ESTUDO DA INFLUÃNCIA DE PSICROTRÃFICOS AERÃBIOS E DE ...

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Com a 1ª toma da amostra, recorrendo ao diluidor automático com balança (“Pinch Diluter” Refº 7577 - bioMerieux® SA, Marcy L’Étoile, França) (Figura 9), foi efectuada uma diluição inicial (p/p) da amostra na proporção 1/10 usando como diluente o meio BPW (suspensão inicial). A suspensão assim preparada foi usada para as contagens de microrganismos e simultaneamente como pré-enriquecimento para pesquisa de Salmonella spp. A 2ª toma foi pesada em balança digital PM2000 – Mettler (Mettler Instrumente, Zurique, Suiça), sendo-lhe posteriormente adicionado cF-d igualmente na proporção de 1/10, constituindo o enriquecimento primário para a pesquisa de L. monocytogenes. A 3ª toma, de modo idêntico, foi pesada na referida balança digital e usada para a pesquisa de E. coli O157 tendo sido adicionada de 225 mL de mTSB+N. Todas estas misturas foram homogeneizadas no aparelho “Stomacher ® ” (Stomacher 400 “Circulator”, Seward Limited, London, UK) (Figura 10), durante 1 minuto, a 230 rpm. Figura 9 – Diluidor automático com balança; Figura 10 - Stomacher 3.4.4 – Métodos utilizados na pesquisa e contagem de microrganismos psicrotróficos, Enterobacteriaceae e patogénicos Para a estimativa da flora microbiana e potenciais patogénicos realizaram-se vários ensaios que se encontram resumidos no Quadro 4. 32
Quadro 4 – Ensaios realizados para avaliação microbiológica Tempo Microrganismo Meio de Diluiçõ de Método/ Inoculo s cultura es incubaç ão Temperatu ra de incubação Aeróbios Psicrotróficos PCA 10 -2 a 10 -6 1ml – por incorporação 10 dias 6,5ºC Enterobacteriac eae VRBG 10 -2 1ml – por a 10 -5 incorporação/cam ada dupla 24h 37º C E. coli TBX 10 -1 1ml – por incorporação 24h 44º C L. monocytogenes ALOA/O AA 0,1ml – por espalhamento, 10 -1 após 1h/temperatura ambiente 48h 37º C A. hydrophila Ryan 10 -1 e 10 -2 0,1ml – por espalhamento 24h 30º C C. perfringens TSC 10 -1 1ml – por incorporação/cam ada dupla 24h 37ºC (anaerobios e) B. cereus Mossel 10 -1 0,1ml – por espalhamento 48h 37º C 33
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