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DUQUE ORTIZ (2004). Adotaram-se os períodos de 3, 7, 14 e 28 dias de pósoperatório
para tal. Nas datas, os animais foram submetidos à nova anestesia (vide item
3.3). Os bulbos oculares esquerdos foram removidos da sua órbita, por técnica de
enucleação subconjuntival e submetidos à fixação em solução de formol tamponado a
10%. Em uma segunda etapa, eles foram reduzidos, incluídos em parafina e cortados
sagitalmente a uma espessura de 5µm.
3.6.2.1 Morfometria
As lâminas foram coradas pela Hematoxilina-Eosina (HE) e pelo Tricrômico de
Masson e estudadas em microscópio de luz, nas objetivas de 10, 20 e 40X. Após
análise, os cortes foram documentados em fotomicroscópio 16 , acoplado a uma câmera
de vídeo de alta resolução 17 , para a digitalização das imagens.
3.6.2.1.1 Contagem de leucócitos polimorfonucleares
A quantificação de leucócitos polimorfonucleares foi realizada por contagem do
número de células em cinco segmentos por lâmina, três na área central e dois na área
de transição das ceratectomias. Para a contagem, utilizou-se uma grade contendo 70
campos distribuídos geometricamente (Figura 2), aplicada sobre o segmento a ser
avaliado. Procedeu-se à contagem das células nos 70 campos com área de 246,5µm 2
cada. A seguir, calculou-se a média dos dados.
16 Eclipse Nikon E- 600. Nikon Instruments Inc. - Melville - USA.
17 AxionCam - Carl Zeiss do Brasil Ltda. - São Paulo - Brasil
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