RICARDO GENARI CARACTERÍSTICAS DE ... - SBI-Café - UFV

O gráfico obtido com os valores de absorvância nos diferentes comprimentos de
onda serviu para a definição do comprimento da onda a ser usado. O comprimento
de onda de 420 nm foi o escolhido, pelo fato de que pode haver interferências de
absorção de outros compostos nas radiações em torno de
300 nm.
3.3.3. Determinação da concentração ótima de pectina como fonte de carbono
Para a determinação da concentração ótima de pectina, no meio mineral, foi
avaliado o crescimento de K. oxytoca, em concentrações finais de 0,023, 0,047,
0,093, 0,140, 0,186, 0,233 e 0,279% (p/ v) de pectina cítrica Sigma, em 100 mL
de meio mineral, contidos em frascos Erlenmeyer de 250 mL. As determinações
das células viáveis foram feitas a cada três horas, no decorrer de 30 horas, em
triplicata. A avaliação do crescimento foi feita pela contagem do número de
colônias em Placas de Petri, após a incubação a 25ºC, por 24 horas.
Ao final do cultivo em frasco, incubado em BOD MA415 Marconi a 25ºC,
sem agitação, as células foram separadas por centrifugação a 4.000 g, por 10 min,
em centrífuga Fisher Scientist Marathon Micro A, e o sobrenadante foi utilizado
para a avaliação da absorvância a 420 nm, em espectrofotômetro Hitachi modelo
U-1100A. O valor da absorvância foi comparado com o de uma curva padrão, para
se determinar a porcentagem de pectina não-consumida.
3.3.4. Avaliação do crescimento sob agitação
O crescimento de K. oxytoca em meio MMP, sob condições de agitação de
150 rpm, em agitador rotatório, New Brunswick Scientific Incubator Shaker Series
25D, a 25ºC, foi realizado com utilização de frascos Erlenmeyer de
250 mL, contendo 100 mL de MMP. As determinações de células viáveis foram
feitas a cada três horas, no decorrer de 24 horas, em triplicata. A avaliação do
crescimento foi feita pela contagem do número de colônias em Placas de Petri,
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