Hemofilia A - Genética - ufcspa

Se misturarmos uma amostra de plasma de um paciente hemofílico com plas-
ma normal, o TTPA da mistura será normal. Falhas na normalização dos valores do
TTPA após a mistura indica que o plasma do paciente hemofílico apresenta anticorpos
inibidores do fator VIII.
Cabe ressaltar também que o achado de plaquetopenia em pacientes hemofíli-
cos nos indica a possibilidade de haver trombocitopenia imune, causada pela associa-
ção com infecção pelo HIV 16 .
Diagnóstico Genético
A introdução da reação em cadeia da polimerase (PCR) para a amplificação
específica in vitro de curtos segmentos de DNA tem revolucionado a análise das muta-
ções no DNA. O DNA genômico pode ser retirado de um paciente hemofílico, por e-
xemplo, pela coleta e separação de glóbulos brancos sangüíneos. Após, todo o seg-
mento, inclusive as zonas de junção (splicing) entre éxons podem ser amplificadas pelo
uso de um primer específico para a determinada seqüência de DNA: os segmentos am-
plificados podem então ser diretamente seqüenciados para indicar a presença de qual-
quer um dos defeitos possíveis causadores de hemofilia A. Há, entretanto, dois proble-
mas com esta abordagem da análise do gene do fator VIII: 1) o grande tamanho da re-
gião codificadora – 26 éxons com mais de 9 Kb de seqüências codificadoras a serem
estudados; e 2) essa estratégia pode não detectar rearranjos gênicos (inversões) onde
a seqüência de éxons esteja inalterada. Estas e outras considerações devem ser anali-
sadas para adoção de outras estratégias que, dependentes do PCR, trazem facilidade e
rapidez na identificação desses defeitos, como o RT-PCR. Para a detecção de muta-
ções missense, uma variedade de métodos baseados em gel tem sido usados para
avaliar um éxon em particular por seqüenciamento (Michaelides et al 1994), ao passo
que rearranjos não-delecionais podem ser detectados pelo método de Southern blotting
usando um probe correspondente à região F8A do íntron 22 (Lakich et al 1993).
Diagnóstico Diferencial
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