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Atividade antimicrobiana de Bixa orellana L. (Urucum)

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Revista Lecta, Bragança Paulista, v. 21, n. 1/2, p. 47-54, jan./<strong>de</strong>z. 2003 47<br />

<strong>Ativida<strong>de</strong></strong> <strong>antimicrobiana</strong> <strong>de</strong> <strong>Bixa</strong> <strong>orellana</strong> L. (<strong>Urucum</strong>)<br />

Ana Marina Silveira Pinto Coelho 1<br />

Geraldo Alves da Silva 2<br />

Olivina Maria Carneiro Vieira 2<br />

Jorge Kleber Chavasco 3<br />

Resumo: Realizou-se o estudo da ativida<strong>de</strong> <strong>antimicrobiana</strong> <strong>de</strong> tinturas <strong>de</strong> <strong>Bixa</strong> <strong>orellana</strong> L., conhecida<br />

popularmente como “urucum”. As tinturas foram testadas pelo método <strong>de</strong> difusão em ágar e apresentaram<br />

ativida<strong>de</strong> antibacteriana, mas foram inativas sobre as cepas <strong>de</strong> Cryptococcus neoformans e Candida albicans. Verificou-se,<br />

por triagem fitoquímica, a presença <strong>de</strong> saponinas, flavonói<strong>de</strong>s, taninos, alcalói<strong>de</strong>s e esterói<strong>de</strong>s.<br />

Palavras-chave: <strong>Bixa</strong> <strong>orellana</strong>; <strong>Urucum</strong>; Annatto; <strong>Ativida<strong>de</strong></strong> <strong>antimicrobiana</strong>.<br />

Antimicrobial activity from <strong>Bixa</strong> <strong>orellana</strong> L. (<strong>Urucum</strong>)<br />

Abstract: The antimicrobial activity of the tinctures of <strong>Bixa</strong> <strong>orellana</strong> L., commonly known as “urucum”, was<br />

studied. These tinctures were tested by diffusion method in agar and showed antimicrobial activity, but were<br />

inactive on the stumps of Cryptococcus neoformans e Candida albicans. The phytochemical screening indicated the<br />

presence of saponins, flavonoids, tannins, alkaloids and steroids.<br />

Keywords: <strong>Bixa</strong> <strong>orellana</strong>; <strong>Urucum</strong>; Annatto; Antimicrobial activity.<br />

Introdução<br />

A espécie medicinal <strong>Bixa</strong> <strong>orellana</strong> L. pertence à<br />

família das <strong>Bixa</strong>ceae, sendo popularmente conhecida como<br />

urucu, urucum, açafroa, açafroeira-da-terra, roucou, bija,<br />

achiote, annatto, conforme a região (Rodrigues et al.,<br />

1988). Trata-se <strong>de</strong> um arbusto gran<strong>de</strong> ou árvore pequena,<br />

com 3 a 5 m <strong>de</strong> altura e <strong>de</strong> copa bem <strong>de</strong>senvolvida. As<br />

folhas são simples, glabras, medindo 8 a 11 cm <strong>de</strong><br />

comprimento. As flores são levemente rosas, dispostas<br />

em panículas. O fruto é uma cápsula <strong>de</strong>iscente ovói<strong>de</strong>,<br />

com dois ou três carpelos, cobertos por espinhos. É<br />

uma espécie originária da América tropical, incluindo a<br />

Amazônia brasileira (Lorenzi & Matos, 2002).<br />

Além da utilização na culinária do colorau, um<br />

pigmento extraído das sementes, o urucum é empregado<br />

na medicina popular como medicamento para doenças<br />

coronarianas, afecções do estômago e intestino, afecções<br />

respiratórias, queimaduras, e como afrodisíaco. As<br />

folhas combatem as afecções renais e febre (Lorenzi &<br />

Matos, 2002; Teske & Trentini, 1994).<br />

Segundo estudos <strong>de</strong> Cáceres et al. (1990, 1995)<br />

sobre a ativida<strong>de</strong> <strong>antimicrobiana</strong> <strong>de</strong> B. <strong>orellana</strong>, os extratos<br />

obtidos do fruto, da raiz e da folha apresentaram<br />

resultados positivos, enquanto o extrato das sementes<br />

não apresentou esta ativida<strong>de</strong>. Huhtanen (1980) estudou<br />

a tintura do fruto frente ao Clostridium botulinum,<br />

<strong>de</strong>terminando o valor da MIC em 31 ppm.<br />

Segundo Lorenzi e Matos (2002), o estudo<br />

fitoquímico revelou a existência, na folha, <strong>de</strong> um óleo<br />

volátil contendo mono e sesquiterpenos, entre os quais<br />

<strong>de</strong>staca-se ishwarano e vários flavonói<strong>de</strong>s. Na semente<br />

