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Artigo
Oculares de microscópios podem ser veículos
de contaminação?
Bruna Silvério Bonato 1 , Fernanda Fagundes Castro 1 , Tatiane Cruz de Carvalho 2 , Regina Helena Pires-Gonçalves 2 ,
Carlos Henrique Gomes Martins 2, , Ana Maria Razaboni 3
1 - Graduandas do curso de Biomedicina da Universidade de Franca
2 - Pesquisadores do Laboratório de Microbiologia Aplicada – LaPeMA da Universidade de Franca, Franca, SP
3 - Docente da Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto - FORP/USP
Resumo
Introdução: A presença de microrganismos nas superfícies,
assim como a microbiota normal não oferecem
riscos ao homem, mas se houver alguma imunodepressão
esses microrganismos podem se tornar patogênicos.
Assim, objetos muito usados sem higiene e
em contato com várias pessoas podem se tornar focos
de contaminação. Um provável foco de contaminação
pode ser as oculares de microscópios óticos que estão
em contato diretamente com os olhos de profissionais e
estudantes que os utilizam em seu cotidiano. Objetivo:
Pesquisa e identificação de microrganismos presentes
em oculares de microscópios óticos de uma instituição
de ensino superior. Metodologia: Foram investigados
147 microscópios (294 oculares) em sete laboratórios
didáticos. A colheita do material foi realizada através
de swab embebido com solução salina 0,9% esterilizado,
que foi friccionado nas oculares dos microscópios
óticos e semeado nos meios de cultura (ágar Sangue,
ágar MacConkey, ágar Sabouraud com cloranfenicol
e inoculação em caldo BHI), após o isolamento das
bactérias foram realizadas provas bioquímicas convencionais
para sua identificação. Resultados: Foram
isoladas e identificadas 176 bactérias sendo 52,3%
cocos Gram-positivos e 47,7% bacilos Gram-positivos;
foram isolados também 12 fungos filamentosos;
não foram recuperadas bactérias Gram-negativas e
leveduras. Conclusão: As bactérias encontradas estão
normalmente em superfícies ambientais e pertencentes
Summary
Eyepieces of light microscopes may become
foci of contamination?
Introduction:Microorganisms present on surfaces, like
the normal microbiota, usually do not pose any risk to
humans. However, if some immunodepression occurs these
microorganisms can become pathogenic. Thus, frequently
used objects that are not cleaned and are in contact with
different persons may become foci of contamination. One
probable focus of contamination are the eyepieces of light
microscopes which are in direct contact with the eyes of
professionals and students who use these microscopes in
their daily activities. Objective: To investigate and identify
the microorganisms present on the eyepieces of light
microscopes at an institution of higher education. Methods:
A total of 147 microscopes (294 eyepieces) from seven
didactic laboratories were investigated. Material was
collected with a swab immersed in sterile 0.9% saline and
passed over the eyepieces of the microscopes, and seeded
onto different culture media (blood agar, MacConkey
agar, Sabouraud agar containing chloramphenicol, and
inoculation into BHI broth). After isolation, bacteria were
identified by conventional biochemical tests. Results: A total
of 176 bacteria were isolated and identified, including
52.3% Gram-positive cocci and 47.7% Gram-positive
bacilli. Twelve filamentous fungi were also isolated.
No Gram-negative bacteria or yeasts were recovered.
Conclusion: The bacteria identified are normally found on
environmental surfaces and belong to the normal human
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NewsLab - edição 81 - 2007

a microbiota normal humana. Destacamos a presença
do Staphylococcus aureus pertencente à microbiota
humana normal da pele, podendo ser potencialmente
patogênico dependendo da via de entrada (no caso
o olho) e a imunidade do hospedeiro.
Palavras-chave: Contaminação ambiental, microscópio,
superfície, oculares
microbiota. We emphasize the presence of Staphylococcus
aureus, which belongs to the normal human skin microbiota
but which might be potentially pathogenic depending
on the route of entry (in this case the eye) and on host
immunity.
Keywords: Environmental contamination, microscope,
surface, eyepiece
Introdução
A
microbiota normal é formada
por microrganismos que
estão presentes no hospedeiro
e que em condições normais do
organismo não são patogênicos
(12). A relação que o homem
tem com os microrganismos da
microbiota normal da pele, membrana
e mucosas, permite que
eles vivam juntos sem qualquer
efeito negativo sobre cada um dos
ciclos de vida (9).
