Oculares de microscópios podem ser veÃÂculos de ... - NewsLab
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Artigo<br />
<strong>Oculares</strong> <strong>de</strong> microscópios po<strong>de</strong>m <strong>ser</strong> veículos<br />
<strong>de</strong> contaminação?<br />
Bruna Silvério Bonato 1 , Fernanda Fagun<strong>de</strong>s Castro 1 , Tatiane Cruz <strong>de</strong> Carvalho 2 , Regina Helena Pires-Gonçalves 2 ,<br />
Carlos Henrique Gomes Martins 2, , Ana Maria Razaboni 3<br />
1 - Graduandas do curso <strong>de</strong> Biomedicina da Universida<strong>de</strong> <strong>de</strong> Franca<br />
2 - Pesquisadores do Laboratório <strong>de</strong> Microbiologia Aplicada – LaPeMA da Universida<strong>de</strong> <strong>de</strong> Franca, Franca, SP<br />
3 - Docente da Faculda<strong>de</strong> <strong>de</strong> Odontologia <strong>de</strong> Ribeirão Preto - FORP/USP<br />
Resumo<br />
Introdução: A presença <strong>de</strong> microrganismos nas superfícies,<br />
assim como a microbiota normal não oferecem<br />
riscos ao homem, mas se houver alguma imuno<strong>de</strong>pressão<br />
esses microrganismos po<strong>de</strong>m se tornar patogênicos.<br />
Assim, objetos muito usados sem higiene e<br />
em contato com várias pessoas po<strong>de</strong>m se tornar focos<br />
<strong>de</strong> contaminação. Um provável foco <strong>de</strong> contaminação<br />
po<strong>de</strong> <strong>ser</strong> as oculares <strong>de</strong> microscópios óticos que estão<br />
em contato diretamente com os olhos <strong>de</strong> profissionais e<br />
estudantes que os utilizam em seu cotidiano. Objetivo:<br />
Pesquisa e i<strong>de</strong>ntificação <strong>de</strong> microrganismos presentes<br />
em oculares <strong>de</strong> microscópios óticos <strong>de</strong> uma instituição<br />
<strong>de</strong> ensino superior. Metodologia: Foram investigados<br />
147 microscópios (294 oculares) em sete laboratórios<br />
didáticos. A colheita do material foi realizada através<br />
<strong>de</strong> swab embebido com solução salina 0,9% esterilizado,<br />
que foi friccionado nas oculares dos microscópios<br />
óticos e semeado nos meios <strong>de</strong> cultura (ágar Sangue,<br />
ágar MacConkey, ágar Sabouraud com cloranfenicol<br />
e inoculação em caldo BHI), após o isolamento das<br />
bactérias foram realizadas provas bioquímicas convencionais<br />
para sua i<strong>de</strong>ntificação. Resultados: Foram<br />
isoladas e i<strong>de</strong>ntificadas 176 bactérias sendo 52,3%<br />
cocos Gram-positivos e 47,7% bacilos Gram-positivos;<br />
foram isolados também 12 fungos filamentosos;<br />
não foram recuperadas bactérias Gram-negativas e<br />
leveduras. Conclusão: As bactérias encontradas estão<br />
normalmente em superfícies ambientais e pertencentes<br />
Summary<br />
Eyepieces of light microscopes may become<br />
foci of contamination?<br />
Introduction:Microorganisms present on surfaces, like<br />
the normal microbiota, usually do not pose any risk to<br />
humans. However, if some immuno<strong>de</strong>pression occurs these<br />
microorganisms can become pathogenic. Thus, frequently<br />
used objects that are not cleaned and are in contact with<br />
different persons may become foci of contamination. One<br />
probable focus of contamination are the eyepieces of light<br />
microscopes which are in direct contact with the eyes of<br />
professionals and stu<strong>de</strong>nts who use these microscopes in<br />
their daily activities. Objective: To investigate and i<strong>de</strong>ntify<br />
the microorganisms present on the eyepieces of light<br />
microscopes at an institution of higher education. Methods:<br />
A total of 147 microscopes (294 eyepieces) from seven<br />
didactic laboratories were investigated. Material was<br />