ocorre um óleo essencial rico em all-E-geranilgeraniol,<br />

monoterpenos e sesquiterpenos oxigenados, além <strong>de</strong><br />

carotenói<strong>de</strong>s bixina e norbixina, responsáveis pela cor, e<br />

alfa e beta-caroteno em teores mais baixos. Mercadante<br />

et al. (1996, 1997a e b e 1999) isolaram e elucidaram<br />

vários carotenói<strong>de</strong>s menores presentes nas sementes.<br />

Os estudos realizados para verificar a ativida<strong>de</strong><br />

<strong>antimicrobiana</strong> <strong>de</strong> plantas têm sua importância cada vez<br />

maior, tendo em vista a resistência crescente dos microrganismos<br />

aos antibióticos hoje comercializados (Cunha<br />

et al., 1995). Na tentativa <strong>de</strong> aumentar o conhecimento<br />

sobre plantas medicinais com potencial antimicrobiano,<br />

<strong>de</strong>spertou-se o interesse em avaliar as possíveis<br />

proprieda<strong>de</strong>s do urucum (<strong>Bixa</strong> <strong>orellana</strong> L.), pesquisando<br />

as tinturas <strong>de</strong> órgãos frescos e secos do vegetal.<br />

Material e métodos<br />

Coleta e preparo do material botânico<br />

Foram coletadas amostras <strong>de</strong> caule, flor, folha,<br />

fruto e raiz <strong>de</strong> <strong>de</strong>z exemplares adultos <strong>de</strong> B. <strong>orellana</strong>, no<br />

período <strong>de</strong> abril a junho <strong>de</strong> 1998, no Sítio da Lagoa, em<br />

1 Departamento <strong>de</strong> Ciências Biológicas da Escola <strong>de</strong> Farmácia e Odontologia <strong>de</strong> Alfenas, Centro Universitário Fe<strong>de</strong>ral<br />

(Efoa/Ceufe) – Alfenas-MG – 37130-000<br />

2 Departamento <strong>de</strong> Farmácia da Efoa/Ceufe.<br />

3 Universida<strong>de</strong> <strong>de</strong> Alfenas (Unifenas), Universida<strong>de</strong> do Vale do Rio Ver<strong>de</strong> (Unincor) e Efoa/Ceufe.


48<br />

Ana Marina Silveira Pinto Coelho, Geraldo Alves da Silva, Olivina Maria Carneiro Vieira, Jorge Kleber Chavasco<br />

Alfenas, MG. O material foi i<strong>de</strong>ntificado e a exsicata<br />

<strong>de</strong>positada no Herbário da Universida<strong>de</strong> Fe<strong>de</strong>ral <strong>de</strong><br />

Lavras sob o número 15.817.<br />

Preparo das tinturas<br />

As tinturas <strong>de</strong> órgãos frescos e secos foram<br />

obtidas conforme técnica <strong>de</strong>scrita por Cáceres et al.<br />

(1990, 1995), sendo pesados 200 g <strong>de</strong> cada órgão e<br />

triturados em liquidificador com 800 mL <strong>de</strong> etanol 70°<br />

GL. Posteriormente, foram concentradas em evaporador<br />

rotatório e filtradas através <strong>de</strong> filtro Millipore ®. As<br />

tinturas foram neutralizadas com hidróxido <strong>de</strong> amônia e<br />

a seguir divididas em dois grupos, refrigerados e<br />

liofilizados (somente <strong>de</strong> órgãos frescos), conforme os<br />

processos <strong>de</strong> conservação utilizados.<br />

Determinação da ativida<strong>de</strong> <strong>antimicrobiana</strong><br />

Os microrganismos empregados (bactérias e<br />

leveduras) foram isolados <strong>de</strong> amostras clínicas e mantidos<br />

no Laboratório <strong>de</strong> Microbiologia e Imunologia da Escola<br />

<strong>de</strong> Farmácia e Odontologia <strong>de</strong> Alfenas (Efoa/Ceufe).<br />

