RICARDO GENARI CARACTERÍSTICAS DE ... - SBI-Café - UFV

Log10 (UFC/mL)
9
8,5
8
7,5
7
6,5
6
5,5
5
4,5
4
0 5 10 15 20 25 30 35
Tempo de incubação (horas)
37
Com Sulfato de Amônio; k = 0,38
Sem Sulfato de Amônio; k = 0,29
Figura 7 - Crescimento de Klebsiella oxytoca em anaerobiose, com 400 mL de
meio MMP, contidos em fermentadores de bancada, pH 7,0, sem
agitação, a 25ºC, na presença e na ausência de sulfato de amônio
1g/ L no meio de cultivo.
4.2. Detecção da pectinase de Klebsiella oxytoca
A K. oxytoca isolada de frutos de café demonstrou ser capaz de utilizar a
pectina como única fonte de carbono, porém, as dosagens de pectinases no
sobrenadante do crescimento e em células centrifugadas íntegras, nas diversas
temperaturas, pHs e tempos de reação, não demonstraram a presença de enzimas
pectinolíticas, nem mesmo quando as células foram submetidas a um choque
térmico ou o magnésio foi adicionado na mistura de reação.
A permeabilização das células de K. oxytoca com tolueno também não
resultou em detecção de atividade de pectinases, bem como a lavagem das células e
a reação sem fosfato. A adição de azida ao meio MMP, após 24 horas de
crescimento e a dosagem das pectinases 24 horas, depois da adição de azida de
sódio, para verificar se o acúmulo de produtos de reação das pectinases poderiam
ser secretados da célula, não obteve sucesso. A azida inibe o crescimento das
células mas não altera a atividade de pectinases. O crescimento da bactéria em