INTEGRIDADE E FUNCIONALIDADE DOS ... - Ainfo - Embrapa
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Revisão de Literatura 40<br />
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autores sugeriram que esse incremento pode refletir um avanço no estágio da<br />
maturação das membranas dos espermatozóides devido ao processo de<br />
criopreservação.<br />
Outros autores têm relatado os efeitos da criopreservação do sêmen<br />
ovino sobre a capacitação espermática sendo que a maioria descreve que os<br />
espermatozóides no sêmen in natura e no congelado diferem quanto ao status<br />
de maturação acrossomal e o tempo necessário para a ocorrência da<br />
capacitação in vitro com evidências claras de uma capacitação prematura para<br />
aquelas células submetidas à criopreservação (PÉREZ et al., 1996a; PÉREZ et<br />
al., 1996b; GILLAN et al., 1997; GILLAN et al., 1999; PERIS et al., 2004).<br />
Pérez et al. (1996a) avaliaram a integridade da membrana plasmática e<br />
do estágio de capacitação somente daqueles espermatozóides que resistiram<br />
ao processo de congelação-descongelação realizando primeiro, a filtração do<br />
sêmen em Sephadex G-10 e depois, a coloração dupla com Hoechst 33258 e<br />
CTC. Antes da filtração 85% dos espermatozóides congelados-descongelados<br />
estavam parcialmente ou totalmente capacitados. Porém, após a filtração com<br />
Sephadex, as amostras recuperaram a distribuição do padrão de CTC típico do<br />
sêmen in natura com mais de 75% dos espermatozóides não capacitados. Um<br />
efeito similar foi observado no percentual de integridade de membrana.<br />
Espermatozóides danificados ou mortos de amostras congeladas-<br />
descongeladas estavam, na maioria das vezes, em um falso estágio de<br />
capacitação. Além disso, houve um concomitante aumento da percentagem de<br />
espermatozóides não capacitados e de células com membrana intacta.<br />
Gillan et al. (1997), baseando-se nos padrões da CTC, observaram que<br />
a maioria dos espermatozóides do sêmen in natura estava no padrão não<br />
capacitado (61,3%), com o restante da população distribuída entre os padrões<br />
capacitado e com reação acrossomal. Após a incubação por seis horas, os<br />
espermatozóides sofreram processo de capacitação espontânea com a maioria<br />
da população apresentando o padrão capacitado (54%) e com acrossomo<br />
reagido (41%). Em contraste, espermatozóides congelados-descongelados<br />
foram distribuídos principalmente no padrão capacitado (65,9%) e com reação<br />
acrossomal (25,9%), com somente uma proporção de células permanecendo<br />
não capacitada (6,7%) logo após a descongelação. Após incubação por seis