RICARDO GENARI CARACTERÍSTICAS DE ... - SBI-Café - UFV

0,058 mg/mL (QUANTICK et al., 1983). Esses valores revelam que a PAL de
K. oxytoca apresenta uma baixa afinidade pelo substrato, quando comparada com os
outros microrganismos.
A adição de EDTA ao substrato de reação de PAL, na concentração de
20 mM, foi suficiente para a completa inativação da enzima, enquanto os cátions
bivalentes Mg +2 e Ca +2 (50 mM) tiveram um papel reativador da atividade da enzima
(Figura 15). O efeito de ativação do MgSO4 foi maior que o do CaCl2, ao contrário
dos efeitos encontrados em PAL purificadas (MACMILLAN e VAUGHN, 1964;
DAVÉ e VAUGHN, 1971; STUTZENBERGER, 1987; TARDY et al., 1997) ou não-
purificadas (HASEGAWA e NAGEL, 1966; TIEN et al., 1981; LIAO et al., 1993),
em que os autores mostram uma forte ativação do íon cálcio, apenas maior que
outros cloretos de bivalentes.
A ativação promovida pelo cálcio, na PAL intracelular de K. oxytoca, foi
semelhante à obtida por NAGEL e VAUGHN (1961), em trabalhos com Bacillus
polymyxa. A PAL intracelular parcialmente purificada de Erwinia carotovora
também mostrou completa inibição por EDTA e forte estímulo em reação com
CaCl2 (MORAN et al., 1968). A PAL extracelular de Pseudomonas fluorescens
requereu cálcio para sua indução e maior atividade da enzima, sendo que o EDTA
também exerceu efeito inibitório total (LIAO et al., 1993). A ativação da PAL de
Clostridium multifermentans por Ca +2 foi muito maior que a verificada para a K.
oxytoca (Figura 15), embora seja também inibida por EDTA (MACMILLAN e
VAUGHN, 1964).
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