Protocolo - ESE
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OBSERVAÇÃO DE MITOSE EM ÁPICES VEGETATIVOS<br />
DE CEBOLA<br />
Introdução<br />
Os vegetais apresentam zonas preferenciais de crescimento activo. Essas zonas, designadas meristemas,<br />
apresentam células cuja função primordial é a de se dividirem por mitose e permitem o crescimento dos<br />
órgãos vegetais.<br />
Um desses meristemas situa-se nas raízes, logo a seguir à sua extremidade, constituindo um material<br />
privilegiado para observar células em diferentes fases da mitose.<br />
<strong>Protocolo</strong> experimental<br />
MATERIAL:<br />
▪ raízes jovens de cebola (frescas ou fixadas) ▪ bisturi ou lâmina<br />
▪ carmim acético (ou orceína acética) ▪ vidro de relógio<br />
▪ ác. clorídrico 1N ▪ conta-gotas<br />
▪ ác. acético a 45% ▪ lamparina de álcool<br />
▪ papel de filtro ▪ pinça de pontas finas<br />
▪ papel de limpeza ▪ lâminas<br />
▪ goblé ▪ lamelas<br />
▪ microscópio óptico composto<br />
MÉTODO:<br />
1. Num goblé dos mais pequenos coloque 9 gotas de carmim acético e 1 gota de ác.<br />
clorídrico.<br />
2. De 3 ou 4 raízes jovens de cebola (cerca de 1cm de comprimento) retire os ápices<br />
vegetativos cortando as extremidades com cerca de 2mm de comprimento.<br />
3. Coloque os ápices vegetativos na solução anterior.<br />
4. Aqueça o goblé fazendo-o passar várias vezes sobre a chama de uma lamparina de<br />
álcool até à emissão de vapores (não pode ferver).<br />
5. Com uma pinça retire um dos ápices e coloque-o sobre uma lâmina.<br />
6. Coloque uma gota de ác. acético sobre o ápice vegetativo.<br />
7. Passe a lâmina pela chama da lamparina para aquecer um pouco (não pode ferver).
8. Sobre um dos lados da lâmina, ponha uma lamela que irá servir de calço a outra<br />
lamela que se coloca sobre o vértice vegetativo (fig.2).<br />
Fig.2<br />
9. Assim colocada a lamela, dê várias pancadinhas suaves na lamela com o cabo da<br />
agulha de dissecção de modo a dissociar as células do ápice.<br />
10. Retire a lamela que servia de calço deixando a lamela superior assentar totalmente<br />
sobre a preparação.<br />
11. Retire o excesso de corante colocando um pouco de papel de filtro sobre a<br />
preparação e comprimindo ligeiramente.<br />
12. Observe ao microscópio.<br />
13. Pode realizar outras preparações repetindo os procedimentos 5 a 11 com os restantes<br />
vértices.<br />
14. Registe as suas observações.