Foram utilizados 2 fungos (Cryptococcus neoformans e<br />

Candida albicans) e 12 bactérias (Bacillus sp, Bacillus subtilis,<br />

Chromobacterium violaceum, Enterococcus faecalis, Enterobacter<br />

aerogenes, Escherichia coli, Proteus sp, Pseudomonas aeruginosa,<br />

Salmonella sp, Salmonella enteritidis, Serratia marcescens, e<br />

Staphylococcus aureus).<br />

As tinturas foram submetidas à avaliação da<br />

ativida<strong>de</strong> <strong>antimicrobiana</strong> pela adaptação da técnica <strong>de</strong><br />

difusão em ágar <strong>de</strong> Bauer et al. (1966). As suspensões<br />

microbianas utilizadas nos testes foram ajustadas para<br />

turvação, equivalente ao tubo 1 da Escala <strong>de</strong> Mac Farland<br />

(Bier, 1980). As culturas foram transferidas para o meio<br />

<strong>de</strong> cultura com “swabs”, sendo aplicados 30 µL <strong>de</strong> tintura<br />

por cavida<strong>de</strong> feita com tubo <strong>de</strong> 4 mm <strong>de</strong> diâmetro.<br />

As tinturas liofilizadas foram ressuspendidas em água<br />

<strong>de</strong>stilada estéril com a meta<strong>de</strong> do volume original.<br />

Para a maioria das bactérias foi empregado<br />

meio <strong>de</strong> ágar Nutriente, para Enterococcus faecalis, ágar<br />

Sangue e para os fungos ágar Sabouraud. As amostras<br />

das tinturas foram <strong>de</strong>positadas nas cavida<strong>de</strong>s, do meio<br />

<strong>de</strong> cultura (6 por placa), correspon<strong>de</strong>ntes às 6 tinturas<br />

<strong>de</strong> órgãos da planta. Após incubação a 37ºC, por 24<br />

horas, anotou-se o diâmetro do halo <strong>de</strong> inibição <strong>de</strong><br />

crescimento, com auxílio <strong>de</strong> paquímetro. Foram<br />

consi<strong>de</strong>radas com ativida<strong>de</strong> <strong>antimicrobiana</strong> as tinturas<br />

que produziram halos <strong>de</strong> inibição. Cada experimento foi<br />

realizado em réplicas <strong>de</strong> cinco.<br />

Triagem fitoquímica<br />

Na triagem fitoquímica foram pesquisados os<br />

seguintes grupos <strong>de</strong> princípios ativos: flavonói<strong>de</strong>s, pela<br />

técnica <strong>de</strong> reação <strong>de</strong> Shinoda e reação com hidróxidos<br />

alcalinos; taninos, pelo método <strong>de</strong> precipitação com sais<br />

<strong>de</strong> ferro, acetato <strong>de</strong> chumbo, alcalói<strong>de</strong>s, gelatina e acetato<br />

<strong>de</strong> cobre; alcalói<strong>de</strong>s, pelo método <strong>de</strong> precipitação com<br />

os reativos <strong>de</strong> Mayer, Bertrand, Dragendorff e<br />

Bouchardat; esterói<strong>de</strong>s, pela reação <strong>de</strong> Liebermann-<br />

Burchard; saponinas, pela agitação do extrato aquoso<br />

com formação <strong>de</strong> espuma persistente; cumarinas,<br />

utilizando a técnica com metanol (Costa, 1982).<br />

Análise estatística<br />

A análise estatística dos resultados foi feita pelo<br />

método <strong>de</strong> análise <strong>de</strong> variância – Anova (Vieira, 1991).<br />

Resultados<br />

<strong>Ativida<strong>de</strong></strong> <strong>antimicrobiana</strong><br />

As tabelas e figuras 1, 2 e 3 mostram os<br />

resultados obtidos com a utilização <strong>de</strong> tinturas <strong>de</strong><br />

órgãos da planta B. <strong>orellana</strong> diante <strong>de</strong> doze amostras<br />

bacterianas e duas fúngicas. Po<strong>de</strong>-se observar que as<br />

amostras fúngicas apresentaram resistência.<br />

Revista Lecta, Bragança Paulista, v. 21, n. 1/2, p. 47-54, jan./<strong>de</strong>z. 2003


Revista Lecta, Bragança Paulista, v. 21, n. 1/2, p. 47-54, jan./<strong>de</strong>z. 2003<br />

<strong>Ativida<strong>de</strong></strong> <strong>antimicrobiana</strong> <strong>de</strong> <strong>Bixa</strong> <strong>orellana</strong> L. (<strong>Urucum</strong>)<br />

TABELA 1 – Avaliação da ativida<strong>de</strong> <strong>antimicrobiana</strong> in vitro <strong>de</strong> tinturas <strong>de</strong> órgãos frescos <strong>de</strong> B. <strong>orellana</strong> L., ante 14<br />

espécies microbianas, utilizando-se o método da difusão em ágar. Determinação dos halos <strong>de</strong><br />

inibição* (mm)<br />

TABLE 1 – Evaluation of the antimicrobial activity in vitro of tinctures of fresh organ from B. <strong>orellana</strong> L., employing<br />

14 microbial stumps by diffusion method in agar. Determination of inhibition halos* (mm)<br />

