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Resultados e Discussão 118 _____________________________________________________________________ As médias e os desvios-padrão da porcentagem de espermatozóides classificados dentro da subpopulação com membrana plasmática lesada, acrossomo intacto e baixo potencial de membrana mitocondrial (SBP 6) foram: S-FR = 3,6 ± 3,3; S-RE = 14,6 ± 12,5; S-CD = 26,8 ± 8,6 e S-IN = 35,8 ± 10,6%. Os valores médios e desvios-padrão da freqüência da SBP 6 obtidos a partir da interação entre CRIO e Momento estão descritos na Tabela 11. O comportamento da SBP 6 ao longo dos momentos de avaliação foi o que melhor caracterizou o declínio da viabilidade espermática ao longo da criopreservação e incubação. A freqüência desta subpopulação aumentou (P
Resultados e Discussão 119 _____________________________________________________________________ Provavelmente, pouco tempo depois de ocorrida a lesão da membrana plasmática, deva também ocorrer a lesão do acrossomo conseqüentemente, as células com acrossomo reagido podem ter um tempo de sobrevivência muito curto (HARRISON & VICKERS, 1990). As médias e os desvios-padrão da porcentagem de espermatozóides classificados dentro da subpopulação com membrana plasmática lesada, acrossomo lesado e alto potencial de membrana mitocondrial (SBP 7) foram: S- FR = 0,7 ± 1,1; S-RE = 0,1 ± 0,4; S-CD = 1,1 ± 1,6 e S-IN = 0,2 ± 0,6%. Os valores médios e desvios-padrão da SBP 7 obtidos a partir da interação CRIO e Momento estão descritos na Tabela 11. Assim como foi para a SBP 3, 4 e 5, a freqüência da SBP 7 teve pouca representabilidade e seu comportamento irregular foi pouco conclusivo. Provavelmente, quando a magnitude do dano espermático chega a níveis que comprometem a membrana plasmática, dificilmente a membrana mitocondrial consiga manter concomitantemente sua potencialidade funcional elevada. A alta freqüência da SBP 1 associada às baixas freqüências da SBP 5 e 7, sugerem que o potencial de membrana mitocondrial esteja mais ligado à integridade da membrana plasmática. No sêmen suíno, Huo et al. (2002) observaram que a atividade mitocondrial detectada pelo JC-1 foi fortemente correlacionada com a viabilidade espermática mensurada tanto pelo SYBR-14 como pelo Hoechst 33258. Entretanto, segundo Meseguer et al. (2004), a atividade mitocondrial mensurada pela sonda MitoTracker Green não guardou relação com a sobrevivência espermática após o ciclo de criopreservação e segundo eles, provavelmente não é um bom indicador do metabolismo do espermatozóide humano. Ao contrário da SBP 1, a subpopulação com membrana plasmática lesada, acrossomo lesado e baixo potencial de membrana mitocondrial (SBP 8) é a categoria mais representativa da inviabilidade espermática já que possui todas as estruturas celulares estudadas apresentando dano estrutural e/ou funcional. As médias gerais dos espermatozóides classificados como SBP 8 foram: S-FR = 6,4 ± 6,1; S-RE = 21,9 ± 12,3; S-CD = 46,9 ± 18,2 e S-IN = 41,6 ± 18,0%. Os valores médios e desvios-padrão da SBP 8 obtidos a partir da interação CRIO e Momento estão descritos na Tabela 11. O comportamento da
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Anexo II 193 ______________________
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