RICARDO GENARI CARACTERÍSTICAS DE ... - SBI-Café - UFV

1984) e C. gloesporioides (WATTAD et al., 1994), enquanto a PAL extracelular
de Cladosporium cucumerinum possuiu atividade máxima em pH de 9,7
(ROBERTSEN, 1989).
A pequena liberação de grupos redutores por PAL de K. oxytoca isolada de
frutos de café foi atribuída a ação transeliminativa. Essa suposição tem como base
a observação de que a enzima produziu apenas uma pequena quantidade de grupos
redutores a pH 4,8, suportando a sugestão de ausência de PG, que possui um índice
ótimo de atividade ao redor de pH 5,0 (Figura 13).
Microrganismos de uma mesma espécie podem possuir poucas ou várias
isoenzimas de PAL, com características também distintas como em trabalhos com
E. chrysanthemi (BOCCARA et al., 1991). A ação combinada de enzimas
(cinco isoenzimas de E. chrysanthemi, BARTLING et al., 1995), pode exibir ação
sinergística sobre as várias pectinas.A Figura 14 revela concentração de cerca de
0,8% (p/ v) para saturação pelo substrato, nas condições padrões de dosagem.
A velocidade máxima de reação de PAL de K. oxytoca encontrada foi de 5,4
µmoles produto insaturado/min ⋅ mg de proteína e o valor de Km foi de
4,5 mg/mL, segundo transformação de Lineweaver-Burk (Figura 14) ou pela
análise de regressão não-linear do programa estatístico SAS. A determinação do
valor de Km segundo método de CORNISH-BOWDEN e EISENTHAL (1978), que
elimina o erro tipo Bias, foi de 3,36 (± 2,09) mg/mL, muito abaixo do primeiro
valor encontrado e com alto desvio-padrão. O valor de Km de PAL de K. oxytoca
foi assumido como o de 4,5 mg/mL e é superior ao encontrado por DAVÉ e
VAUGHN (1971), para PAL extracelular, parcialmente purificada de Bacillus
pumilus, cujo valor foi de 1,37 mg/mL.
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