Uma vez estabelecida, a microbiota
normal pode beneficiar
o hospedeiro prevenindo o crescimento
excessivo de microrganismos
nocivos, evitando a colonização
de micróbios potencialmente
patogênicos e competindo pelos
nutrientes, produzindo substâncias
nocivas aos micróbios
invasores e afetando algumas
condições como o pH e oxigênio
disponível (9). Quando o equilíbrio
entre a microbiota normal e
o hospedeiro é alterado pode resultar
em doença (12), ocorrendo
alterações imunológicas, permitindo
a proliferação excessiva de
bactérias e leveduras em pessoas
hígidas, além de ativar os mediadores
inflamatórios inespecíficos
provocando alterações clínicas
generalizadas. Outras alterações
são as insuficiências orgânicas,
isoladas ou múltiplas, que comprometem
as funções celulares
devido aos inúmeros distúrbios
metabólicos (4).
Teixeira & Santos (11) alertam
que a ocorrência de uma infecção
depende da virulência do microrganismo
(definida como conjunto
de recursos que os microrganismos
possuem para causar danos
ao hospedeiro, instalando-se,
sobrevivendo e multiplicandose),
ou seja, depende da sua
patogenicidade.
A doença é conseqüência
de uma infecção que pode ser
transmitida ao homem através do
contato direto e/ou indireto com
microrganismos patogênicos em
superfícies (2). Transmissão direta
é a transmissão de um agente
por contato físico entre sua fonte
e um hospedeiro suscetível; nenhum
objeto intermediário está
envolvido; pode ser pela boca
(ingestão de alimentos, água,
aspiração), trato respiratório
(inalação), olhos, mucosas e
cortes na pele. A transmissão
indireta ocorre quando o agente
de doença é transmitido de seu
reservatório a um hospedeiro
suscetível por meio de um objeto
inanimado (fômites) (9).
Bellamy et al (1), em um
estudo sobre contaminação de
superfície em ambiente doméstico,
demonstraram que todos os
ambientes estão suscetíveis a contaminação
de microrganismos em
fômites, estando relacionados com
a higiene do local. Sendo assim,
objetos que estão em contato com
várias pessoas podem possibilitar
a contaminação de superfície e
causar infecções em organismos
debilitados. Alguns estudos sugerem
uma ligação entre infecções e
superfícies contaminadas (3, 13);
outros pesquisadores sugerem
ainda que as mãos contaminadas
são um possível veículo de processos
infecciosos (6, 8).
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Esse estudo tem como objetivo
avaliar a contaminação das
oculares dos microscópios óticos
de uma Instituição de Ensino
Superior, como veículos de contaminação
dos olhos para os profissionais
e estudantes que estão
em contato com este equipamento
em seu cotidiano.
Material e Métodos
Amostragem
A amostragem foi realizada
nas oculares de microscópios
óticos dos laboratórios didáticos
de uma Instituição de Ensino Superior,
onde foram investigados
147 microscópios, totalizando
294 oculares. Os microscópios
pesquisados foram dos seguintes
laboratórios: Histologia e Patologia
(48), Biologia (20), Parasitologia
(26), Hematologia (14), Líquidos
Corporais (14), Microbiologia (17),
Laboratório de Análises Clínicas do
curso de Biomedicina (8).
Procedimento de coleta
Após as aulas práticas nos laboratórios
didáticos e após o término
das atividades do Laboratório de
Análises Clínicas, as amostras foram
colhidas utilizando-se swabs
embebidos em uma solução esterilizada
de cloreto de sódio a 0,9%
que foram friccionados nas oculares
dos microscópios óticos e,
em seguida, foram semeadas nos
meios de cultura ágar Sangue,
ágar Sabouraud com cloranfenicol
(30 mg/L), ágar Mac Conkey e inoculados
em caldo BHI (Difco Labs,
Detroit, Mich, USA). A colheita e
semeadura foram realizadas em
zona asséptica, com o auxílio de
uma lamparina.
Identificação
das bactérias (15)
Após o isolamento das bactérias,
foi realizado o Gram para
diferenciação morfotintorial. Em
seguida, já com o resultado do
Gram, foram semeadas em séries
bioquímicas adequadas, compreendendo
as seguintes provas:
• Fermentação: glicose, lactose,
sacarose, maltose, manitol e
sorbitol, xilose, manose
• Hidrólise de: gelatina, lecitina,
uréia
• Utilização de arginina
• Produção de: indol, ácido fenilpirúvico
• Testes: catalase, aglutinação,
coagulase
• Sensibilidade a antimicrobianos:
Novobiocina e Polimixina
Identificação dos fungos
Os fungos isolados foram identificados
por sua morfologia macroscópica
e microscópicas. Sendo
repicados para obtenção de
colônias gigantes para avaliação
das características macroscópicas
tanto do reverso como anverso
das colônias, e identificados pela
técnica de microcultivo em ágar
Batata (Difco Labs, Detroit, Mich,
EUA) por meio da observação das
características microscópicas (5).
