noções gerais sobre outras ciências forenses - Plano de estudos do ...

Faculdade de Medicina da Universidade do Porto
Medicina Legal / Noções Gerais sobre outras ciências forenses
Actualmente, são vários os polimorfismos de DNA com interesse médico-legal, que podem ser
estudados por PCR, como polimorfismos de sequência, AMPFLPs e loci STR. No entanto,
actualmente, só são usados estes últimos.
Das vantagens desta técnica, destaca-se o facto da PCR possuir a capacidade para efectuar a
análise de uma determinada sequência numa amostra exígua de DNA, qualquer que seja a sua
quantidade e qualidade, desde que a amostra tenha, pelo menos, uma cadeia de DNA intacta,
rodeando a região a ser amplificada. Esta sensibilidade, segundo vários autores, tem permitido a
tipagem de diferentes polimorfismos de DNA de um único cabelo, de um espermatozóide e de
células somáticas individuais. Outros autores referem ter efectuado reacções de amplificação em
DNA degradado de tecidos guardados em arquivo e fixados em formol ou embebidos em parafina,
ou ainda, extraídos de peças antigas existentes em museus ou achados arqueológicos.
Por tudo o que foi anteriormente referido, poder-se-á afirmar que a técnica de PCR se tornou um
meio precioso para a análise de regiões polimórficas, em amostras de DNA humano,
particularmente em criminalística, nos quais raramente se dispõe de DNA de alto peso molecular
em quantidades apreciáveis. Trata-se de uma metodologia muito usada na resolução de casos
médico-legais, sendo também utilizada no diagnóstico clínico e noutros ramos da ciência.
Sistemas AMPFLPs e STRs estudados por PCR
Sistemas AMPFLPs (Amplified Fragment Length Polymorphisms) são os loci VNTR, cujos alelos
possuem tamanhos moleculares, aproximadamente, de 100 a 2000 pb.
Os dois grupos de sistemas, AMPFLPs e STRs, em virtude do curto tamanho dos seus alelos, são
susceptíveis de amplificação por PCR e visualização directa dos produtos de amplificação,
embora, actualmente, apenas se usem os últimos.
Loci STR estudados por PCR
Os loci microsatélite podem definir-se como pequenas sequências de DNA (com menos de 350
pb), dispersas pelo genoma, repetidas em tandem, de 2 a 7 pb de tamanho, pelo que também são
conhecidos por loci STR (Short Tandem Repeats). Calculou-se que o genoma humano contém,
aproximadamente, 500.000 STRs, dos quais 6.000 a 10.000 são tri ou tetraméricos. Um grande
número destes loci apresenta um elevado grau de polimorfismo genético, cuja base molecular
consiste na variação do número de unidades de repetição.
Estes sistemas, devido à sua abundância no genoma humano, ao seu elevado grau de
polimorfismo e à possibilidade de serem facilmente estudados mediante técnicas de PCR,
converteram-se nos marcadores de eleição em vários campos da ciência, designadamente na
identificação genética humana.