Caroline Valente dissertação de mestrado - Universidade Federal ...

As alterações metabólicas provocadas pelo estresse ao frio em mono e
dicotiledôneas são muito semelhantes, (VINCENTZ et al., 2004) embora exista, em
termos evolutivos uma grande distancia (NOGUEIRA et al., 2003; NOGUEIRA, 2004)
entre as angiospermas e gimnospermas, a análise destes fatores em gimnospermas
é de extrema importância. Dessa forma, a continuidade do presente estudo na
gimnosperma A. angustifolia poderá em muito contribuir no seu esclarecimento.
Os resultados dos estudos desenvolvidos neste trabalho mostram que em
mitocôndrias isoladas de células cultivadas desta conífera algumas das enzimas
responsivas ao estresse foram identificadas e/ou caracterizadas, e podem ter sua
expressão alterada pela exposição a condições variadas de temperatura, como foi
determinado para a PUMP. Esta proteína desacopladora, conhecida por ser alterada
pelo frio (CALEGARIO et al., 2003; PAVENTI et al., 2005), mostrou variações na
expressão gênica tanto em condições de maior ou de menor temperatura em
araucária. Como mostrado nos experimentos da Figura 13, a exposição das células
a duas diferentes situações, tanto de calor quanto de frio, alterou de modo
diferenciado o aparecimento da banda que indica a presença da PUMP. O estresse
por frio de 4 o C mostrou que a variação da exposição de 24 para 48 horas aumentou
consideravelmente a expressão da proteína. Já os dados com as células submetidas
a estresse por calor de 37°C por 12h, sugerem um aumento pouco significativo da
expressão da PUMP. Porém, assim como o resultado da exposição a 43°C por 4
horas, estes resultados devem ser melhor avaliados e sugerem a necessidade da
continuidade destes estudos.
A atividade da PUMP foi avaliada pela adição de BSA aos meios de
isolamento e/ou de reação. Os valores dos controles respiratórios mostram que a
presença de BSA previne o desacoplamento em todas as situações indicando sua
ação inibitória sobre a PUMP. Entretanto, pela análise do efeito de variações de
temperatura sobre a morfologia das células embriogênicas, a diminuição do número
de células causaria também redução no número de mitocôndrias. Assim sendo, uma
menor quantidade de mitocôndrias em relação a quantidade de vacúolos levaria ao
isolamento de uma organela potencialmente de menor qualidade, justificando um
menor controle respiratório das células tratadas pelo frio ou pelo calor. Esta poderia
ser uma das causas das atividades respiratórias alteradas, conseqüentes às