Resultados e Discussão
Foram isoladas e identificadas
169 bactérias presentes
nas oculares dos microscópios
óticos após as aulas práticas
nos laboratórios didáticos e Laboratórios
de Análises Clínicas,
sendo 85 cocos Gram-positivos,
84 bacilos Gram-positivos e
também foram encontrados 14
fungos filamentosos. Não se
observou a presença de bactérias
Gram-negativas e fungos
leveduriformes.
Dos cocos Gram-positivos isolados,
identificamos as bactérias
pertencentes ao gênero Staphylococcus,
e os bacilos do gênero
Bacillus e Paenibacillus.
Os gráficos 1, 2 e 3 demonstram
o número de bactérias Grampositivas
e fungos filamentosos
encontrados nas oculares dos
microscópios óticos, resultando
o predomínio de bactérias de
origem ambiental e da microbiota
normal humana. O Staphylococcus
aureus foi isolado em dois microscópios
óticos, podendo apresentar
significado médico. Os bacilos
Gram-positivos isolados são característicos
do ambiente, os fungos
filamentosos isolados também
são característicos do ambiente,
tendo como destaque os fungos
Aspergillus niger e Curvularia sp
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Gráfico 1. Número de bactérias pertencentes ao gênero Staphylococcus isolados
de 294 oculares de microscópios óticos de uma Instituição de Ensino Superior
Gráfico 2. Bactérias pertencentes ao gênero Bacillus e Paenibacillus isolados de
294 oculares de microscópios ópticos de uma Instituição de Ensino Superior
Gráfico 3. Fungos filamentosos isolados de 294 oculares de microscópios óticos
de uma Instituição de Ensino Superior
que podem ser potencialmente
patogênicos.
Mangran et al (6) realizaram
um estudo sobre a prevenção de
infecções hospitalares e relataram
a prevalência de infecções causadas
por Staphylococcus aureus,
Escherichia coli, Enterococcus e
outros Staphylococcus coagulase
negativa, que podem ser transmitidos
por objetos inanimados.
Diante deste estudo, concluiu-se
que a contaminação pode ser originária
de hábitos higiênicos.
Souza et al (10), em seu trabalho
sobre microrganismos encontrados
em dinheiro, demonstraram
que o mesmo foi reservatório de
microrganismos. Dentre os principais
microrganismos encontrados
nesta pesquisa, destacou-se a
presença de Streptococcus sp,
Staphylococcus aureus, Enterobacter
aerogenes, Shiguella
sonnei, Escherichia coli, Pantoea
agglomerans, Hafnia alvei, Feohifomicetos,
Sporotrix schenkii, Aspergillus
flavus, Hialohifomicetos,
Candida sp e Trichophyton sp. Os
autores concluíram que é necessária
uma boa higienização das mãos
após a manipulação de dinheiro,
assim como após a manipulação
de outros objetos.
Nelson et al (7), que avaliaram
a presença de microrganismos
em telefones da sala de cirurgia,
observaram microrganismos pertencentes
à microbiota normal da
pele e microrganismos ambientais.
Estes autores sugerem que mesmo
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sendo microrganismos que não
oferecem riscos, podem vir a ser
patogênicos aos hospedeiros e conseqüentemente
nos processos de
infecções hospitalares. Assim como
os fungos filamentosos encontrados
na pesquisa de microrganismos
em oculares de microscópios que
são pertencentes ao ambiente,
mas podem ser potencialmente
patogênicos, destacando o Aspergillus
niger e a Curvularia sp.
Microrganismos da microbiota
normal da pele, das mãos e do
ambiente, podem ser patogênicos
principalmente em casos de imunodeficiência,
lesões, deficiência
das barreiras físicas do organismo,
deficiência de nutrientes e outros.
Tendo em vista a possibilidade de
infecção, realizamos este trabalho,
pois não encontramos nenhum
trabalho publicado, sendo este um
estudo voltado para a importância
da higienização dos microscópios
e das mãos dos profissionais e
estudantes que utilizam esse
equipamento. Foram encontrados,
como o esperado, microrganismos
pertencentes à microbiota normal
e microrganismos ambientais, mas
destacamos a presença do Staphylococcus
aureus que pode ser
causador de infecções. Destacouse
também a presença de fungos
filamentosos como Aspergillus
niger e Curvularia sp que podem
levar a infecções sistêmicas.
Conclusão
Com base nas condições experimentais
e dos resultados obtidos,
podemos concluir que a contaminação
polimicrobiana nas oculares
dos microscópios óticos pode ser
um veículo de contaminação aos
seus usuários.
Correspondência para:
Carlos Henrique Gomes Martins
martinsc@unifran.br
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