TINTURAS DE ÓRGÃOS FRESCOS / HALO DE INIBIÇÃO*(mm)<br />

Microorganismos Caule Flor Folha Fruto Fruto Ver<strong>de</strong> Raiz<br />

Cryptococcus neoformans - - - - - -<br />

Candida albicans - - - - - -<br />

Bacillus sp 7,8± 1,3 5,1±0,4 9,7±1,4 - 8,6±2,3 7,9±0,4<br />

Bacillus subtilis 10,6± 2,0 9,0± 1,1 11,4±0,8 - 10,3±1,2 10,5±1,1<br />

Chromobacterium violaceum 7,1±2,5 - 8,3±1,5 - 6,5±1,0 6,0±1,2<br />

Enterococcus faecalis - - 8,8±1,8 - 8,0±2,0 7,1±2,7<br />

Enterobacter aerogenes 10,1±1,3 7,6± 1,3 12,5±1,2 - 11,3±2,4 9,7±0,3<br />

Escherichia coli - - 8,6±1,2 - - -<br />

Proteus sp 7,7±2,0 6,9±1,2 10,0±2,0 - 9,1±1,4 8,1± 1,7<br />

Pseudomonas aeruginosa 7,6±2,7 4,6±1,7 11,1±1,7 - 8,5± 0,9 6,8±0,7<br />

Salmonella sp 6,2±1,2 5,3± 0,7 10,1±1,1 - 9,0±2,5 9,1±4,5<br />

Salmonella enteritidis 6,5±1,6 5,6±2,2 10,0±1,5 - 7,3±0,7 6,3±1,1<br />

Serratia marcescens 6,8±1,8 5,6±1,8 8,5±1,2 - 6,5±0,5 7,5±1,5<br />

Staphylococcus aureus<br />

* Valor médio <strong>de</strong> 5 réplicas.<br />

10,9±4,1 7,5±1,2 15,0± 4,5 - 10,5±2,5 12,4±4,9<br />

Halo <strong>de</strong> Inibição (mm)<br />

16<br />

14<br />

12<br />

10<br />

8<br />

6<br />

4<br />

2<br />

0<br />

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( -) Ausência <strong>de</strong> halo <strong>de</strong> inibição.<br />

CAULE FLOR FOLHA FRUTO FRUTO VERDE RAIZ<br />

Tinturas <strong>de</strong> Órgãos Frescos<br />

<br />

Bacillus sp<br />

<br />

Cryptococcus neoformans Candida albicans<br />

Bacillus subtilis Chromobacterium violaceum Enterococcus faecalis<br />

<br />

<br />

Enterobacter aerogenes<br />

Escherichia <br />

coli<br />

Pseudomonas aeruginosa<br />

Salmonella sp<br />

Serratia marcescens Staphylococcus aureus<br />

<br />

Proteus sp<br />

<br />

Salmonella enteritidis<br />

FIGURA 1 – Avaliação da ativida<strong>de</strong> <strong>antimicrobiana</strong> in vitro <strong>de</strong> tinturas <strong>de</strong> órgãos frescos <strong>de</strong> B. <strong>orellana</strong> L., ante 14<br />

espécies microbianas, utilizando-se o método da difusão em ágar. Determinação dos halos <strong>de</strong><br />

inibição* (mm)<br />

FIGURE 1 – Evaluation of the antimicrobial activity in vitro of tinctures of fresh organ from B. <strong>orellana</strong> L., employing<br />

14 microbial stumps by diffusion method in agar. Determination of inhibition halos* (mm)<br />

49


50<br />

Ana Marina Silveira Pinto Coelho, Geraldo Alves da Silva, Olivina Maria Carneiro Vieira, Jorge Kleber Chavasco<br />

TABELA 2 – Avaliação da ativida<strong>de</strong> <strong>antimicrobiana</strong> in vitro <strong>de</strong> tinturas liofilizadas <strong>de</strong> B. <strong>orellana</strong> L., ante 14 espécies<br />

microbianas, utilizando-se o método da difusão em ágar. Determinação dos halos <strong>de</strong> inibição* (mm)<br />

TABLE 2 – Evaluation of the antimicrobial activity in vitro of lyophilized tinctures from B. <strong>orellana</strong> L., employing<br />

14 microbial stumps by diffusion method in agar. Determination of inhibition halos* (mm)<br />

