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. Lesão cutânea simples a. Ciclo evolutivo da leishmania c. Lesão cutânea difusa e. Leishmaniose mucosa d. Leishmaniose visceral Figura 109. Ciclo evolutivo e diferentes formas da leishmaniose. Em outros microorganismos ciliados e flagelados os parâmetros citados acima são mais bem estudados e medidas mais precisas são obtidas devido ao uso da pinça óptica. Por exemplo, em Escherichia coli ligadas a microesferas, o uso da pinça óptica possibilitou a análise de dezenas de bactérias individuais, os cálculos de velocidade e tempo de rotação, de força e de torque. Medidas das forças envolvidas na adesão da bactéria a superfícies com manose também foram possíveis usando a pinça óptica para manipulação. Os autores quantificaram e avaliaram as forças necessárias para a adesão e o desligamento da bactéria da superfície [69, 70]. 5.2.3. Metodologia, Resultados e Conclusões No laboratório da Dra. Selma Giorgio no Depto. de Parasitologia do Instituto de Biologia da UNICAMP, o cultivo do parasita e de várias linhagens de macrófagos e as 180
infecções em modelos in vitro e in vivo são realizados rotineiramente com a seguinte metodologia: Parasitas: As formas promastigotas de Leishmania amazonensis ‐ MHOM/BR/73/M2269 ‐ são cultivadas em meio de cultura RPMI da Sigma complementado com antibióticos, glutamina e soro fetal bovino 10% da Cultilab em temperatura de 26 o C em estufa após o cultivo do material de lesões cutâneas de camundongos de linhagem susceptível ‐ BALB/c. A proliferação e a curva de crescimento das culturas de promastigotas são seguidas pelas contagens em câmara de Neubauer. Medidas com a Pinça Óptica: Cerca de um milhão de promastigotas foram diluídos em meio RPMI com 10% de soro fetal bovino na presença de esferas de poliestireno e aplicados em câmara de Neubauer para podermos capturar uma única leishmania sem interferência das outras. Eles podem se capturados diretamente com a pinça óptica, conforme mostra a Figura 110. Ao fazer isso já foi possível perceber uma mudança em seu comportamento, tentando claramente escapar da pinça óptica, que não havia sido observada na captura de espermatozóides. Parasitas livres passavam em volta com velocidade constante, enquanto o capturado se debatia e usava a estratégia de encolher seu flagelo liberando‐o repentinamente na tentativa de escapar da pinça óptica. Isso abre a perspectiva de observar seu comportamento capturado, mas sobre condições de um escoamento. Estamos supondo que esse parasita tenha mecanismo sensorial de movimento e não algum capaz de perceber a radiação eletromagnética do laser, talvez no máximo um sensor de calor por ela gerado. a. b. c. Figura 110. Promastigota de Leishmania amazonensis capturado na pinça óptica tentando escapar e dobrando seu flagelo (a e b) e c. expulsando‐o repentinamente. 181
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Universidade Estadual de Campinas I
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Agradecimentos Gostaria de agradece
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Abstract The optical tweezers is a
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2.5.3 CCD 63 2.5.4 Filtros Super NO
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5.4.8. Equação de Stokes ou “Cr
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feixe focalizado na borda nas posi
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Para entender como um único feixe
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não ionizando o gás da lâmpada.
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objetiva e não se tem a necessidad
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laminula distância de trabalho Fig
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em 3 dimensões. Entretanto, não s
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2.1.11 O Alinhamento O procedimento
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A lamínula fecha essa “micro‐p
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Feixe inclinado inclinação Abertu
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30, 50, 2.5, 5 cm. As distâncias d
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O principal componente de um laser
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2.5 Sistema Experimental de Pinça
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maior no centro, o que é equivalen
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perderiam esse sincronismo nas volt
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2.5.2 Monocromador Nos experimentos
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sinal Raman. A solução encontrada
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Tornamos o nosso micro‐Raman conf
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Capítulo 3 Teoria Óptica Eletroma
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que está embebido. Descobrimos, ap
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i t 1. Partindo de um campo elétri
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Com o intuito de facilitar os cálc
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obtendo o produto escalar de r c
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E b [ A ( , ) Z ( ka) e A ( , ) Z (
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tempo dentro de uma esfera devido
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Estendendo essa analogia entre a ó
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m′ m′ ∗ −k ∗ ∗ dPn′
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π 0 m n m n′ m n m n′ 2 dP dP
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∫ * * 1 * * { } 2 2 i Fi = Re
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n+ 1 n′ + 1 ( i) ( i) [ an n bn n
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2 E0 2 ∞ 2π F = ε ∑ Re {(2n+
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partículas capturadas pela pinça
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3.2.1 Aproximação da Integral Loc
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2 ∂ ρ 2 ∂ ρ ∇⋅ E=−∇
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Vamos procurar, portanto, soluçõe
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Ex = iωψ e , E y = 0 e E z = 0 (3
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Nesse ponto, economizamos páginas
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k ρ+ k ρ 2 2 2 2 0 − ∞ 2 2 m
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A expansão dos campos espalhados
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probabilidade de colisão. Além di
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Intensidade (a.u.) perpendicular pa
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2π 2π 2 2 F → e = senθcos ϕ e
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( 2n + 1) ∞ ∞ 4π 2 * 2 π 2 nn
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( µω) n′+ 1 n+ 1 iρ { ( ) ( )
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e agora por último, 2 E0 2 ∞ 4π
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iii = 1 ; soma = 0 ; , True , iii +
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H∗ programa para o feixe gaussian
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T@n_, m_, p_D@ϕo_, λ_D := Hbn@n,
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an@n_D := Han@nD = Hmn f2@n, xaD f1
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Referências 1 Ashkin, J. Dziedzic,
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20 Tese de Doutorado de Gaston Este
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43 J. X. Cheng, A. Volkmer, X. S. X
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63 H. Felgner, O. Müller, M. Schli
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properties of stored red blood cell
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