vi seminário sobre pragas, doenças e plantas daninhas do ... - IAC

DESENVOLVIMENTO DE MARCADORES MICROSSATÉLITES
A PARTIR DE UMA BIBLIOTECA ENRIQUECIDA PARA A
VARIEDADE CAL-143 DE FEIJÃO COMUM (Phaseolus vulgaris L.)
Juliana Morini Kupper Cardoso ( 1 ), Juliana Alves Neves ( 1 ), Sérgio Augusto Carbonell ( 2 ),
Alisson Fernando Chioratto ( 2 ) e Anete Pereira de Souza ( 3 ), Luciana Lasry Benchimol ( 4 )
RESUMO
Os microssatélites (SSRs) representam um dos mais robustos marcadores moleculares, visto que possuem
alto grau de polimorfismo, herança co-dominante, e seu desenvolvimento e utilização são fundamentais
para estudos de caracterização e exploração genética do feijoeiro. Este trabalho visa o desenvolvimento
de microssatélites em feijão comum, a partir de uma biblioteca genômica enriquecida desenvolvida para
a variedade CAL-143 durante o projeto de pós-doutorado (FAPESP proc. 02/00752-8). Ao todo já foram
analisadas 15 microplacas (96 clones transformados em cada uma delas) de CAL-143. Dos 1440 clones
avaliados, 1002 clones (70%) se mostraram positivos, contendo um único inserto com padrão adequado.
Um total de aproximadamente 10 microplacas (96 amostras em cada uma delas) tiveram seu DNA extraído,
de acordo com protocolos do projeto AEG (Agronomical & Environmental Genomes, http://watson.fapesp.br/
AEG/agro.htm). Até o momento, 260 clones da biblioteca (% XX) foram seqüenciados, dos quais 192
clones com o “primer” SP6 e 68 clones com o “primer” T7. Das seqüências geradas, apenas 59 clones
apresentaram regiões com microssatélites, sendo que estas provêm dos clones que foram seqüenciados
com o “primer” SP6; as outras seqüências ou não apresentavam um perfil adequado para análise, ou não
possuíram regiões que apresentassem microssatélites. Essas seqüências serão analisadas utilizandose
o programa Microsat, cedido pelo Dr. Ange-Marie Risterucci, do CIRAD (Montepellier/França). O restante
da biblioteca será seqüenciada e posteriormente serão desenhados pares de “primers”, estes serão
testados quanto ao seu potencial de polimorfismo em 14 materiais contrastantes de feijão de acordo com
trabalhos prévios, a fim de serem incorporados no mapeamento de locos ligados a resistência de antrocnose
e mancha angular da população segregante IAC-UNA x CAL-143 ( FAPESP proc. 05/53819-0).
Palavras-chave: microssatélites, feijão, SSRs.
( 1 ) Aluna de Iniciação Científica, Centro de Pesquisa e Desenvolvimento de Recursos Genéticos Vegetais, (IAC), Campinas,
Caixa Postal 28, 13001-970. E-mail: julianamorini@hotmail.com;
( 2 ) Engenheiro Agrônomo, pesquisador científico; Centro de Análise e Pesquisa Tecnológica do Agronegócio dos Grãos e Fibras
(IAC)
( 3 ) Centro de Biologia Molecular e Engenharia Genética (CBMEG), UNICAMP, Campinas, SP, E-mail: anete@unicamp.br
( 4 ) Bióloga, pesquisadora científica, Centro de Pesquisa e Desenvolvimento de Recursos Genéticos Vegetais (CPDRGV/IAC),
Caixa Postal 28, 13001-970, Campinas, SP. E-mail: llasry@iac.sp.gov.br;
Apoio Financeiro: FAPESP E CNPq.
Documentos, IAC, Campinas, 79, 2007
180