noções gerais sobre outras ciências forenses - Plano de estudos do ...

Faculdade de Medicina da Universidade do Porto
Medicina Legal / Noções Gerais sobre outras ciências forenses
A análise do DNA com aplicação médico-legal foi usada pela primeira vez no Reino Unido, em
1985. Nos Estados Unidos a sua utilização iniciou-se em 1986, tendo sido aplicada pela primeira
vez à resolução de casos criminais em 1987, num caso de agressão sexual.
Análise do DNA
O genoma humano é constituído por cerca de 3500 milhões de pares de bases (pb).
A análise do DNA nuclear, permitiu definir que no genoma humano existem regiões que se podem
classificar do seguinte modo:
- DNA não repetitivo (polimorfismos de sequência)
- DNA moderadamente repetitivo (regiões minisatélite)
- DNA altamente repetitivo (regiões microsatélite)
Algumas sequências não codificantes (DNA não expressivo, não codificante ou heterocromatina),
cuja função biológica ainda não está perfeitamente estabelecida, encontram-se repetidas em
"tandem", isto é, uma sequência de pares de bases (pb), seguida de outra sequência idêntica e
assim sucessivamente.
Estas regiões hipervariáveis, onde existem os loci VNTR (Variable Number of Tandem Repeats),
são chamadas minisatélites se a sequência (core) é constituída por 10-70pb que se repete entre
20 e 60 vezes. Se as referidas sequências são constituídas apenas por 2-7 nucleótidos que se
repetem, também, várias vezes, as regiões são denominadas microsatélites ou loci STR (Short
Tandem Repeats).
O DNA que forma as regiões hipervariáveis (HVR-Hipervariable Regions) do genoma, proporciona
a existência de uma grande variação entre os indivíduos de uma população. Esta variação
consiste no número de vezes que a sequência (core) se repete e é variável de indivíduo para
indivíduo. Esta parte do genoma é a que tem maior interesse médico-legal.
Polimorfismos do DNA
Antes de se proceder à tipagem tem de se efectuar a extracção do DNA.
Existem vários protocolos para se efectuar a extracção do DNA. Quando não é exigida a obtenção
de DNA de alto peso molecular, utiliza-se o Chelex 100. Trata-se de uma técnica de extracção de
DNA mais rápida, fácil de executar e eficiente. O Chelex é uma resina quelante (chelating resin)
com grande afinidade para iões metálicos polivalentes, por isso previne a degradação do DNA em
presença de iões metálicos a altas temperaturas e em condições de baixa força iónica.