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[ artigo original ] Efeito antimicrobiano de diferentes substâncias químicas associadas ao preparo mecânico e da medicação intracanal em dentes de cães portadores de lesões periapicais induzidas Processamento laboratorial Os tubos tipo Eppendorf contendo as amostras foram imediatamente transferidos ao Laboratório de Microbiologia Endodôntica para o processamento microbiológico. No interior da câmara de anaerobiose (Don Whitley Scientific, Bradford, UK), os tubos foram agitados utilizando o vortex (MA 162, Marconi, São Paulo, SP) por 60 segundos para facilitar a dispersão dos microrganismos. Em seguida, foram realizadas diluições seriadas a 1/10, 1/100, 1/1.000 e 1/10.000, utilizando Fastidious Anaerobe Broth (FAB, Lab M, Bury, UK). Foram inoculados 50µL da amostra armazenada em VMGA III, sem diluição e das diluições 1/100 e 1/10.000 em placas pré-reduzidas contendo Fastidious Anaerobe Ágar (FAA, Lab M, Bury, UK) + 5% de sangue de carneiro desfibrinado + 600μL de Menadiona 1mg/l (Vitamin K3; 2-Methyl-1,4-naphthoquinone – SIGMA M5625) + 600μl de Hemina 1mg/l (Hemin Bovine Minimum 80% – SIGMA H5533) as quais foram incubadas na câmara de anaerobiose a 37ºC, numa atmosfera de 10% H 2 , 10% CO 2 e 80% N 2 até 14 dias, para permitir a detecção de microrganismos anaeróbios estritos de crescimento lento. Foram também inoculados 50μl da amostra original em uma placa de Brain Heart Infusion (BHI, Oxoid, Basingstoke, UK) + 5% de sangue de carneiro desfibrinado, a qual foi incubada aerobicamente em estufa a 37°C por 2 dias, para permitir o crescimento de microrganismos aeróbios ou facultativos. Após a incubação, o valor total de UFC foi contado utilizando-se uma lupa com ampliação de 16x (Zeiss, Oberkoren, Alemanha). Caracterização microbiológica A caracterização preliminar das espécies microbianas foi baseada nas características das colônias (ou seja, tamanho, cor, forma, altura, borda, superfície, textura, consistência, brilho e hemólise) visualizadas sob lupa estereoscópica (Lambda Let 2, instruments Co., Hong Kong). As bactérias isoladas foram purificadas através de subcultura. A coloração de Gram e os requerimentos gasosos foram estabelecidos após verificação do crescimento microbiano em aerobiose e anaerobiose. Baseados nas características de colônias microbianas, na coloração de Gram e nos requerimentos gasosos, foi possível determinar o perfil da microbiota dos canais radiculares em momentos diferentes (s1, s2, s3). Forma de análise dos resultados Foram realizadas comparações estatísticas de todos os grupos (I a V) nos mesmos momentos de amostragem (s1, s2, s3) e entre s1, s2 e s3 em cada % Redução bacteriana 100% 99,5% d d c c c c c d s2 s3 99% 98,5% 98% 97,5% 97% 96,5% 96% 95,5% a* b 95% Solução Salina Gel Natrosol 2,5% NaOCI CHX-gel 2% CHX-solução 2% Figura 1. Valores percentuais médios de redução bacteriana (UFC) das amostras do canal radicular obtida após instrumentação (s2) e após a medicação (s3). *Letras diferentes representam diferenças do ponto de vista estatístico (P
Martinho FC, Cintra LTA, Zaia AA, Ferraz CCR, Almeida JFA, Gomes BPFA grupo, utilizando o teste Kruskall-Wallis para dados não-paramétricos. Quando foram encontradas diferenças significativas no teste de Kruskall-Wallis, realizou-se com o teste de Mann-Whitney as comparações a cada dois grupos, para demonstrar onde as diferenças foram localizadas. O nível de significância considerado foi de 5% (P
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