TINTURAS LIOFILIZADAS / HALOS DE INIBIÇÃO*(mm)<br />

Microorganismos Caule Flor Folha Fruto Fruto Ver<strong>de</strong> Raiz<br />

Cryptococcus neoformans - - - - - -<br />

Candida albicans - - - - - -<br />

Bacillus sp 8,5±1,2 8,4± 2,4 12,6±1,0 - 9,9±1,8 10,2±1,5<br />

Bacillus subtilis 8,8±1,17 8,8±1,4 12,6±1,0 - 10,1±0,6 10,4±0,3<br />

Chromobacterium violaceum 10,0±2,2 12,6±1,9 14,0±2,0 - 12,8± ±1,4 10,8±1,9<br />

Enterococcus faecalis 7,7±1,3 7,2±1,7 11,2±2,2 - 7,4± ±1,0 8,0±1,1<br />

Enterobacter aerogenes 8,4±1,6 9,0±0,6 14,9±0,8 - 11,6±1,0 11,3±0,8<br />

Escherichia coli 10,0±1,9 10,0±2,7 12,2±2,9 - 8,4±0,5 9,4±1,1<br />

Proteus sp 10,1±1,7 10,6±1,7 14,0±1,1 - 10,6±1,7 10,4±1,9<br />

Pseudomonas aeruginosa 10,6±3,6 12,2±2,1 15,8±1,9 - 12,8±1,8 11,4±1,2<br />

Salmonella sp 10,2±2,2 11,4±1,6 15,7±1,9 - 12,6±1,6 12,2±1,1<br />

Salmonella enteritidis 8,6±2,1 10,0±2,5 13,6±2,2 - 10,8±1,1 9,8±1,1<br />

Serratia marcescens 10,2±2,1 11,2±2,2 15,4±2,2 - 12,6±1,7 11,4±1,0<br />

Staphylococcus aureus<br />

* Valor médio <strong>de</strong> 5 réplicas.<br />

( -) Ausência <strong>de</strong> halo <strong>de</strong> inibição.<br />

8,2±1,1 12,3±1,6 11,4±1,3 - 8,8±1,6 8,8±0,9<br />

Halo <strong>de</strong> Inibição (mm)<br />

18<br />

16<br />

14<br />

12<br />

10<br />

8<br />

6<br />

4<br />

2<br />

0<br />

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<br />

<br />

<br />

CAULE FLOR FOLHA FRUTO FRUTO VERDE RAIZ<br />

Cryptococcus neoformans Candida albicans<br />

Chromobacterium violaceum<br />

<br />

Enterococcus faecalis<br />

<br />

Proteus sp Pseudomonas<br />

<br />

aeruginosa<br />

Serratia marcescens Staphylococcus aureus<br />

Tinturas Liofilizadas<br />

<br />

Bacillus<br />

sp Bacillus subtilis<br />

Enterobacter aerogenes Escherichia coli<br />

Salmonella sp Salmonella enteritidis<br />

FIGURA 2 – Avaliação da ativida<strong>de</strong> <strong>antimicrobiana</strong> in vitro <strong>de</strong> tinturas liofilizadas <strong>de</strong> B. <strong>orellana</strong> L., ante 14 espécies<br />

microbianas, utilizando-se o método da difusão em ágar. Determinação dos halos <strong>de</strong> inibição* (mm)<br />

FIGURE 2 – Evaluation of the antimicrobial activity in vitro of lyophilized tinctures from B. <strong>orellana</strong> L., employing<br />

14 microbial stumps by diffusion method in agar. Determination of inhibition halos* (mm)<br />

Revista Lecta, Bragança Paulista, v. 21, n. 1/2, p. 47-54, jan./<strong>de</strong>z. 2003


Revista Lecta, Bragança Paulista, v. 21, n. 1/2, p. 47-54, jan./<strong>de</strong>z. 2003<br />

<strong>Ativida<strong>de</strong></strong> <strong>antimicrobiana</strong> <strong>de</strong> <strong>Bixa</strong> <strong>orellana</strong> L. (<strong>Urucum</strong>)<br />

TABELA 3 – Avaliação da ativida<strong>de</strong> <strong>antimicrobiana</strong> in vitro <strong>de</strong> tinturas <strong>de</strong> órgãos secos obtidas <strong>de</strong> B. <strong>orellana</strong> L., ante<br />

14 espécies microbianas, utilizando-se o método da difusão em ágar. Determinação dos halos <strong>de</strong><br />

inibição* (mm)<br />

TABLE 3 – Evaluation of the antimicrobial activity in vitro of tinctures of dry organ from B. <strong>orellana</strong> L., employing<br />

14 microbial stumps by diffusion method in agar. Determination of inhibition halos* (mm)<br />

