Diagnóstico molecular das infecções por Chlamydia trachomatis e ...

1.4.5 Testes de amplificação de ácidos nucléicos (NAATs)
Na última década foi desenvolvida uma nova geração de testes que
amplificam e detectam seqüências específicas de DNA ou RNA de C. trachomatis e
N. gonorrhoeae e têm sido considerados os métodos mais sensíveis e promissores
na identificação destes microrganismos (CDC 2002, Fang et al. 2008). Os NAATs
revolucionaram o diagnóstico das infecções clamidial e gonocócica por serem
capazes de detectar estes agentes a partir de uma única cópia de DNA ou RNA o
que aumenta consideravelmente a sensibilidade destes testes (CDC 2002, Olshen &
Shrier 2005). Comparados à cultura, os NAATs mostram sensibilidades que variam
de 82,6% a 100% para C. trachomatis e de 82,5% a 100% para a N. gonorrhoeae e
especificidades superiores a 96% para os dois microrganismos (Vincelette et al.
1999, Johnson et al. 2000, Van der Pol et al. 2001, Van Dyck et al. 2001, Akduman
et al. 2002, Black et al. 2002, Ryan et al. 2007, Ho et al. 2009).
Existem vários kits comerciais disponíveis que utilizam diferentes métodos de
amplificação e diferentes seqüências-alvo de ácidos nucléicos. Entre os kits que
amplificam sequências do DNA clamidial e gonocócico estão:
Becton Dickinson BDProbe Tec TM ET (Becton, Dickinson and Company)
baseia-se na amplificação por deslocamento de fita (SDA – strand displacement
amplification);
Roche Cobas Amplicor (Roche Diagnostics Corporation) utiliza a reação em
cadeia da polimerase (PCR) e permite a detecção simultânea de clamídia e
neisseria;
Abbott LCx (Abbott Laboratories) utiliza a reação em cadeia da ligase (LCR),
porém foi retirado do mercado em 2002 devido a problemas com a reprodutibilidade
do teste. Amostras que eram analisadas em duplicata apresentavam resultados
diferentes sendo este fato mais freqüente entre as amostras de urina (Gronowski et
al. 2000, Olshen & Shrier 2005).
Apenas o kit GenProbe APTIMA TM amplifica diferentes regiões do RNA
ribossomal 23S clamidial e 16S do gonococo e baseia-se na técnica de amplificação
mediada por transcrição (TMA). Os kits GenProbe realizam o diagnóstico da C.
trachomatis (APTIMA CT) ou da N. gonorrhoeae (APTIMA GC) separadamente ou
simultaneamente (APTIMA Combo 2) (CDC 2002).
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