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V Congresso Brasileiro de Mamona / II Simpósio Internacional de Oleaginosas Energéticas & I Fórum Capixaba de Pinhão Manso, Guarapari (ES) – 2012 AVALIAÇÃO DE POTENCIAIS EPITOPOS ALERGÊNICOS DE ALBUMINA 2S DE JATROPHA CURCAS L. Lívia Maia Crespo. 1 ; Natália Deus de Oliveira. 2 ; Olga Lima Tavares Machado. 3 1. Mestranda do curso de Biociência e Biotecnologia da UENF – liviamaiac@gmail.com; 2. Doutoranda do curso de Biociência e Biotecnologia da UENF – deusnaty@yahoo.com.br; 3. Professora UENF –olgauenf@yahoo.com.br RESUMO – O pinhão-manso (Jatropha curcas L.) é uma planta de origem provável no México e América Central, apresenta algumas semelhanças com a mamona, ambas são euforbiáceas oleaginosas. Em ambas oleaginosas, alérgenos pertencentes à família das albumina 2S já foram caracterizados. As albuminas 2S são proteínas de reserva presentes em sementes de diversas plantas. O reconhecimento de epitopos alergênicos é de fundamental importância para a elaboração de novas estratégias para a desativação de alérgenos e para o desenvolvimento de novos fármacos para o tratamento da alergia. O objetivo deste estudo foi elucidar possíveis epitopos ligantes de IgE em albuminas 2S de pinhão manso. A extração da proteína Jat c 1, um alérgeno presente nas sementes de pinhão-manso seguiu a metodologia descrita por Maciel e colaboradores em 2009. A proteína Jat c 1 foi isolada por cromatografia de exclusão molecular (Sephadex-G-50), seguido de cromatografia de fase reversa em coluna C2C18, sistema HPLC (High Performance Liquid Chromatography). A estrutura primária da proteína foi elucidada empregando o sequenciamento automático. A partir desta estrutura quatro peptídeos foram sintetizados (P1, P5, P6 e P8). Com base nos conhecimentos prévios que as albuminas 2S de mamona possuem aminoácidos ácidos (Glutâmico [E] ou Aspártico [D]) na constituição dos seus epitopos alergênicos, buscamos os mesmos aminoácidos na estrutura primária de Pinhão Manso. Os peptídeos sintéticos foram tratados com reagente Woodward's K (WRK), um composta que reage com o grupamento carboxílico destes aminoácidos, e o potencial alergênico destes peptídeos foi investigado por ensaios de desgranulação de mastócitos de rato. Os peptídeos modificados com o reagente WRK apresentaram menor percentual de desgranulação do que aqueles não tratados. Imunoensaios (ELISA) foram realizados e possibilitou detectar e quantificar a capacidade ligante de anticorpos específicos contra albumina 2S de pinhão-manso isolada. Nossos resultados apontam para a participação de aminoácidos dicarboxílicos na formação de epitopos nas albuminas 2S de pinhão manso. O reconhecimento de epitopos alergênicos é de fundamental importância para o desenvolvimento de futuras vacinas e agentes farmacológicos, deste modo, maiores estudos com relação a estrutura-função de albuminas 2S de J. curcas necessitam de especial atenção. Palavras-chave: albumina 2S, epitopo, Jat c 1 Apoio: FINEP, CNPq, FAPERJ e EMBRAP CONGRESSO BRASILEIRO DE MAMONA, 5 ; SIMPÓSIO INTERNACIONAL DE OLEAGINOSAS ENERGÉTICAS, 2 & I FÓRUM CAPIXABA DE PINHÃO MANSO, 2012, Guarapari. Desafios e Oportunidades: Anais... Campina grande: Embrapa Algodão, 2012. p. 20.