TINTURAS DE ÓRGÃOS SECOS/HALOS DE INIBIÇÃO * (mm)<br />

Microorganismos Caule Flor Folha Fruto Fruto Ver<strong>de</strong> Raiz<br />

Cryptococcus neoformans – – – – – –<br />

Candida albicans – – – – – –<br />

Bacillus sp 6,0±1,6 10,2±2,1 10,6±0,8 – 9,6±3,3 5,2±0,5<br />

Bacillus subtilis 10,7±3,0 10,6±3,8 10,4±2,0 – 9,4±2,5 5,8±1,7<br />

Chromobacterium violaceum 8,9±2,0 8,4±1,6 11,6±1,3 – 10,0±1,1 7,2±1,1<br />

Enterococcus faecalis – 7,2±2,3 10,0±1,4 – 9,4±1,3 –<br />

Enterobacter aerogenes 8,2±0,8 10,0±1,6 11,3±0,8 – 7,8±0,4 7,1±0,2<br />

Escherichia coli 9,8±0,7 8,6±0,8 12,2±2,3 – 10,8±0,4 7,8±0,7<br />

Proteus sp 9,4±0,8 10,8±1,4 12,2±1,1 – 11,4±1,6 8,0±1,4<br />

Pseudomonas aeruginosa 9,2±2,3 10,6±1,2 12,8±3,0 – 11,6±2,3 9,0±2,8<br />

Salmonella sp 9,9±2,0 10,6±1,0 13,2±0,9 – 10,6±1,2 6,2±1,0<br />

Salmonella enteritidis 8,7±1,5 10,8±0,7 13,0±1,4 – 10,2±2,6 7,2±0,9<br />

Serratia marcescens 7,8±1,1 9,0±0,8 10,8±1,6 – 9,00 ±2,3 5,4±0,8<br />

Staphylococcus aureus 8,8±1,1 11,6±1,7 11,4±1,2 – 11,0±1,7 7,6±1,9<br />

* Valor médio <strong>de</strong> 5 réplicas.<br />

(–) Ausência <strong>de</strong> halo <strong>de</strong> inibição.<br />

Halo <strong>de</strong> Inibição (mm)<br />

14<br />

12<br />

10<br />

8<br />

6<br />

4<br />

2<br />

0<br />

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<br />

<br />

CAULE FLOR FOLHA FRUTO FRUTO VERDE RAIZ<br />

Cryptococcus neoformans Candida albicans<br />

Tinturas <strong>de</strong> Órgãos Secos<br />

<br />

Bacillus sp Bacillus subtilis<br />

<br />

<br />

<br />

Chromobacterium violaceum Enterococcus faecalis Enterobacter aerogenes Escherichia coli<br />

Proteus sp Pseudomonas aeruginosa<br />

Salmonella sp Salmonella enteritidis<br />

Serratia marcescens<br />

Staphylococcus aureus<br />

FIGURA 3 – Avaliação da ativida<strong>de</strong> <strong>antimicrobiana</strong> in vitro <strong>de</strong> tinturas <strong>de</strong> órgãos secos obtidas <strong>de</strong> B. <strong>orellana</strong> L., ante<br />

14 espécies microbianas, utilizando-se o método da difusão em ágar. Determinação dos halos <strong>de</strong><br />

inibição* (mm)<br />

FIGURE 3 – Evaluation of the antimicrobial activity in vitro of tinctures of dry organ from B. <strong>orellana</strong> L., employing<br />

14 microbial stumps by diffusion method in agar. Determination of inhibition halos* (mm)<br />

51


52<br />

Ana Marina Silveira Pinto Coelho, Geraldo Alves da Silva, Olivina Maria Carneiro Vieira, Jorge Kleber Chavasco<br />

Triagem Fitoquímica<br />

Conforme a Tabela 4, verificou-se a presença <strong>de</strong> saponinas, flavonói<strong>de</strong>s, taninos, alcalói<strong>de</strong>s e esterói<strong>de</strong>s.<br />

TABELA 4 – Triagem fitoquímica <strong>de</strong> tinturas <strong>de</strong> B. <strong>orellana</strong> L.<br />

TABLE 4 – Phytochemical screening of the tinctures from B. <strong>orellana</strong> L.<br />

Extratos Saponinas Flavonói<strong>de</strong>s Taninos Alcalói<strong>de</strong>s Esterói<strong>de</strong>s Cumarina<br />

T1 + + + + + -<br />

Caule<br />

T2<br />

T3<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

-<br />

-<br />

T1 + + + + + -<br />

Flor<br />

T2<br />

T3<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

-<br />

-<br />

T1 + + + + + -<br />

Folha<br />

T2<br />

T3<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

-<br />

-<br />

T1 + + + + + -<br />

Fruto<br />

T2<br />

T3<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

-<br />

-<br />

T1 + + + + + -<br />

Fruto Ver<strong>de</strong><br />

T2<br />

T3<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

-<br />

-<br />

T1 + + + + + -<br />

Raiz<br />

T2<br />

T3<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

+<br />

-<br />

-<br />

T1 – Tintura <strong>de</strong> órgão fresco; T2 – Tintura liofilizada; T3 – Tintura <strong>de</strong> órgão seco.<br />

