ESTUDO DA INFLUÊNCIA DE PSICROTRÓFICOS AERÓBIOS E DE ...

Para isolamento usaram-se os meios selectivos Gelose MacConkey com Sorbitol
adicionado da mistura CT (CT-SMAC) (anexo 22) e gelose chromID TM O157:H7 (O157
H7 ID-F) (anexo 23) (ambos bioMerieux® SA, Marcy L’Étoile, França). A presença de
sorbitol no meio CT-SMAC permite a diferenciação de E. coli O157, visto que este
serovar não fermenta o sorbitol e apresenta colónias incolores enquanto que os
restantes serovares fermentam o sorbitol apresentando colónias rosas e vermelhas. A
selectividade é conferida pela presença de sais biliares e de cristais violeta para as
bactérias Gram positivas e pela mistura CT para outras bactérias da família
Enterobacteriaceae (www.biomerieux.pt).
O meio O157 H7 ID-F contém uma mistura de hidratos de carbono e dois substratos
cromogénicos para a detecção de duas actividades enzimáticas: a β-D-galactosidase
presente em todas as estirpes de E. coli e a β-D-glucoronidase especifica para todas
as estirpes de E. coli não O157:H7. As colónias de E. coli O157 aparecem com cor
verde ou verde-azulada, sendo a selectividade em relação a bactérias Gram positivas
fornecida pelo desoxicolato de sódio, enquanto que a mistura CT, permite aumentar a
selectividade em relação às bactérias da família das Enterobacteriaceae
(www.biomerieux.pt).
O “kit” Dynabeads ® anti - E. coli O157 foi utilizado com o objectivo de tornar mais
eficiente a pesquisa deste microrganismo através da utilização de uma técnica de
concentração selectiva desta enterobactéria
(http://www.invitrogen.com/site/us/en/home/brands/Dyn al.h tml).
3.3.12 – “Kit” utilizado na pesquisa da toxina diarreica de Bacillus cereus
Para a pesquisa de toxina diarreica de B. cereus foi utilizado o “kit” de detecção de
toxinas Bacillus cereus Enterotoxin - Reversed Passive Latex Agglutination (BCET-
RPLA) (Oxoid TM , Cambridge, UK), que utiliza o método de aglutinação passiva de látex
invertida (www.oxoid.com).
3.3.13 – Reagentes e “kits” para identificação bioquímica
Foram utilizados os seguintes reagentes: reagente para detecção da oxidase
(N,N,N’,N’-Tetrametil-p-fenilediamina dihidrocloreto) (bioMerieux® SA, Marcy L’Étoile,
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