DIOGO MONTES VIDAL IDENTIFICAÇÃO E SÍNTESE DOS ...

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foi colocada a fonte de odor (um pedaço de palpel filtro impregnado com solvente e outro
com uma solução do extrato a ser testado). Uma fêmea sexualmente madura foi introduzida
na base do olfatômetro e seu comportamento foi observado durante no máximo 10
minutos. Foi considerada uma resposta quando o inseto caminhou mais de 5cm dentro do
braço escolhido e permaneceu neste durante mais de 2 minutos. Foi considerada como
“não resposta” quando o inseto não saiu do braço principal do olfatômetro. Cada inseto
testado foi considerado como uma repetição e cada inseto foi testado apenas uma vez,
durante a 7ª e 10ª horas da escotofase [20-21] .
3.1.4 Análises Estatísticas:
Os dados de respostas olfatométricas de fêmeas nos diferentes tratamentos foram
analisadas utilizando a técnica de qui-quadrado no programa BioEstat [22] . Os insetos que
não escolheram nenhum dos braços foram excluídos das análises estatísticas.
3.2 Métodos de Análise
3.2.1 Eletroantenograma acoplado a cromatografia em fase gasosa (CG-EAD)
Extratos de glândulas de fêmeas, na concentração de 5 a 10µL/glândula foram
analisados por um sistema acoplado de cromatografia gasosa-eletroantenografia (CG-
EAD), utilizando um cromatógrafo de fase gasosa Shimadzu GC-2010 acoplado a um
sistema de detecção eletroantenográfica Syntech (Hilversum, Holanda). O CG foi equipado
com uma coluna RTX ® -5 (30m X 0,25mm d.i. X 0,25μm de espessura de filme; Restek
Chromatography Products, EUA). Injetou-se alíquotas de 1μL em modo splitless com a
temperatura do injetor a 250°C. A temperatura do forno foi mantida a 100°C por 1min,
aumentada para 270°C em uma velocidade de 10°C.min -1 , sendo mantida nesta
temperatura por 10 min. O gás de arraste empregado foi Hélio com um fluxo de 1mL.min -
1 . O fluxo oriundo da coluna foi dividido em uma razão 1:1 com uma parte indo para o
detector de ionização em chama (FID), a uma temperatura de 270°C, e a outra parte indo
para a linha de transferência aquecida e com uma corrente de ar umidificado (300 mL min -
1 ) que ia diretamente para a antena dos insetos. As antenas foram fixadas entre dois
eletrodos de aço inox usando gel condutor (Signa gel, Parker Labs., EUA). Os dados
gerados foram processados utilizando-se o programa Syntech CG-EAD32 (versão 4.6).