Hemofilia A - Genética - ufcspa
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Se misturarmos uma amostra de plasma de um paciente hemofílico com plas-<br />
ma normal, o TTPA da mistura será normal. Falhas na normalização dos valores do<br />
TTPA após a mistura indica que o plasma do paciente hemofílico apresenta anticorpos<br />
inibidores do fator VIII.<br />
Cabe ressaltar também que o achado de plaquetopenia em pacientes hemofíli-<br />
cos nos indica a possibilidade de haver trombocitopenia imune, causada pela associa-<br />
ção com infecção pelo HIV 16 .<br />
Diagnóstico Genético<br />
A introdução da reação em cadeia da polimerase (PCR) para a amplificação<br />
específica in vitro de curtos segmentos de DNA tem revolucionado a análise das muta-<br />
ções no DNA. O DNA genômico pode ser retirado de um paciente hemofílico, por e-<br />
xemplo, pela coleta e separação de glóbulos brancos sangüíneos. Após, todo o seg-<br />
mento, inclusive as zonas de junção (splicing) entre éxons podem ser amplificadas pelo<br />
uso de um primer específico para a determinada seqüência de DNA: os segmentos am-<br />
plificados podem então ser diretamente seqüenciados para indicar a presença de qual-<br />
quer um dos defeitos possíveis causadores de hemofilia A. Há, entretanto, dois proble-<br />
mas com esta abordagem da análise do gene do fator VIII: 1) o grande tamanho da re-<br />
gião codificadora – 26 éxons com mais de 9 Kb de seqüências codificadoras a serem<br />
estudados; e 2) essa estratégia pode não detectar rearranjos gênicos (inversões) onde<br />
a seqüência de éxons esteja inalterada. Estas e outras considerações devem ser anali-<br />
sadas para adoção de outras estratégias que, dependentes do PCR, trazem facilidade e<br />
rapidez na identificação desses defeitos, como o RT-PCR. Para a detecção de muta-<br />
ções missense, uma variedade de métodos baseados em gel tem sido usados para<br />
avaliar um éxon em particular por seqüenciamento (Michaelides et al 1994), ao passo<br />
que rearranjos não-delecionais podem ser detectados pelo método de Southern blotting<br />
usando um probe correspondente à região F8A do íntron 22 (Lakich et al 1993).<br />
Diagnóstico Diferencial<br />
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