ESTUDO DA INFLUÃNCIA DE PSICROTRÃFICOS AERÃBIOS E DE ...
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3.3.10 – Meios utilizados na pesquisa de Listeria monocytogenes<br />
Para a pesquisa de L. monocytogenes utilizou-se o caldo Fraser demi (Cf-d) (Anexo<br />
18), caldo Fraser (Anexo 19) e “kit” VI<strong>DA</strong>S ® LMO2 (todos produtos bioMerieux® SA,<br />
Marcy L’Étoile, França). Os caldos Fraser demi e Fraser apresentam uma constituição<br />
semelhante, com a única diferença de o primeiro apresentar metade da concentração<br />
de antibióticos do segundo, permitindo durante o primeiro enriquecimento, um melhor<br />
crescimento das células eventualmente lesadas. A selectividade destes meios é<br />
conseguida pelo cloreto de lítio, acriflavina e o ácido nalidíxico (www.biomerieux.pt)<br />
Como meio de isolamento utilizou-se o meio ALOA, já descrito em 3.3.4. Para<br />
isolamento e manutenção de culturas suspeitas utilizou-se meio TSA, também referido<br />
no ponto 3.3.4.<br />
3.3.11 – Meios utilizados na pesquisa de Escherichia coli O157<br />
A pesquisa de E. coli O157 foi efectuada com recurso aos meios Modified Tripticase<br />
Soya Broth (Becton, Dickinson and Company, Le Pont de Claix, França) (Anexo 20)<br />
adicionado de novobiociona (Sigma, St Louis, Missouri, USA) na concentração de 20<br />
mg/L (mTSB+N), Caldo MacConkey (MCK) (Anexo 21) (LabM, Bury, Lancashire, USA)<br />
com mistura de Cefixima-Telurito (CT) (bioMerieux® SA, Marcy L’Étoile, França)<br />
(MCK+CT), “kit” VI<strong>DA</strong>S ®<br />
E. coli O157 (ECO) (bioMerieux® SA, Marcy L’Étoile, França), “kit” Dynabeads ® anti -<br />
E. coli O157 (Dynal Biotech ASA, Oslo, Noruega) e tampão de lavagem (PBS Tween):<br />
0.15 M NaCl, 0.01 M Tampão Sódio-Fosfato, pH 7.4, com 0.05% Tween-20<br />
(autoclavado durante 15 min a 121 ºC).<br />
A selectividade do meio mTSB+N baseia-se na presença do antibiótico novobiocina e<br />
na temperatura de incubação (www.biomerieux.pt).<br />
O meio MCK+CT apresenta uma composição que favorece o crescimento de E. coli. A<br />
presença de bílis promove a inibição da maioria das bactérias Gram positivas e a<br />
mistura CT inibe as bactérias da família Enterobacteriaceae (www.biomerieux.pt).<br />
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