ESTUDO DA INFLUÃNCIA DE PSICROTRÃFICOS AERÃBIOS E DE ...
ESTUDO DA INFLUÃNCIA DE PSICROTRÃFICOS AERÃBIOS E DE ...
ESTUDO DA INFLUÃNCIA DE PSICROTRÃFICOS AERÃBIOS E DE ...
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
3.4.4.1 – Método utilizado na preparação das diluições decimais<br />
Fizeram-se diluições décimais sucessivas até à diluição 10 -6 , com base no nível de<br />
contaminação esperado. Esta metodologia consiste em adicionar 1 mL da suspensão<br />
inicial a 9 mL de TS preparando assim a diluição 10 -2 . A partir desta, é preparada de<br />
igual modo a diluição 10 -3 e assim sucessivamente até à 10 -6 (Figura 11).<br />
Figura 11 – Esquema de diluições sucessivas (adaptado de Pampulha e Oliveira,<br />
2004/2005)<br />
3.4.4.2 – Método utilizado na contagem de microrganismos<br />
psicrotróficos<br />
Para a contagem total dos microrganismos psicrotróficos foi seguida uma metodologia<br />
baseada na norma ISO 1741:2001. Este método consiste em semear 1 mL das<br />
diluições consideradas necessárias de modo a obter placas contáveis (neste caso<br />
usámos da diluição 10 -2 à diluição 10 -6 ) por incorporação em meio PCA. As placas<br />
inoculadas, após solidificação, foram invertidas e incubadas a 6,5ºC durante 10 dias.<br />
Após o período de incubação foram seleccionadas as placas contáveis, ou seja,<br />
aquelas que continham menos de 300 colónias, sendo nestas placas contadas todas<br />
as colónias desenvolvidas, tanto à superfície como no interior do agar. No processo de<br />
contagem em placa (manual) foram consideradas todas as colónias presentes,<br />
independentemente da sua morfologia. Neste método foi utilizado um meio de cultura<br />
não selectivo, de forma a não ocorrer qualquer tipo de inibição do crescimento de<br />
34