PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO – MESTRADO EM ... - Unisc

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4.10.2. Os erlenmeyers foram incubados por 7 dias à temperatura de 30 °C em
agitador orbital, após o sobrenadante foi filtrado e transferido para erlenmeyers de
250 mL previamente esterilizados.
4.10.4 Processo fermentativo
Para o ensaio de fermentação alcoólica foi utilizada a cepa de Saccharomyces
cerevisiae liofilizada Fleischmann® adquirida comercialmente. Foram transferidas 3
g de levedura para um erlenmeyer de 250 mL contendo o substrato preparado no
item anterior e incubado em estufa por 7 dias a temperatura de 30ºC
4.10.5 Determinação de produção de etanol utilizando GC-MS e
acessório para Headspace
A determinação de bioetanol foi realizada usando cromatografia gasosa
(Shimadzu QP 2010 Plus) equipado com detector de massas e auto injetor do tipo
headspace usando uma seringa própria. Num frasco de vidro com capacidade de 10
mL, adicionou- se 2 mL da amostra do material fermentado. Este frasco foi lacrado e
incubado por 10 min a temperatura de 80 ºC. Após este período, a fase gasosa foi
injetada no cromatógrafo em volume de 500 µL. As condições de aquecimento da
coluna DB5 MS (30m x 0,25 mm x 0,25 µm) iniciaram em 50ºC (0,1min) aquecendo
até 100ºC (4ºC min -1 ); no detector de massas a temperatura da fonte de ionização e
a temperatura de interface foram de 280ºC e a injeção foi do tipo splitless e a
detecção foi no modo SCAN.
4.11 Análise do crescimento das microalgas no sistema misto
Para acompanhar o desenvolvimento da cultura foram avaliadas a densidade
celular, pH, condutividade e a velocidade de crescimento, diariamente.