ESTUDO DA INFLUÊNCIA DE PSICROTRÓFICOS AERÓBIOS E DE ...

3.3.10 – Meios utilizados na pesquisa de Listeria monocytogenes
Para a pesquisa de L. monocytogenes utilizou-se o caldo Fraser demi (Cf-d) (Anexo
18), caldo Fraser (Anexo 19) e “kit” VIDAS ® LMO2 (todos produtos bioMerieux® SA,
Marcy L’Étoile, França). Os caldos Fraser demi e Fraser apresentam uma constituição
semelhante, com a única diferença de o primeiro apresentar metade da concentração
de antibióticos do segundo, permitindo durante o primeiro enriquecimento, um melhor
crescimento das células eventualmente lesadas. A selectividade destes meios é
conseguida pelo cloreto de lítio, acriflavina e o ácido nalidíxico (www.biomerieux.pt)
Como meio de isolamento utilizou-se o meio ALOA, já descrito em 3.3.4. Para
isolamento e manutenção de culturas suspeitas utilizou-se meio TSA, também referido
no ponto 3.3.4.
3.3.11 – Meios utilizados na pesquisa de Escherichia coli O157
A pesquisa de E. coli O157 foi efectuada com recurso aos meios Modified Tripticase
Soya Broth (Becton, Dickinson and Company, Le Pont de Claix, França) (Anexo 20)
adicionado de novobiociona (Sigma, St Louis, Missouri, USA) na concentração de 20
mg/L (mTSB+N), Caldo MacConkey (MCK) (Anexo 21) (LabM, Bury, Lancashire, USA)
com mistura de Cefixima-Telurito (CT) (bioMerieux® SA, Marcy L’Étoile, França)
(MCK+CT), “kit” VIDAS ®
E. coli O157 (ECO) (bioMerieux® SA, Marcy L’Étoile, França), “kit” Dynabeads ® anti -
E. coli O157 (Dynal Biotech ASA, Oslo, Noruega) e tampão de lavagem (PBS Tween):
0.15 M NaCl, 0.01 M Tampão Sódio-Fosfato, pH 7.4, com 0.05% Tween-20
(autoclavado durante 15 min a 121 ºC).
A selectividade do meio mTSB+N baseia-se na presença do antibiótico novobiocina e
na temperatura de incubação (www.biomerieux.pt).
O meio MCK+CT apresenta uma composição que favorece o crescimento de E. coli. A
presença de bílis promove a inibição da maioria das bactérias Gram positivas e a
mistura CT inibe as bactérias da família Enterobacteriaceae (www.biomerieux.pt).
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