Dental Press

[ artigo original ] Análise do nível de sujidade e sua interferência no processo de esterilização de limas endodônticas através da microscopia eletrônica de varredura e teste microbiológico
Análise microbiológica da
contaminação das limas
Todos os procedimentos foram realizados sob condições
rigorosas de assepsia, no interior de uma cabine
de fluxo laminar. Cada lima endodôntica foi removida do
tubo plástico de Eppendorf com uma pinça clínica esterilizada
e, então, introduzida num tubo de vidro contendo
meio de cultura líquido BHI (Brain Heart Infusion, Himedia,
Curitiba, PR, Brasil). Em seguida, a mesma foi removida
e inserida em um tubo de ensaio contendo meio
líquido Tioglicolato (Himedia, Curitiba, PR, Brasil). Como
controle negativo, foram utilizados dois tubos de meio
de cultura líquido BHI e Tioglicolato, que não receberam
nenhuma amostra. O controle positivo foi realizado
através da inoculação de cepas de periodontopatógenos
provenientes de amostras clínicas e isolados de Enterococcus
spp. Os tubos foram encubados em estufa microbiológica,
na presença de oxigênio, em temperatura de
37°C por 72 horas. A presença de microrganismos foi
confirmada pela observação de turvação do meio de cultura
líquido após 24, 28 ou 72 horas, sendo que as amostras
negativas seriam aquelas que não provocassem alteração
no meio de cultura, enquanto as amostras positivas
seriam aquelas que provocassem turvação do mesmo.
Para comprovar a esterilidade das limas, após a
observação da presença ou ausência de turbidez nos
meios líquidos, foi feita a inoculação em meio de cultura
sólido. Uma alíquota de 10µl de BHI foi inoculada sobre
a superfície do meio de cultura (ágar simples), deixada
secar e incubada em aerobiose a 37ºC. O mesmo procedimento
foi executado com o Tioglicolato de Sódio,
porém as placas foram incubadas em microaerofilia
pelo método da chama da vela.
Resultados
Os resultados mostraram que no Grupo 1 as limas
endodônticas apresentaram diferentes graus de sujidade
após a realização do protocolo de limpeza das mesmas
(Fig. 1), apresentando, na maioria das vezes, uma
superfície com grande quantidade de resíduos (Gráf. 1).
Além disso, os resultados mostraram que não houve
presença de crescimento bacteriano na superfície das limas
endodônticas nos períodos de 24, 48 e 72 horas após
a incubação, tanto em meio BHI como no meio Tioglicolato,
exceto o controle positivo, onde houve a presença de
crescimento bacteriano em todos os períodos de observação
e em ambos os meios de cultura (Gráf. 2, 3).
A
C
D
Figura 1. Escores para a determinação da quantidade de sujidades na
superfície de limas endodônticas: A) Escore 1 - ausência de resíduos
na superfície da lima; B) Escore 2 - superfície da lima praticamente limpa,
ou seja, apresentando pequena quantidade de resíduos; C) Escore
3 - superfície da lima apresentando média quantidade de resíduos; e
D) Escore 4 - superfície da lima com grande quantidade de resíduos.
8
7
6
5
4
3
2
1
0
Gráfico 1. Avaliação do grau de contaminação das limas endodônticas.
25
20
15
10
5
0
25
20
15
10
5
0
Grau 1
24 horas
BHI (-)
24 horas
TGC (-)
B
Grau 2 Grau 3 Grau 4
BHI (+)
TGC (+)
48 horas
48 horas
72 horas
Gráfico 2. Presença/ausência de crescimento bacteriano na superfície
de limas endodônticas em meio de cultura BHI.
72 horas
Gráfico 3. Presença/ausência de crescimento bacteriano na superfície
de limas endodônticas em meio de cultura Tioglicolato.
© 2011 Dental Press Endodontics 84
Dental Press Endod. 2011 apr-june;1(1):82-6