vi seminário sobre pragas, doenças e plantas daninhas do ... - IAC

Teste de Metabólitos Voláteis
Foi utilizado método de placa sobreposta adaptado de MARIANO (1993), o qual consistiu,
inicialmente na transferência de um disco de 5 mm de diâmetro do fitopatógeno e outro de um dos
antagonistas para o centro das placas de petri contendo BDA. Após 24 horas a placa do antagonista
foi sobreposta pela placa contendo o fitopatógeno, e unidas por filme de PVC para impedir o escape
dos metabólitos voláteis. Para a testemunha colocou-se apenas o patógeno. As placas foram incubadas
em BOD ± 25 0 C por 7 dias na ausência de luz. Foram realizados avaliações do crescimento micelial
a cada 3 dias. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com 5 repetições
para os antagonistas e os dados avaliados pelo teste de Tukey a 5%
Teste de Metabólitos Termoestáveis
A produção de metabólitos termoestáveis foi verificada através do cultivo de antagonistas
fúngicos em meio BD (Batata Dextrose) e o isolado AP-3 em caldo nutriente, ambos por 3 dias em
agitação constante. Em seguida foram retirados 10mL de cada cultivo fúngico e adicionados em
90mL de BDA e do isolado AP-3 em 90mL de ágar nutriente. Os meios contendo os respectivos
metabólitos foram autoclavados a 120 0 C por 25 minutos e vertidos em placas de petri. Após a
solidificação, foram transferidos discos de 5mm de diâmetro dos Fusarium spp. para o centro de
cada placa. Para a testemunha foi utilizado somente BDA sem a presença de metabólitos. Foram
realizadas 2 avaliações do crescimento micelial do fitopatógeno a cada 3 dias. O delineamento
experimental foi inteiramente casualizado com 5 repetições para cada antagonista e os dados
analisados pelo teste de Tukey e 5% probabilidade.
3. RESULTADOS E DISCUSSÃO
Os resultados demonstraram, para o teste de pareamento, a inibição do crescimento micelial
do F. oxysporum frente a presença de Bacillus AP3, e Trichoderma spp. ACB04, ACB 33, ACB 84,
Saccaromyces CR-1, não apresentando diferenças significativas entre si (Figura 1a). Em relação
ao F. solani, os isolados ACB38, ACB33, ACB04, ACB39 e AP03 apresentaram melhores resultados
inibitórios quando comparados aos demais tratamentos.
Na avaliação da produção dos metabólitos termoestáveis, observou-se a ação fungitóxica do
Bacillus AP3 (em F. oxysporum e F. solani) e S. cerevisae KD1 apenas para F. solani, diferindo
significativamente entre os demais, revelando que os metabólitos produzidos, mantiveram suas atividades
mesmo após a autoclavagem (Figura 2 a e b). Em relação aos isolados de Trichoderma os resultados
obtidos estão de acordo com GHISALBERTI e ROWLAND, 1993 que relataram a produção de inúmeros
metabólitos anti-fúngicos termoestáveis de diferentes classes químicas e com ação antibiótica.
Para os metabólitos voláteis em F. oxysporum, o isolado AP3 juntamente com os Trichoderma
sp. ACB 33 e ACB38, apresentaram comportamento fungitóxico. O mesmo não ocorreu para F. solani,
onde não houve controle significativo(Figura 3 a e b). Quando os isolados de Trichoderma entraram
em contato com os fitopatógenos ocorreu uma interação com o mesmos por meio de micoparasitismo
onde foi observada a formação de um halo de inibição resultante da produção de metabólitos com
atividade biológica que inibiram o crescimento. No entanto o isolado ACB04 para F. oxysporum e os
isolados ACB38, ACB183 e KD01 para F. solani estimularam o crescimento micelial. Os dados
estão de acordo com FRIES, 1973 que relata a existência de inúmeros fungos produtores de metabólitos
voláteis capazes de estimular bem como inibir a germinação de esporos ou o crescimento de micélio,
não somente no organismo produtor, mas também de outras espécies.
Documentos, IAC, Campinas, 79, 2007
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