collected with a swab immersed in sterile 0.9% saline and<br />
passed over the eyepieces of the microscopes, and see<strong>de</strong>d<br />
onto different culture media (blood agar, MacConkey<br />
agar, Sabouraud agar containing chloramphenicol, and<br />
inoculation into BHI broth). After isolation, bacteria were<br />
i<strong>de</strong>ntified by conventional biochemical tests. Results: A total<br />
of 176 bacteria were isolated and i<strong>de</strong>ntified, including<br />
52.3% Gram-positive cocci and 47.7% Gram-positive<br />
bacilli. Twelve filamentous fungi were also isolated.<br />
No Gram-negative bacteria or yeasts were recovered.<br />
Conclusion: The bacteria i<strong>de</strong>ntified are normally found on<br />
environmental surfaces and belong to the normal human<br />
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<strong>NewsLab</strong> - edição 81 - 2007
a microbiota normal humana. Destacamos a presença<br />
do Staphylococcus aureus pertencente à microbiota<br />
humana normal da pele, po<strong>de</strong>ndo <strong>ser</strong> potencialmente<br />
patogênico <strong>de</strong>pen<strong>de</strong>ndo da via <strong>de</strong> entrada (no caso<br />
o olho) e a imunida<strong>de</strong> do hospe<strong>de</strong>iro.<br />
Palavras-chave: Contaminação ambiental, microscópio,<br />
superfície, oculares<br />
microbiota. We emphasize the presence of Staphylococcus<br />
aureus, which belongs to the normal human skin microbiota<br />
but which might be potentially pathogenic <strong>de</strong>pending<br />
on the route of entry (in this case the eye) and on host<br />
immunity.<br />
Keywords: Environmental contamination, microscope,<br />
surface, eyepiece<br />
Introdução<br />
A<br />
microbiota normal é formada<br />
por microrganismos que<br />
estão presentes no hospe<strong>de</strong>iro<br />
e que em condições normais do<br />
organismo não são patogênicos<br />
(12). A relação que o homem<br />
tem com os microrganismos da<br />
microbiota normal da pele, membrana<br />
e mucosas, permite que<br />
eles vivam juntos sem qualquer<br />
efeito negativo sobre cada um dos<br />
ciclos <strong>de</strong> vida (9).<br />
Uma vez estabelecida, a microbiota<br />
normal po<strong>de</strong> beneficiar<br />
o hospe<strong>de</strong>iro prevenindo o crescimento<br />
excessivo <strong>de</strong> microrganismos<br />
nocivos, evitando a colonização<br />
<strong>de</strong> micróbios potencialmente<br />
patogênicos e competindo pelos<br />
nutrientes, produzindo substâncias<br />
nocivas aos micróbios<br />
invasores e afetando algumas<br />
condições como o pH e oxigênio<br />
disponível (9). Quando o equilíbrio<br />
entre a microbiota normal e<br />
o hospe<strong>de</strong>iro é alterado po<strong>de</strong> resultar<br />
em doença (12), ocorrendo<br />
alterações imunológicas, permitindo<br />
a proliferação excessiva <strong>de</strong><br />
bactérias e leveduras em pessoas<br />
hígidas, além <strong>de</strong> ativar os mediadores<br />
inflamatórios inespecíficos<br />
provocando alterações clínicas<br />
generalizadas. Outras alterações<br />
são as insuficiências orgânicas,<br />
isoladas ou múltiplas, que comprometem<br />
as funções celulares<br />
<strong>de</strong>vido aos inúmeros distúrbios<br />
metabólicos (4).<br />
Teixeira & Santos (11) alertam<br />
que a ocorrência <strong>de</strong> uma infecção<br />
<strong>de</strong>pen<strong>de</strong> da virulência do microrganismo<br />
(<strong>de</strong>finida como conjunto<br />
<strong>de</strong> recursos que os microrganismos<br />
possuem para causar danos<br />
ao hospe<strong>de</strong>iro, instalando-se,<br />
sobrevivendo e multiplicandose),<br />
ou seja, <strong>de</strong>pen<strong>de</strong> da sua<br />
patogenicida<strong>de</strong>.<br />
A doença é conseqüência<br />
