ESTUDO DA INFLUÃNCIA DE PSICROTRÃFICOS AERÃBIOS E DE ...

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Anexos Anexo 1 - Composição e modo de preparação do meio PCA (www.biomerieux.pt) Composição Peptona de caseína (bovino) 5,0 g Extracto de levedura 2,5 g Glucose 1,0 g Agar 15,0 g Água destilada 1 L (pH 7,0) Procedimento 1. Desenroscar previamente a cápsula do frasco de gelose. 2. Colocar a gelose em banho-maria a, aproximadamente, 50ºC, aumentar a temperatura até 95 ºC e deixar derreter a gelose (durante cerca de 45 min). 3. Homogeneizar após enroscar a tampa (utilizar luvas de protecção contra os riscos térmicos). 4. Deixar os frascos à temperatura ambiente pelo menos 15 segundos antes de os transferir para um banho de água com o termóstato aproximadamente a 45- 50 ºC. Manter os frascos a esta temperatura até utilização. Anexo 2 - Composição e modo de preparação do meio VRBG (www.biomerieux.pt) Composição Hidrolisado pancreático de gelatina (bovina ou suína) 7,000 g Extracto de levedura 3,000 g Glucose 10,000 g Cloreto de sódio 5,000 g Vermelho neutro 0,030 g Cristal violeta 0,002 g Sais biliares (bovinos ou ovinos) 1,500 g Agar 12,000 g 1
Água destilada 1 L (pH 7,4) Procedimento 1. Desenroscar previamente a cápsula do frasco de gelose. 2. Colocar o frasco a regenerar em banho-maria, a aproximadamente, 50 ºC, deixar a temperatura aumentar até 95 ºC e derreter a gelose (durante, aproximadamente, 45 min). 3. Homogeneizar após o fecho da cápsula (utilizar luvas de protecção contra os riscos térmicos). 4. Deixar os frascos à temperatura ambiente durante, pelo menos, 15 segundos antes de os transferir para um banho-maria com o termóstato aproximadamente a 47 ± 2 ºC. Manter os frascos a esta temperatura até utilização, sem exceder 6 h. Anexo 3 - Composição e modo de preparação do meio TBX (http://www.sigmaaldrich.com/img/assets/6840/92435_TBX_Agar.pdf) Composição Peptona 20,000 g Sais biliares 1,500 g X-β-D glucuronide 0,075 g Agar 15,000 g Água destilada 1 L (pH 7,2) Procedimento (www.biomerieux.pt) 1. Desenroscar previamente a cápsula do frasco de gelose. 2. Colocar o frasco a regenerar em banho-maria, a aproximadamente, 50 ºC, deixar a temperatura aumentar até 95 ºC e derreter a gelose (durante, aproximadamente, 45 min). 3. Homogeneizar após o fecho da cápsula (utilizar luvas de protecção contra os riscos térmicos). 4. Deixar os frascos à temperatura ambiente durante, pelo menos, 15 segundos antes de os transferir para um banho-maria com o termóstato 2
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