ESTUDO DA INFLUÊNCIA DE PSICROTRÓFICOS AERÓBIOS E DE ...

que as células de Salmonella spp. lesadas e/ou presentes em baixo número, possam
recuperar e/ou multiplicar-se antes de serem introduzidas num meio selectivo,
aumentando assim as hipóteses da sua detecção nas amostras. O caldo RVS-T
contém, para além de fontes de carbono e compostos azotados, cloreto de magnésio
(que aumenta a pressão osmótica do meio) e verde de malaquite (agente inibidor da
maioria das bactérias, com excepção de Salmonella spp.) que associados a um pH
baixo, proporcionam um meio selectivo para Salmonella spp. (www.biomerieux.pt). O
caldo MKTTn-T apresenta fontes de carbono, azoto, vitaminas e sais minerais. É
constituído também por tetrationato que inibe bactérias que não possuam tetrationato
redutase (como são exemplo a maioria das bactérias Gram negativas, com excepção
de Salmonellae e Proteus). A inibição de Proteus é efectuada pela adição de
novobiocina, e a das bactérias Gram positivas é conseguida pela acção de verde
brilhante e pela adição de sais biliares (www.biomerieux.pt). O caldo M contém uma
base rica em nutrientes que permite o crescimento de Salmonella spp.
(www.biomerieux.pt).
Para isolamento foram usados os meios selectivos sólidos Xylose-Lysine-
Desoxycholate Agar (XLD) (Anexo 15) e Gelose chromID TM Salmonella (SM2) (Anexo
16) (ambos bioMerieux® SA, Marcy L’Étoile, França). A diferenciação das bactérias no
meio XLD fundamenta-se na fermentação da xilose, descarboxilação da lisina e
produção de sulfito de hidrogénio, reacções que permitem uma diferenciação primária
de Shigellae e Salmonellae de outras bactérias patogénicas. As colónias apresentamse
vermelhas com o centro negro. A concentração de desoxilato presente nesta
fórmula inibe coliformes sem interferir com o desenvolvimento de Salmonellae e
Shigellae (www.biomerieux.pt). O meio SM2 é constituído por uma base nutritiva que
associa diferentes peptonas promovendo assim o crescimento do conjunto de todas as
estirpes de Salmonella, e por três substratos cromogénicos que permitem a revelação
das actividades enzimáticas correspondentes. A diferenciação de Salmonellae
(incluindo estirpes lactose positivas) baseia-se na produção da enzima esterase que
confere uma coloração rosa pálido a roxo às colónias desta bactéria
(www.biomerieux.pt).
Como meio de diagnóstico foi utilizado o agar de Triple Sugar Iron (TSI) (Biogerm,
Maia, Portugal) (Anexo 17). Trata-se de um meio que permite verificar se ocorreu a
fermentação de três açucares (lactose, sacarose e glucose), produção de gás e
produção de sulfito de hidrogénio (www.oxoid.com). Com vista a posterior
identificação, as colónias suspeitas foram isoladas e mantidas em meio TSA.
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