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Revisão de Literatura 22 _____________________________________________________________________ após a descongelação e a longevidade da população espermática e subseqüente potencial de desenvolvimento embrionário in vitro são reflexos da viabilidade espermática (MORRIS et al., 2001). Assim, o comportamento do espermatozóide mantido durante um determinado tempo em condições in vitro têm sido usado como teste para avaliar a longevidade e qualidade do sêmen a exemplo do teste de termo-resistência (HENRY & NEVES, 1998). Alguns autores têm submetido o sêmen a diferentes situações que desafiam a sua resistência e sobrevivência (VALCÁRCEL et al., 1994; PAGANINI FILHO, 1999; SOUSA, 2002; RODELLO, 2006) enquanto outros submetem os espermatozóides a condições que mimetizam àquelas encontradas in vivo no trato genital feminino (TERVIT et al., 1972; PÉREZ et al., 1997; PÉREZ et al., 1996a; PERIS et al., 2004) ou a condições encontradas in vitro em procedimentos de FIV (MORRIS et al., 2001) o que poderiam por exemplo medir a longevidade do espermatozóide congelado em um período de tempo correspondente ao intervalo entre a descongelação, a inseminação artificial e a fertilização in vivo (PERIS et al., 2004). Pérez et al. (1997) constataram que a estocagem de sêmen in natura de carneiros por mais de quatro horas em temperatura ambiente resultou em um aumento das percentagens de espermatozóides apresentando reação acrossomal em resposta a um curto período de exposição ao cálcio ionóforo A23187. Sukardi et al. (1997) por sua vez, observaram que quando o sêmen in natura de carneiro foi incubado por quatro horas à 39 o C após diluição em meio tampão à base de HEPES e Glicose contendo CaCl2, houve um aumento acentuado de células com acrossomo reagido (75%) ao mesmo tempo em que a porcentagem de células viáveis permanecia estável. Às seis horas de incubação, houve um dramático aumento de células mortas com acrossomo reagido, indicando a perda da barreira funcional da membrana plasmática em uma proporção elevada dessas células e evidenciando uma sobrevivência limitada da célula em cultivo depois de completada a reação acrossomal. Com esses resultados, os autores sugeriram que a reação acrossomal que acontece espontaneamente nos espermatozóides de ovinos não é uma mudança degenerativa que ocorre em células mortas e que os espermatozóides permanecem viáveis não mais que duas a quatro horas após sua ocorrência.
Revisão de Literatura 23 _____________________________________________________________________ Testes de fertilização in vitro de oócitos ovinos conduzidos por Gillan et al. (1997) revelaram um decréscimo na fertilidade dos espermatozóides submetidos à incubação em meio sintético do oviduto (SOF) por seis horas. Agrupando os dados obtidos com sêmen in natura e congelado de carneiros em inseminações artificiais, os autores também observaram que a taxa de prenhez aos 18 dias foi maior à zero hora que às seis horas de incubação em meio SOF (83,4% vs. 73,9%, p
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