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aumentando a reflexão no infravermelho, de modo que apenas de 8‐10% da luz do Nd:YAG é transmitida pela objetiva. Só ultimamente têm aparecido objetivas com “coating anti‐refletor” para o visível e o infravermelho simultaneamente, devido exatamente ao uso de lasers em microscopia, como microscopia confocal e pinças ópticas. Uma pinça óptica “fraca” se torna incapaz de capturar microorganismos vivos com capacidade motora, principalmente os flagelados, pois ao se debaterem acabam escapando pela direção de menor força, geralmente na vertical. O grande teste da qualidade de uma pinça é sua capacidade de capturar espermatozóides, um dos campeões entre os microorganismos flagelados, com forças da ordem de 50 pN [10]. 2.1.6 Microscópio Óptico Simples O quadro intuitivo traçado até aqui pode nos ajudar a entender a importância dos diversos componentes da montagem experimental da pinça óptica, iniciando pelo microscópio, e dentro dele, da objetiva. Nossa descrição do microscópio irá se restringir aos aspectos importantes para a operação da pinça óptica. A Figura 16 mostra um objeto e sua imagem obtida através de uma objetiva de aumento m. h ‘ X f X H Figura 16. Formação de imagem. Usando a regra da óptica geométrica de que raios que passam pelo foco saem paralelos e raios que entram paralelos passam pelo foco no plano da imagem, obtemos por semelhança de triângulos que h X H H f = → m = = (2. 4), f h X onde m é a magnificação lateral. Dada uma magnificação m, o objeto que está em foco se encontra a uma distância X = f m do foco da objetiva. Entretanto, um feixe de luz 22
paralelo típico de um laser incidindo na objetiva pelo lado oposto da imagem, será focalizado no foco da mesma objetiva, fora do plano de visão. Isso significa que as partículas capturadas estarão completamente fora de foco e não serão detectadas, assim como mostra a Figura 17. Para focalizar o feixe do laser no plano de visão devemos torná‐lo ligeiramente divergente. objetiva plano do ponto focal plano de visão formação de imagem laser focalizado pela objetiva (sem lentes) Figura 17. Plano do ponto focal e plano de visão. Isso é feito através de um telescópio, um sistema de duas lentes colocadas uma no foco da outra, conforme ilustra a Figura 18, na qual se percebe que afastando as duas lentes se obtém um feixe convergente e aproximando‐as se obtém um feixe divergente. Ele nos permite controlar a profundidade z em que o laser é focalizado. Utilizamos lentes com distância focal bem curta para ganhar sensibilidade, ou seja, um pequeno deslocamento entre as lentes com um transladador micrométrico xyz terá um efeito apreciável na posição do foco do laser. Auxiliando alguns grupos que desejavam montar seus próprios sistemas de pinças ópticas percebemos que um dos fatores que mais haviam dificultado o alinhamento foi o fato de usarem lentes de grande distância focal. Fica difícil manter o alinhamento quando é necessário mover lentes por vários cm até encontrar o foco. Do ponto de vista do alinhamento da pinça esse telescópio é o ponto crucial. 23
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π 0 m n m n′ m n m n′ 2 dP dP
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∫ * * 1 * * { } 2 2 i Fi = Re
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n+ 1 n′ + 1 ( i) ( i) [ an n bn n
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3.2.1 Aproximação da Integral Loc
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Vamos procurar, portanto, soluçõe
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Ex = iωψ e , E y = 0 e E z = 0 (3
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probabilidade de colisão. Além di
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para o caso de um feixe focalizado
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choque Processos multifótons são
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sinal coletado pela mesma objetiva
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Hiper Rayleigh, por também serem u
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fato é que, mantendo as mesmas con
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Para realizar os somatórios, escre
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A potência do laser foi medida com
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Nesse ponto vale a pena ressaltar u
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Nossos resultados mostraram que as
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7. Cálculo de Q pr Vamos agora cal
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⎧ τn n+ 1 iρ n+ 1 −iρ n iρ
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2π 2π 2 2 F → e = senθcos ϕ e
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( 2n + 1) ∞ ∞ 4π 2 * 2 π 2 nn
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iii = 1 ; soma = 0 ; , True , iii +
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H∗ programa para o feixe gaussian
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T@n_, m_, p_D@ϕo_, λ_D := Hbn@n,
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an@n_D := Han@nD = Hmn f2@n, xaD f1
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Referências 1 Ashkin, J. Dziedzic,
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43 J. X. Cheng, A. Volkmer, X. S. X
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63 H. Felgner, O. Müller, M. Schli
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properties of stored red blood cell
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