RICARDO GENARI CARACTERÍSTICAS DE ... - SBI-Café - UFV

porções isoladas das células de Klebsiella oxytoca. A bactéria foi
cultivada por 24 horas em 1,0 L de meio MMP contido em frasco
Erlenmeyer de 2,8 L, pH 7,0, sem agitação, a 25ºC. A metodologia de
extração do periplasma foi realizada sem a adição de EDTA
Localização da Atividade Enzimática Atividade de Pectato liase (U)
Sobrenadante da cultura 0,34
Células íntegras 0,11
Periplasma 0,16
Esferoplastos 0,40
Sobrenadante de células rompidas 2,62
Precipitado de células rompidas 0,48
A extrusão, a secreção, a difusão ou a autólise da célula podem ser
facilitadas pela ação quelante do EDTA, para a retirada da enzima intracelular (HSU
e VAUGHN, 1969). A classificação da enzima como extracelular, segundo Pollock
(1963), citado por HSU e VAUGHN (1969), exige a demonstração de que ela
ocorra no meio sobrenadante, separado das células e, também, de que o seu
aparecimento no meio não dependa de danos irreversíveis à estrutura celular (HSU
e VAUGHN, 1969).
A localização de PAL em K. oxytoca é distinta da pululanase, a qual está
ancorada na superfície celular, como uma estratégia para degradar polissacarídeos
(HSU e VAUGHN, 1969).
4.4. Indução da pectato liase
Em análise de indução de PAL, foi encontrado que Klebsiella oxytoca
secretou a enzima quando cultivada em meio de cultura mineral tendo como fonte
de carbono, cadeias de pectina menores que 2.000 e 14.000 Da (Quadro 3). Dessa
forma, a exemplo de outros microrganismos, o comprimento da cadeia de pectina
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