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em 3 dimensões. Entretanto, não será capaz de capturar microorganismos com força motriz própria, a menos que existam forças nas 3 dimensões. R F NA = 0,3 NA = 1 Pequena abertura numérica: menor componente horizontal Grande abertura numérica: maior componente horizontal menor força vertical maior força vertical Figura 26. A abertura numérica e a força vertical. Os cuidados com a falsa armadilha vão além do uso de uma objetiva com abertura numérica de alto valor. Esse valor é dado para a coleta da luz e definido pelas íris ao longo da objetivas. Do ponto de vista da luz incidindo na objetiva pelo lado da imagem só se obtém sua abertura numérica nominal quando a mesma é completamente preenchida, como mostra o esquema da Figura 27. Um feixe que incide na objetiva com diâmetro menor da que sua íris vai corresponder a um feixe focalizado com abertura menor do que a nominal. Figura 27. Falsa armadilha e o preenchimento da objetiva. 2.1.10 Microscópios Invertidos: Vantagens e Desvantagens Um outro aspecto relevante na montagem de uma pinça óptica é se o microscópio é convencional “upright” ou invertido. Na Figura 28 a temos um esquema de um microscópio convencional, onde vemos que o laser entra por cima, passa primeiramente pela objetiva e depois incide sobre uma amostra que está 30
necessariamente delimitada por uma lamínula e uma lâmina, de forma que logo a seguir já está a plataforma. Ou seja, nesse caso só cabe uma lâmina de profundidade máxima em torno de 150 µm entre a objetiva e a plataforma, lembrando que as distâncias de trabalho das objetivas usadas na pinça óptica são extremamente pequenas. Já na Figura 28 b, temos a ilustração de um microscópio invertido. Diferentemente do microscópio “upright”, agora o laser entra por baixo, encontra a objetiva e então incide sobre a amostra, tal que para podermos utilizar as objetivas de grande abertura numérica temos que inverter a lâmina para o laser passar primeiramente pela lamínula e depois pela lâmina respeitando assim os pequenos valores de distância de trabalho. A grande vantagem do microscópio invertido é o espaço considerável que há entre a lâmina e a lâmpada e condensadores, o qual nos propicia trabalhar com câmaras abertas que é bastante desejável para estudos com aplicações biológicas onde muitas vezes queremos estudar efeitos de determinadas substâncias ou também quando a experiência requer o uso micro‐manipuladores. Assim, uma boa maneira de aproveitar esse recurso e que também nos livra da tarefa de inversão de lâmina, é trocar as câmaras convencionais por uma lamínula acoplada a um O’ring. Dessa forma podemos introduzir, em conjunto com a pinça óptica, substâncias e/ou instrumentos. O uso do “O’ring” ainda traz outra vantagem, como a amostra só está delimitada pela face da lamínula, os modelos de hidrodinâmica envolvidos nos experimentos são bem mais simples do que no caso anterior do microscópio convencional onde a amostra está delimitada por duas faces. lâmina e lamínula condensador e lâmpada micromanipuladores condensador e lâmpada lâmina e “o’ ring” a. b. Figura 28. a. Microscópio convencional “upright”. b. Microscópio invertido. 31
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Ex = iωψ e , E y = 0 e E z = 0 (3
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ik iεω H = ∑ − AnmNnm − B
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2π 2π 2 2 F → e = senθcos ϕ e
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iii = 1 ; soma = 0 ; , True , iii +
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H∗ programa para o feixe gaussian
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T@n_, m_, p_D@ϕo_, λ_D := Hbn@n,
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an@n_D := Han@nD = Hmn f2@n, xaD f1
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Referências 1 Ashkin, J. Dziedzic,
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43 J. X. Cheng, A. Volkmer, X. S. X
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63 H. Felgner, O. Müller, M. Schli
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properties of stored red blood cell
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