+ - Presença; − - Ausência.<br />

Discussão<br />

De acordo com os resultados, po<strong>de</strong>mos<br />

verificar que todas as tinturas foram inativas ante as<br />

espécies fúngicas testadas (C. albicans e C. neoformans),<br />

in<strong>de</strong>pen<strong>de</strong>ntemente do órgão e da droga vegetal. Testes<br />

realizados com o extrato hidroalcoólico a 95% <strong>de</strong> folha<br />

<strong>de</strong> B. <strong>orellana</strong> L. (Irobi et al., 1996) mostraram resultados<br />

semelhantes em relação às cepas <strong>de</strong> Candida utilis e<br />

Aspergillus niger. Na literatura consultada não constatamos<br />

nenhum trabalho <strong>de</strong>monstrando ação antifúngica<br />

do urucum.<br />

Comparando as tinturas obtidas <strong>de</strong> folhas<br />

(frescas, droga e liofilizada) <strong>de</strong> B. <strong>orellana</strong>, Tabelas e Figuras<br />

1, 2 e 3, a tintura liofilizada apresentou maior ativida<strong>de</strong><br />

<strong>antimicrobiana</strong> diante das bactérias testadas, exceto a S.<br />

aureus. Maiores halos <strong>de</strong> inibição foram constatados ante<br />

as culturas <strong>de</strong> P. aeruginosa (15,8 mm), Salmonella sp (15,7<br />

mm), S. marcescens (15,4 mm), E. aerogenes (14,94 mm), C.<br />

violaceum (14mm) e Proteus sp (14 mm) (Tabela 2).<br />

Caceres et al. (1995) investigaram 46 plantas,<br />

entre elas <strong>Bixa</strong> <strong>orellana</strong>, quanto à ativida<strong>de</strong>, contra cinco<br />

cepas <strong>de</strong> Neisseria gonorrhoeae através <strong>de</strong> extrato<br />

hidroalcóolico a 50% utilizando a folha e a raiz, e<br />

constataram que somente a folha possui efeito inibidor.<br />

No presente trabalho, as tinturas obtidas <strong>de</strong> folhas e<br />

raiz mostraram ativida<strong>de</strong> <strong>antimicrobiana</strong>, provavelmente<br />

por se tratar <strong>de</strong> testes envolvendo outras bactérias.<br />

Resultados <strong>de</strong> testes realizados com o extrato<br />

hidroalcoólico a 95% (Irobi et al., 1996) obtido <strong>de</strong> folha<br />

fresca do urucum <strong>de</strong>monstraram ativida<strong>de</strong> antibacteriana<br />

somente contra bactérias gram positivas, como B. subtilis e<br />

S. aureus, o que está concordante com os resultados do<br />

presente trabalho, apesar <strong>de</strong> termos <strong>de</strong>tectado também<br />

inibição para bactérias gram negativas. Nos testes realizados<br />

por Irobi et al. (1996), diante <strong>de</strong> bactérias gram negativas<br />

como Escherichia coli e Serratia marcescens, o extrato hidroalcoólico<br />

<strong>de</strong> folha foi inativo. Variações nos resultados<br />

po<strong>de</strong>m ser explicadas por vários fatores como local, época<br />

e período <strong>de</strong> coleta da planta, promovendo diferenças<br />

<strong>de</strong> concentração entre as tinturas (Oliveira, 1991).<br />

Com relação aos <strong>de</strong>mais órgãos, a forma <strong>de</strong><br />

tintura liofilizada obteve maior ativida<strong>de</strong>, em<br />

comparação com as <strong>de</strong>mais tinturas.<br />

As tinturas possuem saponinas, flavonói<strong>de</strong>s,<br />

taninos, alcalói<strong>de</strong>s e esterói<strong>de</strong>s, encontradas na triagem<br />

fitoquímica, o que possivelmente comprova sua ativida<strong>de</strong><br />

<strong>antimicrobiana</strong>. O po<strong>de</strong>r anti-séptico revelado pelos<br />

Revista Lecta, Bragança Paulista, v. 21, n. 1/2, p. 47-54, jan./<strong>de</strong>z. 2003


taninos explica o fato <strong>de</strong>stes impedirem o <strong>de</strong>senvolvimento<br />

