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VOLTAR AO SUMÁRIO AVALIAÇãO DO geNe CYP3A5 e DA TeRAPIA ANTI-ReTROVIRAL POTeNTe ASSOcIADOS AO AUMeNTO DOS NÍVeIS LIPÍDIcOS eM PAcIeNTeS HIV POSITIVO. Taís Bauer Auler 1 , Nicole Pezzi 1 , Maria Cristina Cotta Matte 1 , Karen Olivia Bazzo 1 e Sabrina Esteves de Matos Almeida 2 Introdução: A pandemia causada pelo Vírus da Imunodeficiência Humana (HIV) já afeta mais de 33 milhões de indivíduos em todo o mundo. No intuito de diminuir a progressão da doença, que prejudica ou destrói as células de sistema imune, a terapia anti-retroviral surgiu. Inicialmente pouco eficaz, o tratamento contra a Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS) hoje apresenta-se eficiente, sendo este dado verificado através da redução das taxas de morbi-mortalidade dos indivíduos infectados. Apesar de todos os benefícios, efeitos adversos importantes são observados nos indivíduos que utilizam a Terapia Anti-retroviral Potente (HAART) e dentre eles está o aumento dos níveis lipídicos. Diversos fatores podem ocasionar estes efeitos adversos. Desta forma, o estudo de genes que atuam no transporte ou metabolismo de fármacos também são necessários para verificar uma possível influência sobre os efeitos colaterais gerados pelo uso destas drogas. Devido à relação que a enzima produzida pelo gene CYP3A5 possui com o metabolismo dos anti-retrovirais, em especial os inibidores de protease, e da alta freqüência do alelo mutante descrito na literatura, este torna-se um gene candidato para investigações farmacogenéticas. Objetivo: O presente estudo busca avaliar os efeitos metabólicos gerados pelo uso da HAART e a influência do gene CYP3A5 sobre os mesmos. Além disso, o estudo propõe-se a verificar a freqüência alélica deste gene em nossa população. Metodologia: Este é um estudo de caráter experimental, onde o gene de interesse foi amplificado e genotipado através da técnica PCR-RFLP. A análise estatística foi realizada com o programa SPSS 16.0. Resultados: Até o momento foram genotipados 74 indivíduos controles e 69 indivíduos usuários da HAART. A freqüência do gene CYP3A5*3 (alelo mutante) foi de 78% para indivíduos controles (indivíduos não infectados) e 76% para pacientes sob uso da HAART. Outras análises demonstraram diferenças significativas apenas nos níveis de HDL e LDL-colesterol entre pacientes (n=90) e indivíduos controles (n=111), além de observar um aumento dos níveis lipídicos (Colesterol Total, HDL, LDL) nos pacientes após o início da terapia. Contudo, cabe ressaltar que não foi observada nenhuma influência deste gene sobre tais alterações. conclusões: O estudo encontra-se em andamento e o aumento do número amostral poderá conduzir a novos resultados. Palavra-chave: CYP3A5; HAART; HIV. 1 Discentes Curso Biomedicina. Feevale. Laboratório de Biologia Molecular 2 Docente Curso Biologia. Feevale. Laboratório de Biologia Molecular. II Congresso Internacional de Bioanálises V Congresso Sul-Brasileiro & IX Semana Gaúcha de Biomedicina Ano 2 | Volume 2 | Agosto de 2009 18
VOLTAR AO SUMÁRIO AVALIAÇÃO DO PAPEL DO POLIMORFISMO Ala222Val DO GENE MTHFR SOBRE O DANO DE DNA EM INDIVÍDUOS EXPOSTOS A AGENTES MUTAGÊNICOS E EM INDIVÍDUOS CONTROLE Fernanda da Silva Machado 1 ; Lívia Herencio Teixeira 2 ; Cynthia Hernandes da Costa 2 ; Roberta Palazzo 2 ; Pâmela Bagatini 2 ; Michelle Mergener 2 ; Anna Maria Siebel 3 ; Luciano Basso da Silva 4 ; Sharbel Weidner Maluf 5 ; Fabiana Michelsen de Andrade 4 Introdução: A exposição a agentes genotóxicos pode causar dano ao DNA, aumentando a instabilidade genética e o risco a diversas doenças, como o câncer. A metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR) é uma enzima envolvida no metabolismo do folato (necessário para a manutenção da estabilidade genômica) e na metilação do DNA. Aparentemente, indivíduos portadores do alelo 222Val apresentam atividade enzimática reduzida. O papel desse alelo ainda é controverso na literatura, uma vez que está relacionado ao aumento de MN e de aberrações cromossômicas, e à diminuição BN. Objetivo: O objetivo desse trabalho foi verificar a relação entre este SNP e o grau de instabilidade genômica em indivíduos expostos a agentes mutagênicos e em controles. Metodologia: Foram estudados dois grupos de amostras: um grupo com 99 indivíduos expostos ocupacional ou terapeuticamente a agentes mutagênicos (agrotóxicos, pintura automotiva e hemodiálise), e um grupo controle de 64 indivíduos sem exposição ocupacional ou terapêutica. O dano de DNA foi avaliado pelas técnicas de micronúcleos e cometa. O SNP foi investigado por PCR/RFLP. Parâmetros de instabilidade genômica foram comparados entre grupos de genótipos através do teste Mann-Whitney, através do programa SPSS versão 16.0. Resultados: Não foram encontradas influências significantes do SNP sobre o dano de DNA tanto na amostra total, quanto nos indivíduos expostos e no grupo controle. Porém, com a estratificação da amostra total, a fim de excluir a influência de co-fatores que não fossem o SNP, algumas influências puderam ser percebidas. Em homens foi percebida a influência protetora do genótipo Val/Val sobre o número de MN e médias de cometa (p=0,07 e p=0,03), e em indivíduos que tiveram um maior dano de DNA por cometa foi percebida a relação entre o aumento do número de BN e o genótipo homozigoto para 222Val (p=0,059). conclusões: Concluiu-se que o SNP Ala222Val do gene MTHFR, pode estar envolvido com alguns tipos de dano de DNA, possuindo um efeito protetor de maneira aditiva a outros parâmetros que já levam à proteção ao dano de DNA, ou possuindo um efeito deletério somente em grupos que já tiveram um aumento no dano de DNA. Palavras-chave: agentes mutagênicos; polimorfismo genético; dano de DNA; MTHFR. 1 Aluna do Curso de Biomedicina – Centro Universitário Feevale 2 Bacharéis em Biomedicina – Centro Universitário Feevale 3 Bacharel em Ciências Biológicas – Centro Universitário Feevale 4 Docentes do Cursos de Biomedicina – Centro Universitário Feevale 5 Hospital de Clínicas de Porto Alegre II Congresso Internacional de Bioanálises V Congresso Sul-Brasileiro & IX Semana Gaúcha de Biomedicina Ano 2 | Volume 2 | Agosto de 2009 19
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