<strong>de</strong> uma infecção que po<strong>de</strong> <strong>ser</strong><br />
transmitida ao homem através do<br />
contato direto e/ou indireto com<br />
microrganismos patogênicos em<br />
superfícies (2). Transmissão direta<br />
é a transmissão <strong>de</strong> um agente<br />
por contato físico entre sua fonte<br />
e um hospe<strong>de</strong>iro suscetível; nenhum<br />
objeto intermediário está<br />
envolvido; po<strong>de</strong> <strong>ser</strong> pela boca<br />
(ingestão <strong>de</strong> alimentos, água,<br />
aspiração), trato respiratório<br />
(inalação), olhos, mucosas e<br />
cortes na pele. A transmissão<br />
indireta ocorre quando o agente<br />
<strong>de</strong> doença é transmitido <strong>de</strong> seu<br />
re<strong>ser</strong>vatório a um hospe<strong>de</strong>iro<br />
suscetível por meio <strong>de</strong> um objeto<br />
inanimado (fômites) (9).<br />
Bellamy et al (1), em um<br />
estudo sobre contaminação <strong>de</strong><br />
superfície em ambiente doméstico,<br />
<strong>de</strong>monstraram que todos os<br />
ambientes estão suscetíveis a contaminação<br />
<strong>de</strong> microrganismos em<br />
fômites, estando relacionados com<br />
a higiene do local. Sendo assim,<br />
objetos que estão em contato com<br />
várias pessoas po<strong>de</strong>m possibilitar<br />
a contaminação <strong>de</strong> superfície e<br />
causar infecções em organismos<br />
<strong>de</strong>bilitados. Alguns estudos sugerem<br />
uma ligação entre infecções e<br />
superfícies contaminadas (3, 13);<br />
outros pesquisadores sugerem<br />
ainda que as mãos contaminadas<br />
são um possível veículo <strong>de</strong> processos<br />
infecciosos (6, 8).<br />
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<strong>NewsLab</strong> - edição 81 - 2007
Esse estudo tem como objetivo<br />
avaliar a contaminação das<br />
oculares dos microscópios óticos<br />
<strong>de</strong> uma Instituição <strong>de</strong> Ensino<br />
Superior, como veículos <strong>de</strong> contaminação<br />
dos olhos para os profissionais<br />
e estudantes que estão<br />
em contato com este equipamento<br />
em seu cotidiano.<br />
Material e Métodos<br />
Amostragem<br />
A amostragem foi realizada<br />
nas oculares <strong>de</strong> microscópios<br />
óticos dos laboratórios didáticos<br />
<strong>de</strong> uma Instituição <strong>de</strong> Ensino Superior,<br />
on<strong>de</strong> foram investigados<br />
147 microscópios, totalizando<br />
294 oculares. Os microscópios<br />
pesquisados foram dos seguintes<br />
laboratórios: Histologia e Patologia<br />
(48), Biologia (20), Parasitologia<br />
(26), Hematologia (14), Líquidos<br />
Corporais (14), Microbiologia (17),<br />
Laboratório <strong>de</strong> Análises Clínicas do<br />
curso <strong>de</strong> Biomedicina (8).<br />
Procedimento <strong>de</strong> coleta<br />
Após as aulas práticas nos laboratórios<br />
didáticos e após o término<br />
das ativida<strong>de</strong>s do Laboratório <strong>de</strong><br />
Análises Clínicas, as amostras foram<br />
colhidas utilizando-se swabs<br />
embebidos em uma solução esterilizada<br />
<strong>de</strong> cloreto <strong>de</strong> sódio a 0,9%<br />
que foram friccionados nas oculares<br />
dos microscópios óticos e,<br />
em seguida, foram semeadas nos<br />
meios <strong>de</strong> cultura ágar Sangue,<br />
ágar Sabouraud com cloranfenicol<br />
(30 mg/L), ágar Mac Conkey e inoculados<br />
em caldo BHI (Difco Labs,<br />
Detroit, Mich, USA). A colheita e<br />
semeadura foram realizadas em<br />
zona asséptica, com o auxílio <strong>de</strong><br />
uma lamparina.<br />
I<strong>de</strong>ntificação<br />
das bactérias (15)<br />
Após o isolamento das bactérias,<br />
foi realizado o Gram para<br />
diferenciação morfotintorial. Em<br />