V Congresso Brasileiro de Mamona / II Simpósio Internacional de Oleaginosas Energéticas & I Fórum Capixaba de Pinhão Manso, Guarapari (ES) – 2012 AVALIAÇÃO DO EFEITO DO ÓLEO DE AÇAÍ (Euterpe oleracea Mart.) SOBRE O DESENVOLVIMENTO DE Pseudomonas aeruginosa E Staphylococcus aureus Marlon Lima de Araújo. 1 ; André Luiz Melhorança Filho. 2 ; Rodrigo Medeiros de Souza. 3 1. Graduando do curso de Engenharia Agronômica da Universidade Federal do Acre (UFAC) e Bolsista do Programa de Educação Tutorial (PET) do Ministério da Educação (MEC) (marlon-180@hotmail.com); 2. Professor Adjunto da Universidade Federal do Acre (UFAC) (andreluiz@ufac.br); Professor Assistente da Universidade Federal do Acre (UFAC). RESUMO – O açaí (Euterpe oleracea Mart.) é uma palmeira abundante na região amazônica, onde é utilizada para diversos usos, como a produção de seu suco que é rico em antocianinas e para a produção de palmito. O suco do açaí destaca-se por possuir grande valor nutricional, e muitos na região amazônica, creem no seu potencial medicinal, sendo a polpa de seu fruto, rica em flavonoides, que é bastante conhecida pelo seu potencial farmacológico. O processamento do açaí gera a semente como subproduto, e estudos recentes indicam que a mesma possui teores consideráveis de óleo, podendo ser usado como fonte de energia alternativa e produção de medicamentos. Baseado em seu uso medicinal na Amazônia o presente trabalho objetivou verificar o efeito do óleo de açaí sobre o desenvolvimento de bactérias causadoras de patologias humanas como: Pseudomonas aeruginosa (causadora de infecções urinárias) e Staphylococcus aureus (causadora de infecções alimentares). O presente trabalho foi realizado no laboratório de microbiologia, imunologia, parasitologia e plantas medicinais (MIPPLAM) do Campus Floresta da Universidade Federal do Acre. Os frutos coletados de açaí (Euterpe oleracea Mart.) encontravam-se maduros e uniformes, sendo os mesmos lavados e processados antes da extração do óleo. O açaí foi beneficiado de forma a se obter a semente, sendo, em situação posterior triturada para a extração do óleo via soxthlet com o solvente hexano. Foram utilizados como microrganismos indicadores gram-negativos P. aeruginosa e gram-positivos, utilizou-se S. aureus. As cepas foram multiplicadas e contadas com o auxílio de espectrofotômetro de absorção de luz, sendo ajustada sua turvação para 0,5 na escala de McFarland. Após multiplicação, as bactérias foram cultivadas em meio de cultura e submetidas aos efeitos do óleo de açaí e testes controle, através da técnica de difusão em disco, com os medicamentos vancomicina e penicilina para S. aureus e gencomicina, ciprofloxacina e piperacilina+tazobacton em P. aeruginosa, e hexano em ambas as bactérias. Foi observado o efeito do óleo e dos medicamentos durante 48 horas havendo leituras em 24 e 48 horas após montagem do experimento. O delineamento experimental utilizado nos estudos foi o inteiramente casualizado com 4 repetições. Os resultados foram submetidos à análise de variância e teste Tukey a 5% de probabilidade. Durante as leituras observou-se que o óleo de açaí apresentou resultado sobre o desenvolvimento de S. aureus demonstrando a presença de halo de inibição. O diâmetro (em milímetros) do halo apresentado uma vez submetido ao Teste Tukey a 5% de significância, não foi superior ao halo de inibição dos medicamentos vancomicina e penicilina. Tal fato nos indica que há presença de moléculas com potencial de medicamento no óleo das sementes de açaí. Quanto às bactérias P. aeruginosa, essas não apresentaram a presença de halo de inibição quando submetidas ao óleo de açaí. Palavras-chave: Açaí (Euterpe oleracea Mart.); Bioprospecção; Óleo antimicrobiano Apoio: Programa de Educação Tutorial (PET), CNPq CONGRESSO BRASILEIRO DE MAMONA, 5 ; SIMPÓSIO INTERNACIONAL DE OLEAGINOSAS ENERGÉTICAS, 2 & I FÓRUM CAPIXABA DE PINHÃO MANSO, 2012, Guarapari. Desafios e Oportunidades: Anais... Campina grande: Embrapa Algodão, 2012. p. 21.
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