Tese Michele Fagundes.pdf - Caunesp

Material e Método
Foram utilizados 66 juvenis de pintado (Pseudoplatystoma corruscans) com
peso e comprimento médio de 70,15 ± 18,2 g e 25,28 ± 2,18 cm, respectivamente. Os
animais foram distribuídos aleatoriamente em 33 caixas pretas de polietileno de 60 L
(dois animais por caixa), sem sombrite, com sistema de circulação de água constante e
aeração. A temperatura média foi de 27,1 ± 0,25 °C, oxigênio dissolvido 6,5 ± 0,19
mg/mL. Antes de iniciar o experimento, os animais foram expostos a um regime de 12
horas de luz e 12 horas de escuridão durante sete dias, nas mesmas unidades
experimentais. Os animais foram alimentados com ração comercial (40% de proteína
bruta) uma vez ao dia entre as 18:30 e 19 horas, até adaptação que foi considerada
quando os animais começaram a se alimentar regularmente.
Depois de aclimatados, todos os animais permaneceram em jejum de 24 horas
antes da realização do experimento, onde foram expostos às diferentes condições de
luminosidade. Um grupo foi exposto à luz continua (lâmpadas fluorescentes de 1200
lux, medido com luxímetro na superfície das caixas) e outro grupo permaneceu em total
escuridão por um período de 24 horas, enquanto um grupo foi mantido nas mesmas
condições da aclimatação (12L:12E), sendo considerado o grupo controle. Ao término
das 24 horas todos os animais voltaram a regime de 12L:12E.
Após o término do período de exposição as diferentes luminosidades, os peixes
foram amostrados às 0 horas (ao findar às 24 horas de exposição) 24, 48, 72 horas e 1
semana depois, sendo coletado três caixas (n=6). Os animais foram anestesiados com
benzocaína (75 mg/L) para coleta de material biológico e realização da biometria.
Amostragem e métodos de análise
O sangue dos peixes foi coletado por punção do vaso caudal. Uma alíquota foi
separada em microtubos contendo 15µL EDTA e fluoreto de potássio, para análise de
hemoglobina, hematócrito, volume corpuscular médio (VCM) e contagem de células
vermelhas (RCB) (Celm CC 550). Uma amostra foi centrifugada (3000 rpm por 10 min
a 4ºC) para obtenção de plasma e análise de glicemia (Kit Labtest). O restante do
sangue foi colocado em outro microtubo e ficou em repouso por um período de duas
horas para separação do soro, o qual foi congelado para posterior análise de cloreto (kit
92