 7. Comprimento total das larvas de Neuraeschna, média e desvio padrão das variáveis
físicoquímicas da água durante os testes de toxicidade com alevinos de carpa comum.
Comprimento
Oxigênio
Tratamentos
Temperatura
(mg L -1 das larvas de
Dissolvido(mg pH Condutividade
)
da água (ºC)
Neuraeschna
L -1 (µS cm -1 )
)
10,00 4,5± 0,10 22,46±0,67 6,64±1,31 7,43±0,12 79,3±2,9
5,00 4,4± 0,05 22,50±0,65 6,70±1,32 7,46±0,15 88,6±2,8
2,5 4,6 ±0,20 22,57±0,61 6,84±1,07 7,43±0,19 88,4±2,6
1,25 4,4±0,10 22,59±0,55 7,00±0,88 7,58±0,35 87,7±3,3
0,5 4,5±0,15 22,56±0,58 6,81±1,05 7,45±0,35 88,0±3,3
Controle 4,4±0,12 22,50±0,50 6,74±0,65 7,47±0,34 88,1±2,8
5.7 Predação de alevinos de carpa comum (Cyprinus carpio) por larvas de Neuraeschna
(ODONATA : AESHNIDAE) com e sem exposição ao EAC
Nos três viveiros monitorados as larvas que tiveram maior ocorrência desde o início da
temporada de produção de alevinos foi o gênero Neuraeschna (ANISOPTERA:
AESHNIDAE), motivo pelo qual foi utilizada para os testes de predação (Figuras 25 e 26).
Figura 25 - Larva de Neuraeschna utilizada nos testes de predação
(ODONATA: AESHNIDAE).

64
O maior número de alevinos predados ocorreu nas primeiras três horas de teste,
possivelmente devido à restrição alimentar durante aclimatação de 24 horas a que foram
expostas as larvas de odonata. Foram nove alevinos predados no tratamento sem o EAC e 10
alevinos no tratamento com o EAC.
O total de alevinos predados foi maior no tratamento com o EAC até a terceira leitura,
a partir daí o número de alevinos predados foi sempre menor do que no tratamento sem
exposição ao EAC até o final do experimento (Figura27). Possivelmente devido ao efeito
tóxico provocado pelo contato com o extrato de cinamomo. Houve diferença significativa
(p0,05) nas variáveis
físicoquímicas da água entre os tratamentos. (Tabela 8). Os valores aferidos se encontram
dentro da faixa considerada ideal para piscicultura (BOYD, 1982).

65
Figura 26 - Larva de Neuraeschna e efeito da predação sobre alevinos de Carpa
comum (Cyprinus carpio) utilizados nos testes de predação.
40
Número de alevinos consumido
35
30
25
20
15
10
5
0
Tratamento sem o EAC
Tratamento com o EAC
3 6 9 12 15 18 21 24 27
Horas
Figura 27 - Número de alevinosde carpa comum (Cyprinus carpio) consumidos pelas
larvas de Neuraeschna durante os testes de predação.

66
Tabela 8. Comprimento total das larvas de Neuraeschna, média e desvio padrão das
variáveis físicoquímicas da água durante os testes de predação.
Tratamentos
Tamanho
Oxigênio
Temperatura
Condutividade
das larvas
Dissolvido pH
da água (ºC)
(cm)
(mgL -1 (µS.cm -1 )
)
Com EAC 3,50±0,03 22,51±0,07 5,52±0,58 7,02±0,06 94,4±3,8
Sem EAC 3,50±0,04 22,50±0,47 5,62±0,43 7,015±0,05 98,6±3,9
Controle 3,64±0,03 22,51±0,48 5,63±0,45 7,016±0,05 95,21±4,1
6. CONCLUSÕES E CONSIDERAÇÕES FINAIS
A aplicação do MP adsorvido à sílica possibilitou a obtenção de uma concentração
letal mínima às larvas de odonata significativamente inferior àquela tradicionalmente utilizada
na piscicultura.
O MP e o EAC adsorvidos em sílica mostraram-se eficientes no controle das larvas de
odonata. Porém, as mortalidades retardaram 12 horas para iniciarem no teste com EAC em
relação ao MP e prolongarem-se por 12 horas.
O EAC comprovou sua toxicidade às larvas de Neuraeschna durante os testes de
predação e não foi tóxico aos alevinos de carpa comum (Cyprinus carpio) em concentrações
até 7,4 vezes superiores à menor concentração letal calculada para estas larvas.
De acordo com a Secretaria Especial de Aquicultura e Pesca (SEAP/PR), para que a
aquicultura possa se desenvolver de forma responsável, contribuindo com a melhoria do meio
ambiente é necessário estabelecer para os diversos sistemas, ambientes e espécies de cultivos
as Boas Práticas da Aquicultura. Baseado nesses princípios, nas diretrizes de uma Aquicultura
Responsável (FAO) e no código de Conduta da Aquicultura Européia, a SEAP/PR identificou
a necessidade de promover a elaboração de um código de práticas responsáveis para a
atividade de piscicultura, em busca de um desenvolvimento sustentado no âmbito ambiental,
social e econômico que deve nortear a criação de peixes. O “Código de conduta para o
Desenvolvimento Sustentável e Responsável da Piscicultura Brasileira” baseia-se na atitude,
responsabilidade e compromisso do piscicultor de executar ações que respeitem o meio
ambiente e o consumidor. Utilizando como instrumentos um manejo eficaz, com
desenvolvimento de tecnologias “limpas”, através do profissionalismo dos produtores,
resultando em um melhor combate e/ou diminuição dos impactos sociais ambientais e
econômicos. Os produtores, as cooperativas, associações e empresas que decidirem iniciar na
piscicultura devem respeitar os seguintes princípios: proteger e respeitar o meio ambiente;
utilizar os princípios de biossegurança; respeitar os direitos e segurança de outros usuários dos
recursos hídricos; obrigatoriamente cumprir com as regulamentações impostas por órgãos

67
normativos e licenciadores e dispor de condições de segurança aos empregados. (BRASIL,
2004). Neste contexto a substituição de pesticidas sintéticos por produtos naturais é um
caminho a ser percorrido rumo à sustentabilidade da piscicultura.
Sugere-se dar continuidade aos testes com as odonatas avaliando a atividade biológica
da melianona e, das demais frações semipurificadas do EAC.
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