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ESTUDO DA INFLUÊNCIA DE PSICROTRÓFICOS AERÓBIOS E DE ...

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Quadro 5 – Testes bioquímicos de diagnóstico para identificação de A. hydrophila<br />

(adaptado de Adderson et al., 1997)<br />

Gás na<br />

V.P. Lisina Arginina Ornitina Manitol Inositol<br />

glucose<br />

Resultado + + + + - + -<br />

3.4.4.8 – Métodos utilizados na contagem e pesquisa de Bacillus cereus<br />

Para a contagem de B. cereus, foi utilizada a metodologia apresentada na norma ISO<br />

7932:2004. Isto é, inoculou-se 0,1 mL das diluições consideradas necessárias, (neste<br />

caso, da suspensão inicial, 10 -1 ) por espalhamento à superfície, no meio Mossel em<br />

placa. As placas assim obtidas foram incubadas a 30 ºC ± 1 ºC durante 48 h.<br />

A pesquisa de B. cereus foi feita a partir de um enriquecimento prévio em BPW a<br />

37 ºC ± 1 ºC durante 16 a 20 h. Posteriormente, foi feito o isolamento, com ansa à<br />

superfície do meio acima referido e incubado nas mesmas condições.<br />

Sempre que surgiram colónias grandes, crenadas, de cor rosa e rodeadas por um halo<br />

opaco, ou seja, colónias características, quer na contagem, quer na pesquisa, foi feita<br />

a confirmação. Esta confirmação consistiu na pesquisa da actividade hemolítica em<br />

meio COS, e sempre que necessário, na detecção de lecitinase. Esta última pesquisa<br />

foi feita quando nas placas iniciais, as colónias suspeitas se encontravam<br />

coalescentes com outros microrganismos contaminantes, impossibilitando a<br />

visualização da produção desta enzima.<br />

3.4.4.9 – Métodos utilizados na pesquisa de Salmonella spp., de<br />

Listeria monocytogenes e de Escherichia coli O157<br />

As pesquisas de Salmonella spp., de L. monocytogenes e de E. coli O157 foram<br />

realizadas utilizando o método imunoenzimático - VI<strong>DA</strong>S ® . É um método que se<br />

baseia na tecnologia Enzime Linked Fluorescent Assay (ELFA) para a pesquisa de<br />

microrganismos patogénicos presentes nas amostras sujeitas a ensaio. Permite indicar<br />

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