PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO – MESTRADO EM ... - Unisc

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4.11.3 Tempo de cultivo (T)
Este parâmetro foi determinado pelo número de dias transcorridos entre o
início do cultivo até o dia em que foi alcançada a densidade celular máxima.
4.11.4 Densidade celular máxima (DCM)
Este parâmetro foi definido como o máximo valor obtido em número de células
por mililitro, antes de a cultura alcançar a fase estacionária da curva de crescimento,
independentemente do tempo transcorrido desde o início do cultivo.
4.11.5 Análise cromatográfica do óleo extraído da biomassa de
microalgas produzido no sistema misto.
A extração dos lipídios de microalgas foi realizada conforme metodologia
descrita por Gressler (2011). Foram pesados 1,0 g de amostra de microalga
liofilizada em tubos de ensaio de 12 mL. Em seguida, adicionou-se 3 mL de um
mistura de CHCl 3 /CH 3 OH (2:1 v/v) e 10 μL de uma solução de butil hidróxi tolueno
(BHT). A seguir, as amostras foram submetidas ao ultrassom em um sonicador (USC
700, frequência 55 Hz) em banho de gelo por 3 ciclos de 15 min cada.
Posteriormente, as amostras foram incubadas por 24 h a 4 °C e protegidas da luz
(embrulhadas com papel alumínio para prevenir a fotoxidação das amostras) para
posterior extração dos lipídios. Após, as amostras foram novamente submetidas por
3 ciclos de 15 minutos cada e centrifugadas por 10 minutos sendo que o
sobrenadante foi recuperado com uma pipeta Pasteur e transferido a outro tubo
reservado. Foram adicionados 2 mL de água destilada e 1 mL de clorofórmio ao tubo
reservado.
As amostras foram mais uma vez centrifugadas; a fase inferior (clorofórmio:
lipídio) foi recuperada, com uma pipeta de Pasteur, e transferida para um frasco de
vidro pré-pesado. A fase aquosa foi lavada com 1 mL de clorofórmio e centrifugada
novamente por 10 min. Então, a fase inferior foi recuperada e transferida para o