Mycoplasma hominis e Ureaplasma sp. em amostras do trato ...

dos para analisar a relação entre o número de microrganismos
isolados e seu papel no quadro clínico, dependem da
amostra biológica estudada. De maneira geral são considerados
significantes valores de concentração compreendidos
entre 10 3 e 10 4 UAC/mL (Raddi et al., 1989). Além da cultura,
M. hominis e Ureaplasma sp. podem ser detectados por
técnicas imunológicas, como as reações imunoenzimáticas
(Elisa) e de biologia molecular, como a reação em cadeia da
polimerase (PCR). Entretanto, estas técnicas apresentam-se
menos viáveis para os laboratórios clínicos devido à complexidade
metodológica e ao alto custo de implantação.
Apesar das dificuldades de se correlacionar o isolamento
de M. hominis e Ureaplasma sp. em amostras genitais e a
etiologia de infecções neste sítio anatômico, a detecção
destes microrganismos é de extrema importância, principalmente
por estarem envolvidos em doenças graves, especialmente
no recém-nascido. Estas espécies assumem
papel importante mesmo quando envolvidos em doenças
consideradas de menor gravidade, como as vaginoses e
uretrites, levando-se em conta os desconfortos gerados, as
possíveis complicações conseqüentes destes distúrbios e a
possibilidade de transmissão sexual. A ocorrência de micoplasmas
em amostras genitais constitui-se um problema de
saúde pública gerando a necessidade de cuidados médicos
e tratamento adequados. Desta forma, o presente trabalho
teve como objetivo avaliar a ocorrência, em concentrações
clinicamente significantes, de M. hominis e Ureaplasma
sp. em pacientes atendidos no Laboratório de Ensino e Pesquisa
em Análises Clínicas (LEPAC) da Universidade Estadual
de Maringá, Paraná, com solicitação médica de cultura
para micoplasma e a sua relação com a presença de sintomas
de infecção genital.
MATERIAL E MÉTODOS
O LEPAC apresenta-se como laboratório de referência para
a cultura de micoplasma em pacientes atendidos pelo
SUS e oriundos da 15 a Regional de Saúde do Estado do Paraná.
Os princípios éticos que permearam este estudo se
basearam na Resolução 196/96-CNS/MS das diretrizes e
normas que regem pesquisa em seres humanos (Parecer
132/2005-COPEP-UEM). Todos os 1553 pacientes incluídos
neste estudo foram encaminhados ao LEPAC com solicitação
médica para realização de cultura específica para micoplasma
(M. hominis e Ureaplasma sp.), com ou sem requisição
para a realização de exames microbiológicos para
detecção de outros agentes causadores de infecções genitais,
no período compreendido entre janeiro de 2001 e dezembro
de 2004. Pacientes do sexo feminino foram também
submetidas a um questionário relacionado às condições
sintomáticas (dor pélvica e corrimento vaginal) que
as levaram a realizar este tipo de exame.
Para a pesquisa de micoplasma e Neisseria gonorrhoeae as
amostras coletadas foram secreção cervical uterina, uretral
masculina ou esperma. Para o isolamento de micoplasma
as amostras clínicas, coletadas com swab estéril, foram introduzidas
em meio de transporte específico (A3xb), de onde
foram semeadas em ágar A7 e incubadas por até 5 dias,
em temperatura de 35°C e atmosfera contendo 5% de CO2.
A identificação das espécies de micoplasma estudadas foi
realizada de acordo com a morfologia colonial de cada
agente (Shepard & Lunceford, 1976). Amostras clínicas positivas
em A7 foram tituladas em meio líquido, MLA (Cunha
et al., 1987), para M. hominis e U10 (Shepard, 1974) para
Ureaplasma sp., visando a determinação da concentração
de microrganismos por mililitro (mL) de amostra coletada,
a qual foi expressa em UAC/mL. Foram considerados
significativos valores ≥ 10 3 UAC/mL para M. hominis e
≥ 10 4 UAC/mL para Ureaplasma sp., conforme critérios de
interpretação recomendados por Cunha et al. (2001). Para
isolamento de N. gonorrhoeae as amostras clínicas foram
semeadas diretamente em ágar Thayer-Martin (Thayer &
Martin, 1966). Trichomonas vaginalis, leveduras e pseudohifas
foram pesquisados por microscopia direta a fresco nas
secreções vaginais e uretrais masculina. A microscopia de
esfregaços, corados pelo Gram, de secreções vaginais, uretrais
masculina e espermas, foi utilizada para avaliar a flora
bacteriana e a presença de leucócitos. O diagnóstico de
VB foi feito com base nos critérios padronizados por Amsel
et al. (1983) e Nugent et al. (1991).
RESULTADOS
Dos pacientes estudados, 1451 eram do sexo feminino
(93,43%) e 102 (6,57%) do sexo masculino. Positividade para
micoplasma em concentrações significativas foi observada
em 47,1% dos pacientes estudados. O isolamento exclusivo
de M. hominis ou de Ureaplasma sp. foi observado em 36
(2,3%) e 536 (34,5%) pacientes, respectivamente. Em 159 pacientes
(10,2%) foram isolados ambos agentes (Tabela 01).
Da totalidade de pacientes do sexo feminino que responderam
o questionário, 1371 (94,5%) relataram algum sintoma
de infecção no trato genital e destes 678 (49,5%) apresentaram
cultura positiva para micoplasma em concentração
clinicamente significativa (Fig. 01). Em 56 (8,3%)
destas pacientes foi observado, ao exame microscópico do
material clínico, um número aumentado de leucócitos e diminuído
de bacilos de Döderlein, além de negatividade para
os outros microrganismos pesquisados neste estudo.
Em todos os pacientes pesquisados não houve isolamento
de N. gonorrhoeae. Das 1041 pacientes cuja secreção vaginal
foi examinada (bacterioscopia e exame a fresco), 125
(12,0%) apresentaram cultura positiva para micoplasma
associada com a presença de leveduras e/ou pseudohifas,
T. vaginalis ou quadro clínico característico de VB (Fig. 02).
Em relação as pacientes com VB observou-se que na maior
parte (63,0%), M. hominis e Ureaplasma sp. foram isolados
concomitantemente, já o isolamento exclusivo de M.
hominis ou Ureaplasma spp foi observado em 11,1% e
25,9% das pacientes, respectivamente (Fig. 03).
TABELA I
Distribuição numérica das culturas positivas para
cada espécie de micoplasma de acordo com
o gênero dos pacientes.
Culturas positivas
Mulheres
n (%)
Homens
n (%)
Total
n (%)
Ureaplasma sp. 522 (71,4) 14 (1,9) 536 (73,3)
M. hominis 35 (4,8) 01 (0,1) 36 (4,9)
Ambos 155 (21,2) 04 (0,6) 159 (21,8)
Total 712 (97,4) 19 (2,6) 731 (100)
296 RBAC, vol. 39(4): 295-298, 2007