ESTUDO DA INFLUÊNCIA DE PSICROTRÓFICOS AERÓBIOS E DE ...

aproximadamente a 47 ± 2 ºC. Manter os frascos a esta temperatura até
utilização, sem exceder 6 h.
Anexo 4 - Composição e modo de preparação do meio ALOA
(http://www.cfsan.fda.gov/~ebam/m10a.html)
Composição
Peptona de carne 18,00 g
Triptona 6,00 g
Extracto de levedura 10,00 g
Piruvato de sódio 2,00 g
Glucose 2,00 g
Glicerofosfato de magnésio 1,00 g
Sulfato de magnésio 0,50 g
Cloreto de sódio 5,00 g
Cloreto de lítio 10,00 g
Hidrogenofosfato dissódico 2,50 g
5-bromo-4-cloro-3-indolil-β-D-glucopiranosida 0,05 g
Agar (dependendo da força de gelificação) 12 gr – 18 g
Água destilada (dependendo do volume de suplemento) 925 L – 930 L
(pH 7,2 ± 0,2)
Procedimento
1. Dissolver a base desidratada em água a ferver.
2. Esterilizar no autoclave a 121 ºC durante 15 min.
3. Preparar o suplemento (L-α-fosfatidil-inositol) dissolvendo 2 g deste em 50
mL de água destilada fria e agitar durante cerca de 30 min até obter uma
suspensão homogénea.
4. Dissolver os seguintes componentes individualmente nos solventes
específicos e filtrar as soluções para esterilizar: 0,02 g de Ácido nalídixico
em 5 mL de água; 0,02 g de Ceftazidima em 5 mL de água; 76700 U de
Polimixina B em 5 mL de água; 0,05 g de Cicloheximida em 2,5 mL de
etanol e adicionar 2,5 mL de água; 0,01 g de Anfotericina B numa mistura
de 2,5 mL de ácido clorídrico (HCl) (1 M) e 7,5 mL de Dimetilformamida.
3