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Revisão de Literatura 12 _____________________________________________________________________ 2.2. AVALIAÇÃO DA <strong>INTEGRIDADE</strong> E <strong>FUNCIONALIDADE</strong> ESPERMÁTICA A qualidade do sêmen e sua relação com fertilidade têm grande importância na produção animal. Testes são realizados para determinar a qualidade do sêmen para a sua aprovação e utilização em inseminações artificiais, o que torna de fundamental importância uma análise precisa (PERIS et al. 2004). Avaliações por sondas fluorescentes das membranas, plasmática, acrossomal e mitocondrial e o uso de sistemas computadorizados para avaliação da motilidade espermática, são testes esclarecedores para determinar de forma objetiva a qualidade do sêmen (CELEGHINI, 2005). 2.2.1. Avaliação das Injúrias Espermáticas a) Avaliação da Morfologia Espermática O exame morfológico do sêmen tem sido utilizado de forma rotineira para seleção e controle da qualidade do sêmen ovino. O ejaculado contém uma série de espermatozóides anormais porém, se a proporção é alta, esse sêmen é considerado de baixa qualidade. O exame morfológico do sêmen serve muito bem como um teste para ingresso e acompanhamento de reprodutores em programas de inseminação artificial e para controle de qualidade das baterias de sêmen processadas por elucidar alterações induzidas por processos envolvidos na sua preservação (EVANS & MAXWELL, 1990). O status morfológico do espermatozóide, sendo parcialmente refletido pela motilidade e diretamente correlacionado com eventos fisiológicos que ocorrem durante a fertilização, pode ter estreita relação com o desempenho reprodutivo. A morfologia e integridade funcional do acrossomo é um pré- requisito para a ligação do espermatozóide à zona pelúcida e para a reação acrossomal subseqüente (VERSTEGEN et al., 2002). A destruição do acrossomo bem como suas lesões podem ser causadas pelo envelhecimento, por choque térmico ou por manipulação indevida do sêmen, durante o processamento. O acrossomo pode apresentar-se enrugado ou com contorno defeituoso ou, ainda estar destacado (MIES FILHO, 1987).
Revisão de Literatura 13 _____________________________________________________________________ O aumento de anormalidades, particularmente aquelas envolvendo a cauda do espermatozóide, irá como conseqüência reduzir a motilidade geral da amostra. A ocorrência de um grande número de caudas dobradas sem gota citoplasmática em exames espermáticos de rotina, deve alertar o examinador para a possibilidade do defeito ter sido induzido artificialmente. Dentre as causas artificialmente induzidas, pode-se se destacar a hipoosmolaridade e o choque de frio. Como o espermatozóide com cauda dobrada têm a motilidade reversa, é de se esperar que ele não seja capaz de penetrar a zona pelúcida do oócito, assim, altos níveis dessa anormalidade no sêmen levam a uma redução na sua fertilidade (BARTH & OKO, 1989). A maneira pela qual a amostra de sêmen é manuseada na preparação para seu exame morfológico pode influenciar no aparecimento e nas quantidades de alguns tipos de anormalidades. Um esforço deve ser feito para evitar a introdução de artefatos (BARTH & OKO, 1989). As técnicas que usam corantes podem induzir danos às estruturas espermáticas durante a sua confecção o que geralmente não acontece em montagens úmidas (ÖZTÜRKLER et al., 2001). É sabido que corantes sem similaridade osmótica com o plasma seminal resultam em perdas do acrossomo em alguns espermatozóides. Qualquer estudo da integridade de acrossomo requer o uso de diluentes, fixadores e corantes tamponados e osmoticamente balanceados. As montagens úmidas são as mais simples e seguras preparações para o estudo do acrossomo sendo aquelas com tampões associados a baixas concentrações de glutaraldeído as mais recomendadas (BARTH & OKO, 1989). Vários testes que medem a viabilidade e morfologia pouco se correlacionam com a fertilidade. Porém os métodos que medem essa relação podem ser freqüentemente questionados pelas inúmeras e incontroláveis variáveis que estão envolvidas com os resultados de fertilidade a campo. Por isso, pequenas ou moderadas diferenças na qualidade do sêmen não são facilmente demonstradas em testes de fertilidade. Isso não significa porém que determinado teste de qualidade do sêmen é menos importante (BARTH & OKO, 1989). Relatos de Morris et al. (2001) por exemplo, demonstraram não haver efeito significativo da morfologia espermática sobre a fecundação in vitro (FIV)
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