tese silvia carvalho - Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães - Fiocruz

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Sílvia Maria Santos Carvalho
Caracterização da transmissão da leishmaniose tegumentar americana no município de Ilhéus, Zona da Mata do Estado da Bahia
3.4 Isolamento de leishmania
Cento e vinte e seis fragmentos de baços de animais inoculados com material
de hamsters sentinelas (42) e amostras clínicas de pacientes (84), representadas
por punções aspirativas, foram utilizadas para o isolamento de Leishmania. Dos
inoculados com amostras de pacientes, um apresentou ascite e
hepatoesplenomegalia, sendo imediatamente eutanasiado quatro meses após o
inóculo; e um outro hamster apresentou lesão ulcerativa na genitália, sendo
eutanasiado aos três meses e meio da data do inóculo. A tentativa de isolamento do
parasito em meio de cultivo NNN e o exame microscópico direto em imprints de baço
e esfregaço de sangue de fragmento de fígado foram negativos. Foi realizada
biópsia da lesão ulcerada de um deles e também mantida em meio de cultivo.
Nenhum dos 42 hamsters sentinelas apresentou positividade nos testes
parasitológicos. No entanto, foi possível observar formas amastigotas presentes em
três das 84 amostras de animais inoculados com material humano através de
esfregaço, dois residentes da área rural e um da área urbana, mas com passagem
pela área rural do município. O quantitativo referente aos hamsters sentinelas se
justifica pela impossibilidade da realização de algumas idas ao campo, em virtude da
dificuldade de acesso às localidades (Anexos A, B, C) e à fuga de alguns desses
animais.
3.5 Diagnóstico molecular
3.5.1 Concentração de DNA genômico
A extração de DNA genômico a partir dos pools de amostras de tecido de
insetos flebotomíneos e das vísceras de hamsters revelou, respectivamente, uma
média de 1,04 e 5,74 µg desse ácido nucléico (gráficos 7 e 8).