seguida, já com o resultado do<br />
Gram, foram semeadas em séries<br />
bioquímicas a<strong>de</strong>quadas, compreen<strong>de</strong>ndo<br />
as seguintes provas:<br />
• Fermentação: glicose, lactose,<br />
sacarose, maltose, manitol e<br />
sorbitol, xilose, manose<br />
• Hidrólise <strong>de</strong>: gelatina, lecitina,<br />
uréia<br />
• Utilização <strong>de</strong> arginina<br />
• Produção <strong>de</strong>: indol, ácido fenilpirúvico<br />
• Testes: catalase, aglutinação,<br />
coagulase<br />
• Sensibilida<strong>de</strong> a antimicrobianos:<br />
Novobiocina e Polimixina<br />
I<strong>de</strong>ntificação dos fungos<br />
Os fungos isolados foram i<strong>de</strong>ntificados<br />
por sua morfologia macroscópica<br />
e microscópicas. Sendo<br />
repicados para obtenção <strong>de</strong><br />
colônias gigantes para avaliação<br />
das características macroscópicas<br />
tanto do reverso como anverso<br />
das colônias, e i<strong>de</strong>ntificados pela<br />
técnica <strong>de</strong> microcultivo em ágar<br />
Batata (Difco Labs, Detroit, Mich,<br />
EUA) por meio da ob<strong>ser</strong>vação das<br />
características microscópicas (5).<br />
Resultados e Discussão<br />
Foram isoladas e i<strong>de</strong>ntificadas<br />
169 bactérias presentes<br />
nas oculares dos microscópios<br />
óticos após as aulas práticas<br />
nos laboratórios didáticos e Laboratórios<br />
<strong>de</strong> Análises Clínicas,<br />
sendo 85 cocos Gram-positivos,<br />
84 bacilos Gram-positivos e<br />
também foram encontrados 14<br />
fungos filamentosos. Não se<br />
ob<strong>ser</strong>vou a presença <strong>de</strong> bactérias<br />
Gram-negativas e fungos<br />
leveduriformes.<br />
Dos cocos Gram-positivos isolados,<br />
i<strong>de</strong>ntificamos as bactérias<br />
pertencentes ao gênero Staphylococcus,<br />
e os bacilos do gênero<br />
Bacillus e Paenibacillus.<br />
Os gráficos 1, 2 e 3 <strong>de</strong>monstram<br />
o número <strong>de</strong> bactérias Grampositivas<br />
e fungos filamentosos<br />
encontrados nas oculares dos<br />
microscópios óticos, resultando<br />
o predomínio <strong>de</strong> bactérias <strong>de</strong><br />
origem ambiental e da microbiota<br />
normal humana. O Staphylococcus<br />
aureus foi isolado em dois microscópios<br />
óticos, po<strong>de</strong>ndo apresentar<br />
significado médico. Os bacilos<br />
Gram-positivos isolados são característicos<br />
do ambiente, os fungos<br />
filamentosos isolados também<br />
são característicos do ambiente,<br />
tendo como <strong>de</strong>staque os fungos<br />
Aspergillus niger e Curvularia sp<br />
<strong>NewsLab</strong> - edição 81 - 2007<br />
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Gráfico 1. Número <strong>de</strong> bactérias pertencentes ao gênero Staphylococcus isolados<br />
<strong>de</strong> 294 oculares <strong>de</strong> microscópios óticos <strong>de</strong> uma Instituição <strong>de</strong> Ensino Superior<br />
Gráfico 2. Bactérias pertencentes ao gênero Bacillus e Paenibacillus isolados <strong>de</strong><br />
294 oculares <strong>de</strong> microscópios ópticos <strong>de</strong> uma Instituição <strong>de</strong> Ensino Superior<br />
Gráfico 3. Fungos filamentosos isolados <strong>de</strong> 294 oculares <strong>de</strong> microscópios óticos<br />
<strong>de</strong> uma Instituição <strong>de</strong> Ensino Superior<br />
que po<strong>de</strong>m <strong>ser</strong> potencialmente<br />
patogênicos.<br />
Mangran et al (6) realizaram<br />
um estudo sobre a prevenção <strong>de</strong><br />
infecções hospitalares e relataram<br />
a prevalência <strong>de</strong> infecções causadas<br />
por Staphylococcus aureus,<br />
Escherichia coli, Enterococcus e<br />
outros Staphylococcus coagulase<br />
