ESTUDO DA INFLUÊNCIA DE PSICROTRÓFICOS AERÓBIOS E DE ...

min). Após arrefecimento do tubo (operação que não deve ultrapassar os 30 min),
colocou-se 500 μL da suspensão na “barrete” contendo os reagentes do “kit” VIDAS
SLM, colocando a mesma no aparelho mini VIDAS ® . Os casos que revelaram
resultados positivos foram sujeitos a testes de confirmação e identificação,
procedendo-se do seguinte modo: de cada um dos meios de enriquecimento selectivo
e pós enriquecimento retirou-se uma aliquota com o auxílio de uma ansa descartável,
que se inoculou, pela técnica das estrias, na superfície dos dois meios de cultura
selectivos sólidos, XLD e SM2. Estas placas foram incubadas a 37 ºC ± 1 ºC durante
24 ± 3 h. As colónias características de Salmonella spp. foram inoculadas, por picada
central, no meio de diagnóstico, TSI, incubado a 37 ºC ± 1 ºC durante 24 ± 2 h, e
simultaneamente, em placas de meio TSA (incubadas a 37 ºC ± 1 ºC durante 24 ± 2 h)
para efectuar testes bioquímicos miniaturizados de identificação de bactérias Gram
negativas, API 20E.
3.4.4.9.2 – Método utilizado na pesquisa de Listeria monocytogenes
No caso da pesquisa de L. monocytogenes fez-se inicialmente um primeiro
enriquecimento selectivo durante 24 a 26 h em cF-d, a uma temperatura de 30 ºC ± 1
ºC. Depois da incubação, efectuou-se uma passagem de 1 mL para caldo Fraser
(segundo enriquecimento selectivo) que foi colocado na estufa a 37 ºC ± 1 ºC durante
24 a 26 h. Após este período, foram inoculados 500 μL na “barrete” contendo os
reagentes do “kit” VIDAS LMO2, sendo esta colocada no aparelho mini VIDAS ® para
realização do ensaio. Os casos que se revelaram positivos foram sujeitos a
confirmação, seguindo a mesma metodologia descrita em 3.3.4.5..Para tal, a partir do
crescimento em meio Fraser, com auxílio de uma ansa descartável foi efectuado o
isolamento em meio sólido ALOA. As colónias presuntivas de L. monocytogenes foram
depois passadas para meio TSA, sendo posteriormente sujeitas ao teste de pesquisa
de catalase, API Listeria e teste de hemólise em meio COS.
3.4.4.9.3 – Método utilizado na pesquisa de Escherichia coli O157
Para a pesquisa de E. coli O157 foi realizado um primeiro enriquecimento selectivo em
m-TSB+N à temperatura de 41,5 ºC ± 1 ºC por 6 a 7 h. A partir deste enriquecimento
passou-se uma alíquota de 1 mL para caldo CT-MacConkey, fazendo-se assim um
enriquecimento selectivo, que foi incubado durante 18 ± 1 h a 37 ºC ± 1 ºC. No fim
desta etapa retiraram-se 2 mL do caldo referido para um tubo estéril que foi sujeito a
39