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10 Giemsa sobre a gota de sangue e deixou-se agir por aproximadamente 30 minutos Lavou-se a lâmina gentilmente com água corrente para retirar o excesso do corante. 3.9.2 Preparo do esfregaço Delgado Para auxiliar o diagnostico da gota espessa, utilizou-se o esfregaço. Trabalhou-se sobre superfície plana e horizontal, escrevendo-se na área fosca de cada lâmina o mesmo número de identificação da ficha de notificação (com lápis grafite), colocamos aproximadamente cerca 10µL de sangue próximo a uma das extremidades da lâmina, colocamos outra lâmina apoiada sobre a primeira, na frente da gota de sangue, formando um ângulo de 35º a 45º, fazendo com que o sangue se espalha-se por capilaridade na borda da lâmina inclinada, despendeu-se o sangue deslocando rapidamente a segunda lâmina sobre a primeira de modo a afasta-la da posição inicial até esgotar-se o volume de sangue (delgado), secamos o esfregaço imediatamente, segurou-se a lâmina pela borda onde foi feita a distensão sanguínea e agitou-se vigorosamente com a mão, fixou-se com metanol por 5 minutos, colocou-se o corante de Giemsa sobre a gota de sangue e deixou-se agir por aproximadamente 20 minutos por fim lavou-se as lâminas gentilmente com água corrente para retirar o excesso do corante. 3.9. 3 Colheita de dados A duração de colheita de dados foi de três meses. Os dados foram colhidos por enfermeiras parteiras da triagem do Banco de Urgência da MLP, previamente treinadas para o estudo. Informações sobre os antecedentes maternos foram obtidas por meio de um questionário padronizado (APÊNDICE 2) que foi aplicado no momento da admissão ou nas primeiras 12 horas após o parto, dependendo das condições clínicas da gestante
11 (estágio do trabalho de parto, nível de consciência, etc.). Ainda no Banco de Urgência, foi colhido o sangue periférico das gestantes por punção digital para a gota espessa e esfregaço por técnicas do laboratório interno da MLP, previamente treinados para o estudo. Imediatamente após o parto, as condições de nascimento do RN foram avaliadas pela parteira utilizando (escore de Apgar no 1º e 5º minutos, peso) e do parto (tipo de parto e número de partos, gravidez única, gravidez gemelar) foram avaliadas e registradas em um formulário. Ao mesmo tempo, (2ml) de sangue da placenta foi aspirado em seringa descartável, e (2ml) de sangue foi aspirado da veia umbilical, O cordão umbilical foi limpo com álcool a 70% para evitar a mistura com sangue materno, segundo. 11 As lâminas de gota espessa e esfregaço sanguíneo foram preparadas imediatamente após a colheita por técnico previamente treinado de acordo com método padronizado segundo. 47 Cada lâmina foi identificada e após secagem foi corada com Giemsa segundo (anexo 2) Foi feita análise qualitativa das lâminas, sendo cada uma delas lida por microscopista experiente, que examinou um mínimo de 200campos antes de considerar o resultado negativo (ausência de trofozoítos ou formas assexuadas) e o controle de qualidade foi feito pelo laboratório nacional de saúde pública. Seguiram-se as técnicas laboratoriais padronizadas e validadas internacionalmente. Uma amostra aleatória foi reavaliada por um biologista experiente em malária, do centro de pesquisa Aggeu Magalhães da Fiocruz/Recife-PE Os dados clínicos do RN (presença de anemia, icterícia, prematuridade, febre e necessidade transfusão sanguínea) foram obtidos nas primeiras 12 horas de vida por um profissional capacitado (Médico) e foram registados em formulário apropriado no serviço de urgência e registados em formulário, pré-codificado para entrada de dados (APÊNDICE 2). A pesquisadora esteve diariamente na sala de partos e no berçário para controlo da qualidade das informações, e examinar os recém-nascidos.
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Gi<strong>em</strong>sa sobre a gota de sangue e deixou-se agir por aproximadamente 30 minutos<br />
Lavou-se a lâmina gentilmente com água corrente para retirar o excesso do corante.<br />
3.9.2 Preparo do esfregaço Delgado<br />
Para auxiliar o diagnostico da gota espessa, utilizou-se o esfregaço. Trabalhou-se sobre<br />
superfície plana e horizontal, escrevendo-se na área fosca de cada lâmina o mesmo<br />
número de identificação da ficha de notificação (com lápis grafite), colocamos<br />
aproximadamente cerca 10µL de sangue próximo a uma das extr<strong>em</strong>idades da lâmina,<br />
colocamos outra lâmina apoiada sobre a primeira, na frente da gota de sangue,<br />
formando um ângulo de 35º a 45º, fazendo com que o sangue se espalha-se por<br />
capilaridade na borda da lâmina inclinada, despendeu-se o sangue deslocando<br />
rapidamente a segunda lâmina sobre a primeira de modo a afasta-la da posição inicial<br />
até esgotar-se o volume de sangue (delgado), secamos o esfregaço imediatamente,<br />
segurou-se a lâmina pela borda onde foi feita a distensão sanguínea e agitou-se<br />
vigorosamente com a mão, fixou-se com metanol por 5 minutos, colocou-se o corante<br />
de Gi<strong>em</strong>sa sobre a gota de sangue e deixou-se agir por aproximadamente 20 minutos<br />
por fim lavou-se as lâminas gentilmente com água corrente para retirar o excesso do<br />
corante.<br />
3.9. 3 Colheita de dados<br />
A duração de colheita de dados foi de três meses. Os dados foram colhidos<br />
por enfermeiras parteiras da triag<strong>em</strong> do Banco de Urgência da MLP, previamente<br />
treinadas para o estudo.<br />
Informações sobre os antecedentes maternos foram obtidas por meio de um<br />
questionário padronizado (APÊNDICE 2) que foi aplicado no momento da admissão ou<br />
nas primeiras 12 horas após o parto, dependendo das condições clínicas da gestante
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