negativa, que po<strong>de</strong>m <strong>ser</strong> transmitidos<br />
por objetos inanimados.<br />
Diante <strong>de</strong>ste estudo, concluiu-se<br />
que a contaminação po<strong>de</strong> <strong>ser</strong> originária<br />
<strong>de</strong> hábitos higiênicos.<br />
Souza et al (10), em seu trabalho<br />
sobre microrganismos encontrados<br />
em dinheiro, <strong>de</strong>monstraram<br />
que o mesmo foi re<strong>ser</strong>vatório <strong>de</strong><br />
microrganismos. Dentre os principais<br />
microrganismos encontrados<br />
nesta pesquisa, <strong>de</strong>stacou-se a<br />
presença <strong>de</strong> Streptococcus sp,<br />
Staphylococcus aureus, Enterobacter<br />
aerogenes, Shiguella<br />
sonnei, Escherichia coli, Pantoea<br />
agglomerans, Hafnia alvei, Feohifomicetos,<br />
Sporotrix schenkii, Aspergillus<br />
flavus, Hialohifomicetos,<br />
Candida sp e Trichophyton sp. Os<br />
autores concluíram que é necessária<br />
uma boa higienização das mãos<br />
após a manipulação <strong>de</strong> dinheiro,<br />
assim como após a manipulação<br />
<strong>de</strong> outros objetos.<br />
Nelson et al (7), que avaliaram<br />
a presença <strong>de</strong> microrganismos<br />
em telefones da sala <strong>de</strong> cirurgia,<br />
ob<strong>ser</strong>varam microrganismos pertencentes<br />
à microbiota normal da<br />
pele e microrganismos ambientais.<br />
Estes autores sugerem que mesmo<br />
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<strong>NewsLab</strong> - edição 81 - 2007
sendo microrganismos que não<br />
oferecem riscos, po<strong>de</strong>m vir a <strong>ser</strong><br />
patogênicos aos hospe<strong>de</strong>iros e conseqüentemente<br />
nos processos <strong>de</strong><br />
infecções hospitalares. Assim como<br />
os fungos filamentosos encontrados<br />
na pesquisa <strong>de</strong> microrganismos<br />
em oculares <strong>de</strong> microscópios que<br />
são pertencentes ao ambiente,<br />
mas po<strong>de</strong>m <strong>ser</strong> potencialmente<br />
patogênicos, <strong>de</strong>stacando o Aspergillus<br />
niger e a Curvularia sp.<br />
Microrganismos da microbiota<br />
normal da pele, das mãos e do<br />
ambiente, po<strong>de</strong>m <strong>ser</strong> patogênicos<br />
principalmente em casos <strong>de</strong> imuno<strong>de</strong>ficiência,<br />
lesões, <strong>de</strong>ficiência<br />
das barreiras físicas do organismo,<br />
<strong>de</strong>ficiência <strong>de</strong> nutrientes e outros.<br />
Tendo em vista a possibilida<strong>de</strong> <strong>de</strong><br />
infecção, realizamos este trabalho,<br />
pois não encontramos nenhum<br />
trabalho publicado, sendo este um<br />
estudo voltado para a importância<br />
da higienização dos microscópios<br />
e das mãos dos profissionais e<br />
estudantes que utilizam esse<br />
equipamento. Foram encontrados,<br />
como o esperado, microrganismos<br />
pertencentes à microbiota normal<br />
e microrganismos ambientais, mas<br />
<strong>de</strong>stacamos a presença do Staphylococcus<br />
aureus que po<strong>de</strong> <strong>ser</strong><br />
causador <strong>de</strong> infecções. Destacouse<br />
também a presença <strong>de</strong> fungos<br />
filamentosos como Aspergillus<br />
niger e Curvularia sp que po<strong>de</strong>m<br />
levar a infecções sistêmicas.<br />
Conclusão<br />
Com base nas condições experimentais<br />
e dos resultados obtidos,<br />
po<strong>de</strong>mos concluir que a contaminação<br />
polimicrobiana nas oculares<br />
dos microscópios óticos po<strong>de</strong> <strong>ser</strong><br />
um veículo <strong>de</strong> contaminação aos<br />
seus usuários.<br />
Correspondência para:<br />
Carlos Henrique Gomes Martins<br />
martinsc@unifran.br<br />
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