Dental Press
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[ artigo original ] Efeito antimicrobiano de diferentes substâncias químicas associadas ao preparo mecânico e da medicação intracanal em dentes de cães portadores de lesões periapicais induzidas<br />
Processamento laboratorial<br />
Os tubos tipo Eppendorf contendo as amostras foram<br />
imediatamente transferidos ao Laboratório de<br />
Microbiologia Endodôntica para o processamento microbiológico.<br />
No interior da câmara de anaerobiose<br />
(Don Whitley Scientific, Bradford, UK), os tubos foram<br />
agitados utilizando o vortex (MA 162, Marconi, São<br />
Paulo, SP) por 60 segundos para facilitar a dispersão<br />
dos microrganismos. Em seguida, foram realizadas diluições<br />
seriadas a 1/10, 1/100, 1/1.000 e 1/10.000, utilizando<br />
Fastidious Anaerobe Broth (FAB, Lab M, Bury,<br />
UK). Foram inoculados 50µL da amostra armazenada<br />
em VMGA III, sem diluição e das diluições 1/100 e<br />
1/10.000 em placas pré-reduzidas contendo Fastidious<br />
Anaerobe Ágar (FAA, Lab M, Bury, UK) + 5% de sangue<br />
de carneiro desfibrinado + 600μL de Menadiona 1mg/l<br />
(Vitamin K3; 2-Methyl-1,4-naphthoquinone – SIGMA<br />
M5625) + 600μl de Hemina 1mg/l (Hemin Bovine Minimum<br />
80% – SIGMA H5533) as quais foram incubadas<br />
na câmara de anaerobiose a 37ºC, numa atmosfera de<br />
10% H 2<br />
, 10% CO 2<br />
e 80% N 2<br />
até 14 dias, para permitir<br />
a detecção de microrganismos anaeróbios estritos de<br />
crescimento lento.<br />
Foram também inoculados 50μl da amostra original<br />
em uma placa de Brain Heart Infusion (BHI, Oxoid, Basingstoke,<br />
UK) + 5% de sangue de carneiro desfibrinado,<br />
a qual foi incubada aerobicamente em estufa a 37°C por<br />
2 dias, para permitir o crescimento de microrganismos<br />
aeróbios ou facultativos.<br />
Após a incubação, o valor total de UFC foi contado<br />
utilizando-se uma lupa com ampliação de 16x (Zeiss,<br />
Oberkoren, Alemanha).<br />
Caracterização microbiológica<br />
A caracterização preliminar das espécies microbianas<br />
foi baseada nas características das colônias (ou seja,<br />
tamanho, cor, forma, altura, borda, superfície, textura,<br />
consistência, brilho e hemólise) visualizadas sob lupa<br />
estereoscópica (Lambda Let 2, instruments Co., Hong<br />
Kong). As bactérias isoladas foram purificadas através<br />
de subcultura. A coloração de Gram e os requerimentos<br />
gasosos foram estabelecidos após verificação do crescimento<br />
microbiano em aerobiose e anaerobiose.<br />
Baseados nas características de colônias microbianas,<br />
na coloração de Gram e nos requerimentos gasosos,<br />
foi possível determinar o perfil da microbiota dos<br />
canais radiculares em momentos diferentes (s1, s2, s3).<br />
Forma de análise dos resultados<br />
Foram realizadas comparações estatísticas de<br />
todos os grupos (I a V) nos mesmos momentos de<br />
amostragem (s1, s2, s3) e entre s1, s2 e s3 em cada<br />
% Redução bacteriana<br />
100%<br />
99,5%<br />
d<br />
d<br />
c c c c c<br />
d<br />
s2<br />
s3<br />
99%<br />
98,5%<br />
98%<br />
97,5%<br />
97%<br />
96,5%<br />
96%<br />
95,5%<br />
a*<br />
b<br />
95%<br />
Solução Salina Gel Natrosol 2,5% NaOCI CHX-gel 2% CHX-solução 2%<br />
Figura 1. Valores percentuais médios de redução bacteriana (UFC) das amostras do canal radicular obtida após instrumentação (s2) e após a medicação<br />
(s3). *Letras diferentes representam diferenças do ponto de vista estatístico (P