PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO – MESTRADO EM ... - Unisc

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frasco de vidro seco e pré-pesado. A fração lipídica foi pesada e a quantidade de
lipídios totais foi determinada em % (LB) de biomassa seca (teor de óleo) e em
miligramas de lipídio por litro de cultura microalgais (LC) de acordo com as
equações:
( F F
L ). 2 1
100
B
Eq. 2
m
L . B
BL
LC
Eq. 3
100
LB = lipídios totais (em % de biomassa liofilizada);
LC = lipídios totais (em mg por litro de cultura microalgais);
F1 = massa do frasco vazio (mg) ;
F2 = massa do frasco + lipídios totais (mg);
m = massa da amostra de biomassa liofilizada (mg);
BL = quantidade de biomassa seca por litro de cultura microalgais (mg L -1 ).
Após foi realizado o método de derivatização, o qual utilizou 0,1g do óleo em
um balão de fundo redondo de 125 mL. Neste, foi adicionado uma solução
metanólica (hidróxido de sódio e metanol na proporção de 1:50). A solução foi
aquecida a uma temperatura de aproximadamente 60ºC em refluxo durante 20
minutos. Quando não foi mais possível a observação de gotas de óleo no balão,
foram adicionados 7 mL de uma solução de trifluoreto de boro-metanol
(BF3/metanol), gota a gota, através do condensador e deixado em refluxo por mais 4
minutos. A seguir foi adicionado via condensador 5 mL de heptano e deixado em
refluxo por mais 2 minutos.
Após alcançar a temperatura ambiente, foi adicionada uma solução saturada
de NaCl. O balão foi levemente agitado. A fase superior da amostra foi coletada em
um tubo de ensaio e no mesmo, foi adicionada uma ponta de espátula de sulfato de
sódio anidro, o qual foi previamente ativado na estufa à 100ºC durante uma hora. O
extrato foi dissolvido com heptano e submetido à análise cromatográfica.