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infecções em modelos in vitro e in vivo são realizados rotineiramente com a seguinte
metodologia:
Parasitas: As formas promastigotas de Leishmania amazonensis ‐ MHOM/BR/73/M2269 ‐
são cultivadas em meio de cultura RPMI da Sigma complementado com antibióticos,
glutamina e soro fetal bovino 10% da Cultilab em temperatura de 26 o C em estufa após o
cultivo do material de lesões cutâneas de camundongos de linhagem susceptível ‐
BALB/c. A proliferação e a curva de crescimento das culturas de promastigotas são
seguidas pelas contagens em câmara de Neubauer.
Medidas com a Pinça Óptica: Cerca de um milhão de promastigotas foram diluídos em
meio RPMI com 10% de soro fetal bovino na presença de esferas de poliestireno e
aplicados em câmara de Neubauer para podermos capturar uma única leishmania sem
interferência das outras. Eles podem se capturados diretamente com a pinça óptica,
conforme mostra a Figura 110. Ao fazer isso já foi possível perceber uma mudança em
seu comportamento, tentando claramente escapar da pinça óptica, que não havia sido
observada na captura de espermatozóides. Parasitas livres passavam em volta com
velocidade constante, enquanto o capturado se debatia e usava a estratégia de encolher
seu flagelo liberando‐o repentinamente na tentativa de escapar da pinça óptica. Isso
abre a perspectiva de observar seu comportamento capturado, mas sobre condições de
um escoamento. Estamos supondo que esse parasita tenha mecanismo sensorial de
movimento e não algum capaz de perceber a radiação eletromagnética do laser, talvez
no máximo um sensor de calor por ela gerado.
a. b. c.
Figura 110. Promastigota de Leishmania amazonensis capturado na pinça óptica tentando escapar
e dobrando seu flagelo (a e b) e c. expulsando‐o repentinamente.
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