<strong>de</strong> microrganismos, associado à própria ação<br />

<strong>de</strong>sinfetante que lhes confere o seu caráter fenólico<br />

(Costa, 1977), provavelmente responsável pela ação<br />

<strong>antimicrobiana</strong> das tinturas.<br />

Cowan (1999) relatou, baseado em trabalhos<br />

encontrados na literatura, que a ativida<strong>de</strong> <strong>antimicrobiana</strong><br />

dos flavonói<strong>de</strong>s, possivelmente, é <strong>de</strong>vida à habilida<strong>de</strong><br />

<strong>de</strong>ste grupo <strong>de</strong> se complexar com proteínas solúveis e<br />

extracelulares e também com a pare<strong>de</strong> <strong>de</strong> células<br />

bacterianas. Muitos flavonói<strong>de</strong>s lipofílicos po<strong>de</strong>m<br />

romper as membranas microbianas. Alguns grupos <strong>de</strong><br />

isoflavonói<strong>de</strong>s possuem proprieda<strong>de</strong>s antifúngicas,<br />

porém nenhuma das tinturas testadas apresentou esta<br />

ativida<strong>de</strong> (Costa, 1977), provavelmente por se encontrar<br />

em concentração baixa ou por pertencer a outros<br />

grupos <strong>de</strong> flavonói<strong>de</strong>s. Com relação aos alcalói<strong>de</strong>s, Iwu<br />

et al. (1999) constataram sua presença, conferindo<br />

ativida<strong>de</strong> antibacteriana em plantas como Cryptolepis<br />

sanguinolenta sobre isolados <strong>de</strong> E. coli, Staphylococcus,<br />

Pseudomonas e Salmonella e Nauclea latifolia sobre isolados<br />

<strong>de</strong> Pseudomonas aeruginosa e Salmonella sp. Neste trabalho<br />

a presença <strong>de</strong> alcalói<strong>de</strong>s foi <strong>de</strong>tectada em todas as tinturas.<br />

Sobre as saponinas, sua ativida<strong>de</strong> <strong>de</strong>pen<strong>de</strong> das suas<br />

estruturas. As saponinas esteroidais mono<strong>de</strong>smosídicas<br />

e várias triterpênicas também com uma única ca<strong>de</strong>ia<br />

glicídica ligada ao C3 possuem proprieda<strong>de</strong>s típicas do<br />

grupo, incluindo as proprieda<strong>de</strong>s hemolíticas, bacterios-<br />

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<strong>Ativida<strong>de</strong></strong> <strong>antimicrobiana</strong> <strong>de</strong> <strong>Bixa</strong> <strong>orellana</strong> L. (<strong>Urucum</strong>)<br />

táticas e fungicidas, po<strong>de</strong>ndo explicar a ativida<strong>de</strong><br />

<strong>antimicrobiana</strong> <strong>de</strong>stas tinturas (Costa, 1977). Iwu et al.<br />

(1999) citam em seu trabalho que as saponinas foram<br />

uma das substâncias responsáveis pela ativida<strong>de</strong><br />

antibacteriana contra bactérias gram positivas e gram<br />

negativas encontrada na raiz <strong>de</strong> Nauclea latifolia. Srivastava<br />

et al. (1999), em seu trabalho, citam que vários constituintes<br />

da B. <strong>orellana</strong> foram isolados e i<strong>de</strong>ntificados,<br />

entre os quais incluem os carotenói<strong>de</strong>s, terpenói<strong>de</strong>s,<br />

flavonói<strong>de</strong>s, taninos e traços <strong>de</strong> alcalói<strong>de</strong>s, resultados<br />

estes semelhantes aos nossos. Apesar <strong>de</strong> <strong>de</strong>tectarmos a<br />

presença <strong>de</strong> saponinas, flavonói<strong>de</strong>s, taninos, alcalói<strong>de</strong>s e<br />

esterói<strong>de</strong>s nas tinturas obtidas <strong>de</strong> fruto, as mesmas não<br />

apresentaram ativida<strong>de</strong> <strong>antimicrobiana</strong>, provavelmente<br />

por estar em baixas concentrações, que não foram<br />

avaliadas porque os testes foram apenas qualitativos.<br />

Conclusões<br />

As tinturas <strong>de</strong> B. <strong>orellana</strong> preparadas a partir <strong>de</strong><br />

órgãos e suas drogas foram inativas em face das<br />

leveduras C. albicans e C. neoformans.<br />

As tinturas preparadas <strong>de</strong> folhas e suas drogas<br />

produziram halos <strong>de</strong> inibição em relação a todas as<br />

bactérias.<br />

As tinturas liofilizadas e as tinturas obtidas <strong>de</strong><br />

drogas originadas dos órgãos fruto imaturo e flor<br />

inibiram todas as bactérias.<br />

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