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RICARDO GENARI CARACTERÍSTICAS DE ... - SBI-Café - UFV

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presente no meio interfere também na atividade de PAL (ALBERSHEIM e<br />

KILLIAS, 1962). Os estudos com PAL intracelular parcialmente purificada de<br />

Erwinia carotovora revelaram que sua atividade sobre o tetrâmero foi inferior à<br />

do polímero de galacturonato (MORAN et al., 1968).<br />

Quadro 3 - Atividades de pectato liase e pectina liase no sobrenadante do<br />

crescimento, nas células íntegras e na suspensão de células rompidas<br />

de Klebsiella oxytoca de cultura obtida após 48 horas de<br />

crescimento, a 25ºC e sem agitação, em frascos Erlenmeyer com<br />

1,0 L de meio mineral contendo uma membrana de diálise de 2.000<br />

ou 12-14.000 Da, com solução de pectina Sigma a 1,4% (p/ v) em seu<br />

interior. As cadeias menores que o diâmetro dos poros das<br />

membranas foram difundidas para o meio mineral, sendo utilizadas<br />

como fonte de carbono pela bactéria<br />

Localização da<br />

Atividade Enzimática<br />

Membrana de<br />

2.000 Da<br />

54<br />

Membrana de<br />

14.000 Da<br />

PAL (U) PL (U) PAL (U) PL (U)<br />

Sobrenadante da Cultura 118,5 13,5 96,4 7,1<br />

Células Íntegras 4,7 0,9 0,7 0,2<br />

Células Rompidas 7,9 2,9 0,8 0,2<br />

A bactéria também secretou pectato liase quando foi cultivada em meio<br />

mineral contendo cadeias de pectina maiores que 30.000 Da (Quadro 5).<br />

Entretanto, níveis insignificantes de enzima extracelular foram detectados, quando<br />

Klebsiella oxytoca foi cultivada em meio mineral contendo cadeias de pectina<br />

maiores que 3.000 Da e menores que 30.000 Da (Quadros 4 e 5). As baixas<br />

atividades específicas de PAL encontradas no experimento com frações de pectina<br />

menores que 3.000 Da (Quadro 4) são explicadas pela menor quantidade de células<br />

obtidas no experimento em virtude da menor quantidade de fonte de carbono<br />

(0,056% p/ v). Além disso, atividade de PAL foi detectada na suspensão de células

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